论文目录 | |
| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-21页 |
| 英文缩略表 | 第21-24页 |
| 1 绪论 | 第24-47页 |
| 1.1 核酸扩增检测技术的概述 | 第24-27页 |
| 1.1.1 核酸扩增技术在食品安全检测领域的应用 | 第24-25页 |
| 1.1.2 核酸扩增检测技术的质量控制标准 | 第25-26页 |
| 1.1.3 核酸扩增检测技术的基本组成模块 | 第26-27页 |
| 1.1.4 本节小结 | 第27页 |
| 1.2 当前核酸提取方法及存在的问题 | 第27-31页 |
| 1.2.1 组织细胞的裂解 | 第28页 |
| 1.2.2 核酸分离与纯化 | 第28-30页 |
| 1.2.3 基于磁性微球的核酸分离与纯化方法的应用 | 第30页 |
| 1.2.4 粗提取核酸样本直接用于扩增 | 第30-31页 |
| 1.2.5 本节小结 | 第31页 |
| 1.3 当前核酸扩增方法及其主要特点 | 第31-36页 |
| 1.3.1 聚合酶链式反应(PCR) | 第32-33页 |
| 1.3.2 环介导等温扩增(LAMP) | 第33-35页 |
| 1.3.3 切刻酶恒温扩增(NEAA) | 第35-36页 |
| 1.3.4 本节小结 | 第36页 |
| 1.4 当前核酸扩增产物的检测手段及存在的问题 | 第36-43页 |
| 1.4.1 用于核酸扩增产物检测的方法 | 第36-39页 |
| 1.4.2 终点法用于核酸扩增产物检测存在的问题 | 第39-41页 |
| 1.4.3 当前核酸扩增检测技术的发展趋势 | 第41-42页 |
| 1.4.4 本节小结 | 第42-43页 |
| 1.5 研究目的、内容和技术路线 | 第43-46页 |
| 1.5.1 研究目的和内容 | 第43-44页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第44-46页 |
| 1.6 本章小结 | 第46-47页 |
| 2 基于磁性微球的大米基因组DNA提取方法 | 第47-62页 |
| 2.1 引言 | 第47-48页 |
| 2.2 实验部分 | 第48-53页 |
| 2.2.1 材料和试剂 | 第48-49页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第49-50页 |
| 2.2.3 实验方法 | 第50-53页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第53-60页 |
| 2.3.1 磁性微球的表征 | 第53-55页 |
| 2.3.2 不同裂解液与结合液的组合对DNA提取产量及纯度的影响 | 第55-56页 |
| 2.3.3 实时荧光PCR分析提取DNA的扩增效果 | 第56-57页 |
| 2.3.4 磁性微球法提取DNA用于转基因样本掺杂检测 | 第57-60页 |
| 2.4 本章小结 | 第60-62页 |
| 3 粗提取核酸样本用于环介导等温扩增的转基因作物田间快速检测方法 | 第62-78页 |
| 3.1 引言 | 第62-63页 |
| 3.2 实验部分 | 第63-67页 |
| 3.2.1 材料和试剂 | 第63-64页 |
| 3.2.2 仪器设备 | 第64页 |
| 3.2.3 实验方法 | 第64-67页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第67-76页 |
| 3.3.1 无纯化步骤的DNA粗提取条件探究 | 第67-70页 |
| 3.3.2 结合可视化检测分析保温杯作为供热装备进行环介导等温扩增的可行性 | 第70-74页 |
| 3.3.3 粗提取DNA在无电供热设备的条件下用于实际样本的检测 | 第74-76页 |
| 3.4 本章小结 | 第76-78页 |
| 4 基于切刻酶恒温扩增体系的检测方法 | 第78-107页 |
| 4.1 引言 | 第78-83页 |
| 4.2 实验部分 | 第83-87页 |
| 4.2.1 材料和试剂 | 第83-84页 |
| 4.2.2 仪器设备 | 第84页 |
| 4.2.3 实验方法 | 第84-87页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第87-105页 |
| 4.3.1 预孵育产生的背景信号对扩增的影响 | 第87-88页 |
| 4.3.2 切刻酶活性对扩增的影响 | 第88-91页 |
| 4.3.3 镁离子浓度对扩增的影响 | 第91-92页 |
| 4.3.4 目标产物长度对扩增的影响 | 第92-93页 |
| 4.3.5 引物在模板上的结合位点以及外引物的存在对扩增的影响 | 第93-96页 |
| 4.3.6 单价阳离子和聚合酶种类对扩增的影响 | 第96页 |
| 4.3.7 用于实际样本检测的扩增方法的建立 | 第96-99页 |
| 4.3.8 横向流动试纸条用于扩增产物检测的原理及条件 | 第99-100页 |
| 4.3.9 不对称扩增对横向流动试纸条检测结果的影响 | 第100-102页 |
| 4.3.10 基于切刻酶恒温扩增与横向流动试纸条方法用于转基因样本检测的灵敏度 | 第102-103页 |
| 4.3.11 基于切刻酶恒温扩增与横向流动试纸条方法对抑制剂的耐受性 | 第103-104页 |
| 4.3.12 可抛弃式卡盒用于气溶胶污染的预防 | 第104-105页 |
| 4.4 本章小结 | 第105-107页 |
| 5 基于纳米材料的核酸扩增体系荧光检测方法 | 第107-128页 |
| 5.1 引言 | 第107-109页 |
| 5.2 实验部分 | 第109-112页 |
| 5.2.1 材料和试剂 | 第109-110页 |
| 5.2.2 仪器设备 | 第110-111页 |
| 5.2.3 实验方法 | 第111-112页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第112-126页 |
| 5.3.1 用于消除荧光背景信号的纳米材料的筛选 | 第112-114页 |
| 5.3.2 纳米材料用于监测PCR扩增过程的荧光信噪比 | 第114-116页 |
| 5.3.3 纳米材料对不同染料产生的荧光信号的影响 | 第116-119页 |
| 5.3.4 用于增强PCR荧光检测信号的纳米材料的进一步比较 | 第119-120页 |
| 5.3.5 利用纳米材料增强PCR荧光信噪比的机理 | 第120-122页 |
| 5.3.6 纳米材料消除PCR的非特异性扩增 | 第122-125页 |
| 5.3.7 纳米材料增强PCR信号在转基因样本检测中的应用 | 第125-126页 |
| 5.4 本章小结 | 第126-128页 |
| 6 全文总结与展望 | 第128-132页 |
| 6.1 主要研究结论 | 第128-129页 |
| 6.2 主要创新点 | 第129-130页 |
| 6.3 进一步研究展望 | 第130-132页 |
| 参考文献 | 第132-152页 |
| 作者简历 | 第152-154页 |
