论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-14页 |
| 符号说明 | 第14-17页 |
| 第一部分 文献综述 | 第17-55页 |
| 第一章 镉致细胞凋亡的机制 | 第17-38页 |
| · 镉致环境污染现状 | 第17-18页 |
| 2 镉对机体的毒性作用 | 第18-19页 |
| 3 镉与细胞凋亡 | 第19-24页 |
| · Caspase在凋亡中的作用 | 第19-20页 |
| · 镉对细胞内钙离子浓度的影响 | 第20-21页 |
| · 镉与氧化损伤 | 第21-22页 |
| · 镉与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径 | 第22-24页 |
| 4 N-乙酰半胱氨酸拮抗重金属致细胞凋亡的效应机理 | 第24-26页 |
| 参考文献 | 第26-38页 |
| 第二章 镉影响骨代谢的基因调控机理 | 第38-55页 |
| 1 骨代谢 | 第38-39页 |
| 2 镉经间接途径影响骨代谢的基因机理 | 第39-40页 |
| 3 镉经直接途径影响骨代谢的基因机理 | 第40-45页 |
| · 镉通路在骨骼依赖基因表达的微阵列 | 第41-42页 |
| · 镉抑制骨骼形成的基因调控机理 | 第42页 |
| · 镉促进骨骼吸收的基因调控机理 | 第42-45页 |
| 参考文献 | 第45-55页 |
| 第二部分 实验研究 | 第55-142页 |
| 第一章 镉对大鼠成骨细胞的毒性损伤及NAC的保护效应 | 第55-71页 |
| 1 材料 | 第55-56页 |
| · 实验动物 | 第55页 |
| · 主要仪器 | 第55页 |
| · 主要试剂及材料 | 第55-56页 |
| 2 方法 | 第56-58页 |
| · 溶液的配置 | 第56页 |
| · SD大鼠成骨细胞的准备 | 第56-57页 |
| · 成骨细胞形态观察及鉴定 | 第57页 |
| · 镉对细胞存活率的影响及NAC的保护效应 | 第57-58页 |
| · 乳酸脱氢酶(LDH)释放率的测定 | 第58页 |
| · 统计分析 | 第58页 |
| 3 结果 | 第58-64页 |
| · 成骨细胞的形态观察 | 第58-59页 |
| · 碱性磷酸酶(ALP)染色鉴定成骨细胞 | 第59-60页 |
| · 镉对细胞存活率的影响及NAC的保护效应 | 第60-63页 |
| · cck-8还原法测定镉及NAC对细胞存活率的影响 | 第60-62页 |
| · 细胞实时监控检测锡对细胞指数的影响 | 第62-63页 |
| · 镉及NAC对成骨细胞乳酸脱氢酶释放率的影响 | 第63-64页 |
| 4 讨论 | 第64-67页 |
| · SD大鼠OB的获得及鉴定 | 第64-65页 |
| · 镉对细胞存活率的影响 | 第65-66页 |
| · 镉对乳酸脱氢酶(LDH)释放率的影响 | 第66页 |
| · NAC的保护效应 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 第二章 镉对大鼠成骨细胞形态结构和凋亡的影响 | 第71-85页 |
| 1 材料 | 第71页 |
| · 主要仪器 | 第71页 |
| · 主要试剂及材料 | 第71页 |
| · 方法 | 第71-74页 |
| · 细胞培养与分组 | 第71-72页 |
| · 主要溶液的配制 | 第72页 |
| · 光学显微镜观察镉及NAC对成骨细胞形态的影响 | 第72页 |
| · 荧光染色观察镉及NAC对成骨细胞核形态的影响 | 第72页 |
| · 透射电镜观察镉及NAC对成骨细胞超微结构的影响 | 第72-73页 |
| · 流式细胞仪检测镉及NAC对成骨细胞凋亡情况的影响 | 第73-74页 |
| · 统计分析 | 第74页 |
| 3 结果 | 第74-81页 |
| · 镉及NAC对成骨细胞形态的影响 | 第74-75页 |
| · 镉及NAC对成骨细胞超微结构的影响 | 第75-77页 |
| · 镉及NAC对成骨细胞核形态的影响 | 第77-80页 |
| · 镉及NAC对成骨细胞凋亡情况的影响 | 第80-81页 |
| 4 讨论 | 第81-83页 |
| · 镉对成骨细胞形态结构的影响 | 第81页 |
| · 镉对成骨细胞凋亡的影响 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-85页 |
| 第三章 镉致大鼠成骨细胞氧化损伤及NAC的保护效应 | 第85-98页 |
| 1 材料 | 第85页 |
| · 实验动物 | 第85页 |
| · 主要仪器 | 第85页 |
| · 主要试剂及材料 | 第85页 |
| 2 方法 | 第85-87页 |
| · 主要溶液的配制 | 第85-86页 |
| · 细胞培养与分组 | 第86页 |
| · 细胞内SOD、GR活性及GSH含量的测定 | 第86页 |
| · 细胞内活性氧(ROS)水平的测定 | 第86页 |
