论文目录 | |
| 摘要 | 第1-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 主要英文缩写对照表 | 第9-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-23页 |
| 1.1 研究背景及选题意义 | 第10-12页 |
| 1.1.1 研究背景 | 第10页 |
| 1.1.2 选题意义 | 第10-11页 |
| 1.1.3 基于核酸扩增反应的核酸分析方法 | 第11-12页 |
| 1.2 核酸等温扩增在生命分析领域的研究进展 | 第12-20页 |
| 1.2.1 核酸等温扩增方法简介 | 第12-13页 |
| 1.2.2 核酸等温扩增方法用于核酸分析 | 第13-15页 |
| 1.2.3 核酸等温扩增方法用于蛋白质和酶的检测 | 第15-17页 |
| 1.2.4 核酸等温扩增方法用于纳米材料的构筑 | 第17-18页 |
| 1.2.5 核酸等温扩增方法用于单细胞分析 | 第18-19页 |
| 1.2.6 基于核酸等温扩增方法的综合性检测仪器 | 第19-20页 |
| 1.3 研究内容和技术路线 | 第20-23页 |
| 1.3.1 液滴数字化检测体系用于直接检测血浆中的miRNA | 第21页 |
| 1.3.2 基于核酸等温扩增的Cas9剪切检测用于sgRNA的预筛选 | 第21页 |
| 1.3.3 DNA纳米弹簧多位点配体调控细胞膜表面蛋白质功能 | 第21-23页 |
| 第2章 数字化液滴检测系统用于血浆中的miRNA直接检测 | 第21-41页 |
| 2.1 引言 | 第23-25页 |
| 2.2 实验部分 | 第25-28页 |
| 2.2.1 药品与试剂 | 第25-26页 |
| 2.2.2 实验仪器与设备 | 第26页 |
| 2.2.3 健康人及癌症病人的血浆样品处理 | 第26-27页 |
| 2.2.4 核酸指数扩增反应(EXPAR) | 第27页 |
| 2.2.5 液滴微流控芯片的加工及液滴三维检测系统的搭建 | 第27-28页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第28-39页 |
| 2.3.1 核酸指数扩增反应(EXPAR)用于miRNA检测 | 第28-31页 |
| 2.3.2 基于微液滴的核酸指数扩增反应(ddEXPAR)用于miRNA检测 | 第31-33页 |
| 2.3.3 液滴数字化系统定量分析血浆样品中的Let-7a | 第33-36页 |
| 2.3.4 结肠癌病人临床血浆样品的直接分析 | 第36-39页 |
| 2.4 本章小结 | 第39-41页 |
| 第3章 基于核酸等温扩增的Cas9剪切检测用于sgRNA筛选 | 第41-62页 |
| 3.1 引言 | 第41-43页 |
| 3.2 实验部分 | 第41-49页 |
| 3.2.1 药品与试剂 | 第41-47页 |
| 3.2.2 实验仪器与设备 | 第47页 |
| 3.2.3 指向RNA(sgRNA)的转录合成 | 第47页 |
| 3.2.4 Cas9体外剪切反应 | 第47页 |
| 3.2.5 切口酶引发的核酸指数扩增(NTEXPAR)反应 | 第47-48页 |
| 3.2.6 CRISPR/Cas9质粒改造 | 第48页 |
| 3.2.7 CRISPR/Cas9基因沉默实验 | 第48-49页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第49-60页 |
| 3.3.1 NTEXPAR探针设计 | 第49-53页 |
| 3.3.2 NTEXPAR用于检测Cas9剪切后的双链DNA产物 | 第53-54页 |
| 3.3.3 NTEXPAR用于Cas9剪切活性分析 | 第54-56页 |
| 3.3.4 NTEXPAR用于sgRNA预筛选以提高Cas9剪切的特异性 | 第56-58页 |
| 3.3.5 预筛选的sgRNA可以提高基因编辑的特异性 | 第58-60页 |
| 3.4 本章小结 | 第60-62页 |
| 第4章 DNA纳米弹簧多位点配体调控细胞膜表面蛋白功能 | 第62-79页 |
| 4.1 引言 | 第62-64页 |
| 4.2 实验部分 | 第64-68页 |
| 4.2.1 药品与试剂 | 第64-66页 |
| 4.2.2 实验仪器与设备 | 第66页 |
| 4.2.3 DNA纳米弹簧的合成 | 第66页 |
| 4.2.4 RGD与DNA的连接反应 | 第66-67页 |
| 4.2.5 DNA纳米弹簧在基底表面的固定 | 第67页 |
| 4.2.6 DNA纳米弹簧调控细胞膜蛋白功能的细胞实验 | 第67-68页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第68-78页 |
| 4.3.1 DNA纳米弹簧可逆运动的表征 | 第68-71页 |
| 4.3.2 基于DNA纳米弹簧的多位点配体用于细胞培养 | 第71-75页 |
| 4.3.3 DNA纳米弹簧用于可逆调控细胞膜蛋白的功能 | 第75-78页 |
| 4.4 本章小结 | 第78-79页 |
| 第5章 结论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-95页 |
| 致谢 | 第95-97页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第97-98页 |
