论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-12页 |
| 目录 | 第12-17页 |
| 第一章 高分子基因传递载体的研究进展 | 第17-47页 |
| 1 引言 | 第17-18页 |
| 2 阳离子高分子基因传递系统 | 第18-28页 |
| · 阳离子高分子载体／DNA复合物进行基因传递的一般过程 | 第18-19页 |
| · 用于基因传递的阳离子高分子载体 | 第19-26页 |
| · 聚赖氨酸 | 第20页 |
| · 聚乙烯亚胺(polyethyleneimine，PEI) | 第20-21页 |
| · 脱乙酰壳多糖(chitosan) | 第21-22页 |
| · 树形高分子(dendrimer) | 第22-24页 |
| · 阳离子聚磷酸酯(polyphosphoester)和聚磷酰胺(polyphosphoramidate) | 第24-25页 |
| · 其他阳离子高分子 | 第25-26页 |
| · 含有多功能组分的聚阳离子基因传递系统 | 第26-28页 |
| · 含有靶向性组分的高分子基因传递系统 | 第26-27页 |
| · 含有内涵体(endosome)破膜组分的高分子基因传递系统 | 第27页 |
| · 含有核定位传导信号组分的高分子基因传递系统 | 第27-28页 |
| 3 温度敏感的聚合物基因传递系统 | 第28页 |
| 4 聚合物胶束基因传递系统 | 第28-29页 |
| 5 非离子高分子基因传递系统 | 第29页 |
| 6 其它 | 第29页 |
| 7 结论 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-47页 |
| 第二章 以间苯三甲酸为核的三方向聚酰胺一胺树形高分子作为基因传递载体的研究 | 第47-69页 |
| 1 引言 | 第47-48页 |
| 2 实验部分 | 第48-50页 |
| · 材料和方法 | 第48页 |
| · 聚酰胺-胺树形高分子的合成 | 第48页 |
| · 大鼠元代肝细胞的分离及培养 | 第48-49页 |
| · 质粒DNA的分离和纯化 | 第49页 |
| · 凝胶电泳 | 第49页 |
| · 溴化乙啶置换 | 第49页 |
| · G4～G8／pVR1255复合物粒径和zeta电位测定 | 第49页 |
| · 聚酰胺-胺树形分子G4～G8的细胞毒性 | 第49-50页 |
| · 聚酰胺-胺树形分子G4～G8介导外源基因DNA转染体外细胞 | 第50页 |
| · 聚酰胺-胺树形分子G6的酸碱滴定 | 第50页 |
| 3 结果与讨论 | 第50-64页 |
| · 三方向核聚酰胺-胺树形高分子G1～G8的合成和表征 | 第50-54页 |
| 3.2 G4～G8的体外(in vitro)细胞毒性 | 第54页 |
| · G4～G8与质粒DNA的相互作用 | 第54-58页 |
| · 凝胶电泳 | 第54-56页 |
| · 溴化乙啶置换实验 | 第56页 |
| · G4～G8／pDNA复合物的粒径 | 第56-58页 |
| · G4～G8／pDNA复合物的zeta电位 | 第58页 |
| · 聚酰胺-胺树形高分子G4～G8介导外源DNA转染细胞 | 第58-63页 |
| · G4～G8／pDNA复合物转染细胞 | 第58-60页 |
| · 血清对G6／pDNA复合物转染细胞的影响 | 第60-61页 |
| 3.4.3 氯喹和Bafilomycin A1对G6／pDNA复合物转染细胞的影响 | 第61-63页 |
| · 本章主要结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 第三章 聚磷酰胺基因传递载体的研究一侧链结构影响其转染效率 | 第69-89页 |
| 1 引言 | 第69-70页 |
| 2 实验部分 | 第70-73页 |
| · 材料和方法 | 第70页 |
| · PPA载体的合成 | 第70-71页 |
| · 荧光胺分析法定量PPA载体的伯氨基数 | 第71页 |
| · 大鼠元代干细胞的分离及培养 | 第71页 |
| · PPA载体的体外细胞毒性 | 第71-72页 |
| · PPA／DNA复合物的制备和凝胶电泳 | 第72页 |
| · PPA／pVR1255复合物粒径和zeta电位测定 | 第72页 |
| · PPA载体介导外源基因DNA转染体外细胞 | 第72页 |
| · PPA载体介导的体内转染实验 | 第72-73页 |
| · PPA-EA和PPA-DEA增强pVR1255基因在小鼠后腿胫骨前肌中的表达 | 第73页 |
| · PPA-DEA通过胆管注射途径介导pVR1255转染大鼠肝脏 | 第73页 |
| 3 结果与讨论 | 第73-85页 |
| · 聚磷酰胺的合成及表征 | 第73-77页 |
| · PPA的细胞毒性 | 第77-78页 |
| · PPA与质粒DNA的相互作用 | 第78-80页 |
| · 凝胶电泳 | 第78-79页 |
| · PPA／DNA复合物的粒径和zeta电位 | 第79-80页 |
| · PPA／DNA复合物介导的体外细胞转染 | 第80-82页 |
| · PPA／DNA复合物介导pVR1255在小鼠肌肉中的表达 | 第82-83页 |
| · PPA／DNA复合物介导pVR1255在大鼠肝脏中的表达 | 第83-84页 |
| · 本章主要结论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-89页 |
| 第四章 肝靶向聚磷酰胺基因载体一半乳糖化PPA／DNA三元复合物增强DNA在肝细胞中的表达 | 第89-113页 |
| 1 引言 | 第89页 |
| 2 实验部分 | 第89-92页 |