| · 成骨细胞线粒体膜电位的检测 | 第86-87页 |
| · 统计分析 | 第87页 |
| 3 结果 | 第87-91页 |
| · 镉及NAC对成骨细胞内SOD、GR活性及GSH含量的影响 | 第87-89页 |
| · 镉及NAC对成骨细胞内ROS水平的影响 | 第89-90页 |
| · 镉及NAC对成骨细胞线粒体膜电位的影响 | 第90-91页 |
| 4 讨论 | 第91-95页 |
| · 镉对细胞SOD、GR活性和GSH含量的影响及NAC的保护作用 | 第92-93页 |
| · 镉对成骨细胞内活性氧水平的影响及NAC的保护作用 | 第93页 |
| · 镉对成骨细胞线粒体膜电位的影响 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-98页 |
| 第四章 Caspase途径在镉致大鼠成骨细胞凋亡中的作用 | 第98-108页 |
| 1 材料 | 第98页 |
| · 实验动物 | 第98页 |
| · 主要仪器 | 第98页 |
| · 主要试剂和材料 | 第98页 |
| 2 方法 | 第98-99页 |
| · 主要溶液的配制 | 第98页 |
| · 细胞培养与分组 | 第98-99页 |
| · 镉对成骨细胞Caspase-3活性的影响 | 第99页 |
| · Z-VAD-fmk对染镉成骨细胞存活率、形态及凋亡情况的影响 | 第99页 |
| · 统计分析 | 第99页 |
| 3 结果 | 第99-102页 |
| · 镉对成骨细胞Caspase-3活性的影响 | 第99-100页 |
| · Z-VAD-fmk对染镉成骨细胞存活率、形态及凋亡情况的影响 | 第100-102页 |
| 4 讨论 | 第102-105页 |
| 参考文献 | 第105-108页 |
| 第五章 钙离子途径在镉致大鼠成骨细胞凋亡中的作用 | 第108-125页 |
| 1 材料 | 第108页 |
| · 实验动物 | 第108页 |
| · 主要仪器 | 第108页 |
| · 主要试剂和材料 | 第108页 |
| 2 方法 | 第108-109页 |
| · 主要溶液的配制 | 第108页 |
| · 细胞培养与分组 | 第108-109页 |
| · 镉对大鼠成骨细胞[Ca~(2+)]_i的影响 | 第109页 |
| · Bapta-AM对染镉成骨细胞[Ca~(2+)]_i的影响 | 第109页 |
| · Bapta-AM对染镉成骨细胞存活率的影响 | 第109页 |
| · Bapta-AM对染镉成骨细胞形态和凋亡的影响 | 第109页 |
| · Bapta-AM对染镉成骨细胞ROS、△ψm的影响 | 第109页 |
| · 统计分析 | 第109页 |
| 3 结果 | 第109-116页 |
| · 镉对大鼠成骨细胞[Ca~(2+)]_i的影响 | 第110页 |
| · Bapta-AM对染镉成骨细胞[Ca~(2+)]_i的影响 | 第110-111页 |
| · Bapta-AM对染镉成骨细胞存活率的影响 | 第111-112页 |
| · Bapta-AM对染镉成骨细胞形态和凋亡的影响 | 第112-115页 |
| · Bapta-AM对染镉成骨细胞ROS、△ψm的影响 | 第115-116页 |
| 4 讨论 | 第116-121页 |
| · 细胞内维持钙稳态的机制及镉的影响 | 第117-120页 |
| · 镉致钙稳态的失衡引起细胞凋亡的可能机制 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-125页 |
| 第六章 MAPK途径在镉致大鼠成骨细胞凋亡中的作用 | 第125-135页 |
| 1 材料 | 第125-126页 |
| · 实验动物 | 第125页 |
| · 主要仪器 | 第125页 |
| · 主要试剂及材料 | 第125-126页 |
| 2 方法 | 第126-128页 |
| · 主要溶液的配制 | 第126页 |
| · 细胞培养与分组 | 第126页 |
| · 免疫印迹检测成骨细胞中ERK1/2、JNK和p38 MAPK蛋白表达 | 第126-128页 |
| 3 结果 | 第128-129页 |
| 4 讨论 | 第129-132页 |
| 参考文献 | 第132-135页 |
| 第七章 镉对大鼠成骨细胞RANKL/OPG的影响 | 第135-142页 |
| 1 材料 | 第135页 |
| · 实验动物 | 第135页 |
| · 主要仪器 | 第135页 |
| · 主要试剂及材料 | 第135页 |
| 2 方法 | 第135-136页 |
| · 主要溶液的配制 | 第135-136页 |
| · 细胞培养与分组 | 第136页 |
| · 免疫印迹检测RANKL/OPG蛋白表达 | 第136页 |
| 3 结果 | 第136-137页 |
| 4 讨论 | 第137-139页 |
| 参考文献 | 第139-142页 |
| 全文结论 | 第142-143页 |
| 致谢 | 第143-144页 |
