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苦马豆素诱导山羊黄体细胞凋亡的信号转导通路研究

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苦马豆素诱导山羊黄体细胞凋亡的信号转导通路研究
论文目录
 
摘要第1-9页
ABSTRACT第9-17页
前言第17-18页
文献综述第18-38页
  第一章 黄体细胞永生化研究进展第18-27页
    · 黄体细胞的形态特征第18-19页
    · 黄体细胞的功能第19-20页
      · 孕酮的合成与分泌第19-20页
    · 孕酮合成的调节第20-22页
      · 促黄体激素对孕酮合成分泌的调节第20-21页
      · 生长激素和胰岛素生长因子-I 对孕酮合成分泌的调节第21页
      · 前列腺素对孕酮合成分泌的影响第21-22页
    · 原代黄体细胞的分离培养第22-23页
      · 原代黄体细胞的增殖和衰老第22-23页
      · 衰老与端粒的关系第23页
      · 端粒酶的结构与功能第23页
    · 细胞的永生化第23-25页
      · 促使细胞永生的基本方法第24-25页
    · 黄体细胞系第25页
    · 端粒酶在细胞永生化中的优越性第25-27页
  第二章 植物生物碱诱导细胞凋亡的研究进展第27-38页
    · 细胞凋亡第27-29页
      · 凋亡与坏死第27页
      · 细胞凋亡的特征第27页
      · 细胞凋亡的调控第27-28页
      · Caspase 家族第28页
      · Bcl-2 蛋白家族第28页
      · 线粒体相关凋亡分子第28-29页
    · 细胞凋亡的生理意义第29页
    · 细胞周期与调控第29-30页
    · 植物生物碱诱导的细胞凋亡第30-35页
      · 苦参碱第30-31页
      · 粉防已碱第31-32页
      · 秋水仙碱第32页
      · 石蒜碱第32-33页
      · 千金藤碱第33-34页
      · 喜树碱第34页
      · 玫瑰树碱第34-35页
    · 苦马豆素第35-37页
      · 苦马豆素的来源和性质第35页
      · SW 引起家畜中毒的临床表现与病理变化第35-36页
      · 苦马豆素的作用第36页
      · 苦马豆素诱导细胞凋亡作用第36-37页
    · 本研究的目的和意义第37-38页
试验研究第38-89页
  第三章 永生化山羊黄体细胞系的建立及其生物学特征分析第38-55页
    · 材料第38-40页
      · 细胞和菌株第38-39页
      · 主要试剂第39页
      · 试验所用溶液及其配制第39-40页
      · 主要仪器第40页
    · 方法第40-47页
      · 山羊黄体细胞的分离培养第40-41页
      · 黄体细胞的鉴定第41页
      · hTERT 基因转染原代山羊黄体细胞第41-42页
      · 黄体细胞的纯化及鉴定第42-43页
      · 外源性 hTERT 在转染后黄体细胞中的表达和活性第43-45页
      · 转染后黄体细胞生物学功能的检测第45-46页
      · 转染后黄体细胞生物学特征的检测第46页
      · 统计学分析第46-47页
    · 结果第47-53页
      · 原代黄体细胞的分离培养和鉴定第47-48页
      · pCI-neo-hTERT 质粒的提取第48页
      · G418 对山羊黄体细胞最佳筛选浓度的确定第48页
      · 转染后阳性细胞的挑取第48页
      · 黄体细胞的纯化和鉴定第48-49页
      · hTERT 基因在黄体细胞中的表达和活性检测第49页
      · RT-PCR 检测转染后黄体细胞内关键基因的表达第49-50页
      · 放射免疫检测不同刺激物对转染后黄体细胞孕酮分泌量的影响第50页
      · 转染前后黄体细胞生长曲线的测定第50-51页
      · 转染前后黄体细胞凋亡检测第51页
      · 转染前后黄体细胞核型分析第51-52页
      · 软琼脂悬浮试验第52页