| · 材料和方法 | 第90页 |
| · Gal-PPA和Gal-PPA的合成 | 第90页 |
| · PPA-DEA和4％Gal-PPA-DEA在肌肉中的组织反应 | 第90页 |
| · Gal-PPA与RCA120的结合能力 | 第90-91页 |
| 2.5 Gal-PPA／PPA／pVR1255三元复合物的制备以及Dextran sulfate置换 | 第91页 |
| · 4％Gal-PPA-DEA／PPA／[35S]pVR1255三元复合物在HepG2细胞中的细胞摄取 | 第91页 |
| · 4％Gal-PPA-DEA通过门静脉注射增强pVR1255在小鼠肝中的表达 | 第91-92页 |
| 3 结果与讨论 | 第92-110页 |
| · Gal-PPA和Man-PPA的合成及表征 | 第92-93页 |
| · 凝胶电泳—PPA载体的半乳糖基取代程度对PPA载体与DNA相互作用的影响 | 第93-94页 |
| · Gal-PPA的体外细胞毒性 | 第94-96页 |
| · PPA-DEA和4％Gal-PPA-DEA在肌肉中的组织反应 | 第96页 |
| · Gal-PPA／DNA复合物对RCA120的亲和性 | 第96-100页 |
| · Gal-PPA-DPA／DNA二元复合物介导VR1255在HepG2细胞中的基因表达 | 第100页 |
| · Gal-PPA-DPA／DNA二元复合物和Gal-PPA-DPA／PPA／DNA三元复合物的稳定性 | 第100-102页 |
| · Gal-PPA-DPA与DNA形成的二元复合物或三元复合物的粒径及Zeta电位 | 第102-104页 |
| · 4％Gal-PPA-DEA／PPA／[35S]pVR1255三元复合物在HepG2细胞中的细胞吸收 | 第104-105页 |
| · Gal-PPA／PPA／pVRl255三元复合物靶向性转染肝细胞 | 第105-108页 |
| · Gal-PPA选择性增强PPA载体介导pVR1255转染HepG2细胞的效率 | 第105-107页 |
| · Gal-PPA-DPA半乳糖含量对大鼠元代肝细胞转染效率的影响 | 第107-108页 |
| · Gal-PPA-DEA增强荧光素酶基因在小鼠肝脏中的表达 | 第108-109页 |
| · 本章主要结论 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-113页 |
| 第五章 Galactose-PEG-PPA的合成及其作为肝靶向基因载体的研究 | 第113-131页 |
| 1 引言 | 第113页 |
| 2 实验部分 | 第113-114页 |
| · 实验和方法 | 第113-114页 |
| · 2％Gal-PEG-PPA的合成 | 第114页 |
| · PPA载体通过胆管注射途径介导基因传递 | 第114页 |
| 3 结果与讨论 | 第114-127页 |
| · Gal-PEG-PPA的合成与表征 | 第115-116页 |
| · 2％Gal-PEG-PPA的体外细胞毒性 | 第116页 |
| · PPA-DEA和2％Gal-PEG-PPA在小鼠肌肉中的组织反应 | 第116-119页 |
| · PPA载体与DNA的相互作用-凝胶电泳，复合物粒径和Zeta电位 | 第119-120页 |
| · 2％Gal-PEG-PPA／PPA／pVR1255三元复合物对RCA120的亲和性 | 第120-121页 |
| · 2％Gal-PEG-PPA／PPA／[~35S]pVR1255三元复合物在HepG2细胞中的细胞摄取 | 第121-122页 |
| · 2％Gal-PEG-PPA介导pVRl255靶向转染肝细胞 | 第122-124页 |
| · 2％Gal-PEG-PPA选择性增强pVR1255在HepG2细胞中的表达 | 第122-123页 |
| · 血清对2％Gal-PEG-PPA介导pVR1255转染hepatocytes的影响 | 第123-124页 |
| · 2％Gal-PEG-PPA介导pVR1255进行体内基因传递 | 第124-126页 |
| · 本章主要结论 | 第126-127页 |
| 参考文献 | 第127-131页 |
| 第六章 含有咪唑基团的聚磷酰胺(咪唑PPA结合体)的设计合成及其作为基因载体的研究 | 第131-145页 |
| 1 引言 | 第131页 |
| 2 实验部分 | 第131-132页 |
| · 材料和方法 | 第131-132页 |
| · 咪唑-PPA结合体的合成 | 第132页 |
| · HEA的合成 | 第132页 |
| · EA-co-His，DEA-co-His和PPA-His的合成 | 第132页 |
| · 酸碱滴定 | 第132页 |
| 3 结果与讨论 | 第132-143页 |
| · 咪唑-PPA结合体的分子设计 | 第132-133页 |
| · 咪唑-PPA结合体的合成与表征 | 第133-136页 |
| · 酸碱滴定分析 | 第136-138页 |
| · 咪唑基团的引入降低PPA的细胞毒性 | 第138页 |
| · 咪唑-PPA结合体与质粒DNA的相互作用 | 第138-142页 |
| · 凝胶电泳 | 第138-140页 |
| · 咪唑-PPA结合体／pVR1255复合物的粒径和zeta电位 | 第140-141页 |
| · 咪唑-PPA结合体所带正电荷的理论计算 | 第141-142页 |
| · 咪唑-PPA结合体介导pVR1255进行体外细胞转染 | 第142-143页 |
| · 本章主要结论 | 第143页 |
| 参考文献 | 第143-145页 |
| 论文总结 | 第145-147页 |
| 附录 作者在攻读博士学位期间已发表和待发表的论文 | 第147-149页 |
| 致谢 | 第149
页 |
