论文目录 | |
| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 1 研究背景 | 第12-36页 |
| 1.1 甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH) | 第12-17页 |
| 1.1.1 GAPDH在糖酵解中的作用 | 第12-13页 |
| 1.1.2 GAPDH在不同生物学过程中的作用 | 第13-16页 |
| 1.1.3 GAPDH的翻译后修饰 | 第16-17页 |
| 1.2 肝癌的流行病学与发病机制研究 | 第17-23页 |
| 1.2.1 肝癌的流行病学 | 第17-18页 |
| 1.2.2 肝癌的发病机制 | 第18-20页 |
| 1.2.3 癌症与组蛋白修饰 | 第20-21页 |
| 1.2.4 癌症与细胞周期 | 第21-22页 |
| 1.2.5 癌症与炎症 | 第22-23页 |
| 1.3 代谢与癌症 | 第23-30页 |
| 1.3.1 糖酵解与Warburg effect | 第23-25页 |
| 1.3.2 GAPDH与癌症 | 第25-26页 |
| 1.3.3 丝氨酸代谢与癌症 | 第26-29页 |
| 1.3.4 代谢抑制药物与抗肿瘤 | 第29-30页 |
| 1.4 肥胖 | 第30-33页 |
| 1.4.1 肥胖与癌症 | 第31-32页 |
| 1.4.2 肥胖与代谢疾病 | 第32-33页 |
| 1.5 脂肪组织及脂肪细胞分化 | 第33-35页 |
| 1.5.1 脂肪组织 | 第33页 |
| 1.5.2 脂生成与糖酵解 | 第33页 |
| 1.5.3 脂肪细胞分化 | 第33-35页 |
| 1.6 本论文的研究内容 | 第35-36页 |
| 2 实验方法与材料 | 第36-52页 |
| 2.1 实验材料 | 第36-40页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第36页 |
| 2.1.2 细胞系 | 第36页 |
| 2.1.3 病人样品 | 第36页 |
| 2.1.4 质粒 | 第36-37页 |
| 2.1.5 主要实验仪器 | 第37-38页 |
| 2.1.6 试剂及耗材 | 第38-40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-52页 |
| 2.2.1 DEN诱导小鼠肝癌模型的建立 | 第40-41页 |
| 2.2.2 高脂食物诱导肥胖小鼠模型的建立 | 第41页 |
| 2.2.3 裸鼠皮下移植瘤实验 | 第41页 |
| 2.2.4 GAPDH酶活性的检测 | 第41页 |
| 2.2.5 体外细胞的缺氧 | 第41-42页 |
| 2.2.6 免疫组织化学染色 | 第42页 |
| 2.2.7 免疫荧光染色 | 第42-43页 |
| 2.2.8 蛋白质免疫印记 | 第43-44页 |
| 2.2.9 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第44页 |
| 2.2.10 蛋白质免疫共沉淀 | 第44-45页 |
| 2.2.11 荧光定量PCR | 第45-46页 |
| 2.2.12 点杂交(DNA) | 第46-47页 |
| 2.2.13 染色质免疫共沉淀 | 第47-48页 |
| 2.2.14 基因芯片及数据分析 | 第48-49页 |
| 2.2.15 平板克隆形成与软琼脂克隆形成 | 第49页 |
| 2.2.16 MTT | 第49页 |
| 2.2.17 细胞代谢组学分析 | 第49-50页 |
| 2.2.18 小鼠肝脏中游离氨基酸的检测 | 第50页 |
| 2.2.19 血清中同型半胱氨酸检测 | 第50-51页 |
| 2.2.20 前体脂肪细胞的诱导分化 | 第51页 |
| 2.2.21 统计方法 | 第51-52页 |
| 3 实验结果 | 第52-85页 |
| 3.1 GAPDH通过调控PHGDH促进肝癌的发生 | 第52-78页 |
| 3.1.1 GAPDH促进小鼠肝脏中的细胞增殖 | 第52-54页 |
| 3.1.2 GAPDH加剧DEN诱导的小鼠肝癌形成 | 第54-56页 |
| 3.1.3 GAPDH在DEN诱导条件下促进细胞增殖及炎症的发生 | 第56-58页 |
| 3.1.4 全长或酵解活性缺失的GAPDH都可以在体外培养的肝细胞中促进细胞增殖 | 第58-61页 |
| 3.1.5 敲低GAPDH会抑制体外培养肝细胞的增殖水平 | 第61-62页 |
| 3.1.6 GAPDH促进甲硫氨酸循环 | 第62-64页 |
| 3.1.7 GAPDH促进组蛋白甲基化修饰 | 第64-68页 |
| 3.1.8 BIX01294显著性抑制GAPDH引起的细胞增殖 | 第68-69页 |
| 3.1.9 GAPDH调控PHGDH | 第69-70页 |
| 3.1.10 PHGDH在GAPDH加速的肝癌发生和发展过程中是必需的 | 第70-72页 |
| 3.1.11 癌症病人样本中GAPDH表达水平与PHGDH及组蛋白修饰呈正相关 | 第72-75页 |
| 3.1.12 小结与讨论 | 第75-78页 |
| 3.2 GAPDH促进高脂食物诱导下小鼠的肥胖及体外脂肪细胞的分化 | 第78-85页 |
| 3.2.1 db/db小鼠模型中GAPDH的表达量上升 | 第78页 |
| 3.2.2 在高脂食物喂养条件下GAPDH转基因小鼠比野生型小鼠更容易肥胖 | 第78-81页 |
| 3.2.3 脂肪和肝脏组织的表达谱芯片分析结果 | 第81页 |
| 3.2.4 GAPDH不影响肝细胞中的糖脂代谢过程 | 第81-82页 |
| 3.2.5 GAPDH促进前体脂肪细胞向脂肪细胞分化 | 第82-83页 |
| 3.2.6 小结与讨论 | 第83-85页 |
| 讨论与展望 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-101页 |
| 缩略词表 | 第101-103页 |
| 附表 | 第103-104页 |
| 博士期间发表论文 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105页 |