      · 裸鼠致瘤性试验第52-53页
    · 讨论第53-54页
    · 小结第54-55页
  第四章 苦马豆素对黄体细胞孕酮分泌和细胞活性的影响第55-72页
    · 材料第55-57页
      · SW 与细胞株第55页
      · 主要试剂第55-56页
      · 试验所用溶液及其配制第56-57页
      · 主要仪器第57页
    · 方法第57-61页
      · SW 对黄体细胞孕酮分泌的影响第57-58页
      · SW 对黄体细胞活性的影响第58页
      · QRT-PCR 检测 SW 对黄体细胞内 StAR,3β-HSD 和 P450scc 表达第58-59页
      · Western blot 检测 SW 对黄体细胞内 StAR,3β-HSD 和 P450scc 表达第59-60页
      · 流式细胞仪检测 SW 处理后黄体细胞周期分布第60页
      · Annexin-V FITC/PI 双标检测细胞凋亡率第60页
      · DNA 片段化分析第60页
      · 统计学分析第60-61页
    · 结果第61-69页
      · 不同浓度 SW 对黄体细胞孕酮分泌的影响第61-62页
      · 不同浓度 SW 对黄体细胞活性的影响第62-63页
      · 建立检测 StAR,3β-HSD 和 P450scc 基因的 QRT-PCR 方法第63-65页
      · SW 对转染后黄体细胞内表达 StAR 的影响第65页
      · SW 对转染后黄体细胞内表达 P450scc 的影响第65-66页
      · SW 对转染后黄体细胞内表达 3β-HSD 的影响第66页
      · SW 对转染后黄体细胞周期的影响第66-67页
      · SW 对转染后黄体细胞 G0/G1 周期蛋白的影响第67-68页
      · SW 诱导转染后黄体细胞凋亡第68-69页
    · 讨论第69-71页
    · 小结第71-72页
  第五章 苦马豆素诱导山羊黄体细胞凋亡的信号通路第72-89页
    · 材料第72-74页
      · SW 与所使用细胞第72页
      · 主要试剂第72页
      · 试验所用溶液及其配制第72-74页
      · 主要仪器第74页
    · 方法第74-77页
      · SW 对黄体细胞形态的影响第74-75页
      · SW 对黄体细胞内 Caspase-8,-9 和-3 的活性的影响第75页
      · Annexin-V FITC/PI 双标检测 SW 对原代黄体细胞凋亡率的影响第75页
      · DNA 片段化分析第75页
      · Western blot 检测第75-76页
      · QRT-PCR 检测 SW 对黄体细胞内 Bax 和 Bcl-2 mRNA 表达的变化第76页
      · 统计学分析第76-77页
    · 结果第77-86页
      · SW 对转染后黄体细胞形态,Caspase 活性和 PARP 表达的影响第77-78页
      · Caspase 级联反应在 SW 诱导转染后黄体细胞凋亡中的作用第78-79页
      · SW 对转染后黄体细胞内 Bcl-2 和 Bax mRNA 表达的影响第79-80页
      · SW 对转染后黄体细胞内 Fas,FasL,Bax 和 Bcl-2 表达的影响第80-81页
      · SW 对转染后黄体细胞内 Bax,Cyt c,AIF 和 Smac 转位的影响第81-82页
      · SW 对原代黄体细胞的诱导凋亡作用第82-83页
      · Caspase 级联反应在 SW 诱导原代黄体细胞凋亡中的作用第83-84页
      · SW 对原代黄体细胞内 Bax 和 Bcl-2 表达的影响第84-85页
      · SW 对原代黄体细胞 Cyt c 转位的影响第85-86页
    · 讨论第86-88页
    · 小结第88-89页
结论与创新点第89-91页
参考文献第91-105页
主要缩略词和中英文对照表第105-107页
致谢第107-108页
作者简介第108-109 页

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