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水稻胚胎发生过程中的基因表达分析
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水稻胚胎发生过程中的基因表达分析
论文目录
 
中文摘要第1-6 页
英文摘要第6-8 页
本论文缩略词表第8-15 页
第一章 前言第15-41 页
　　引言第15 页
　　第一节 植物胚胎发生过程中的基因表达研究第15-21 页
　　　　1.研究胚胎发生的重要性第15-16 页
　　　　2.胎胎发生过程中的分子生物学第16-19 页
　　　　　　· 受精前后的基因表达第16 页
　　　　　　· 合子基因的激活第16-17 页
　　　　　　· 合子不等分裂和胚胎发育第17-18 页
　　　　　　· 胚柄第18 页
　　　　　　· 近期分离到的胚胎发育相关基因第18-19 页
　　　　3.体细胞胚胎发生过程中的分子生物学第19-20 页
　　　　4.早期胚乳发育过程中的分子生物学第20 页
　　　　5.展望第20-21 页
　　第二节 水稻基因组研究第21-28 页
　　　　1.国际水稻基因组测序第21-22 页
　　　　2.水稻功能基因组研究进展第22-27 页
　　　　　　· 转录水平上的基因表达研究第23 页
　　　　　　· 以PCR为研究基础的技术方法第23-25 页
　　　　　　· 以大规模杂交为基础的技术方法第25-26 页
　　　　　　· 基于蛋白质水平的基因表达研究-蛋白质组学的研究第26-27 页
　　　　3.生物信息学与基因功能的研究第27-28 页
　　　　4.问题与展望第28 页
　　第三节 文库的均一化第28-30 页
　　　　1.均一化总述第28-29 页
　　　　2.均一化原理第29-30 页
　　　　3.均一化的应用第30 页
　　第四节 RNA原位杂交技术在植物基因表达研究中的作用第30-31 页
　　第五节 植物的遗传转化第31-33 页
　　　　1.基因的遗传转化第31-32 页
　　　　2.基因沉默现象第32-33 页
　　第六节 植物的钙信号转导系统第33-41 页
　　　　1.植物钙信号系统第34-35 页
　　　　2.植物钙调素第35-38 页
　　　　　　· 钙调素基础知识第35-36 页
　　　　　　· 植物钙调素亚型及功能第36-38 页
　　　　3.植物钙相关的蛋白激酶第38-40 页
　　　　　　· 蛋白质的可逆磷酸化第38 页
　　　　　　· 植物中的蛋白激酶第38-39 页
　　　　　　· CDPK-SnRK超家族的分类和特性第39-40 页
　　　　5.展望第40-41 页
第二章 水稻胚胎cDNA文库的构建第41-66 页
　　引言第41 页
　　第一节 试剂与材料第41-42 页
　　　　1 植物材料第41 页
　　　　2 试剂第41 页
　　　　3 CPW分离液第41 页
　　　　4 水稻胚的显微分离第41-42 页
　　　　5 分离胚生活力的鉴定第42 页
　　第二节 文库的构建第42-48 页
　　　　1 mRNA直接提取第42-43 页
　　　　2.RT-PCR第43-45 页
　　　　3 连接，包装与转染第45-48 页
　　第三节 文库的分析，鉴定第48-50 页
　　　　1 试剂第48-49 页
　　　　2 对纯化后的cDNA进行随机PCR鉴定第49 页
　　　　3 滴度测定第49 页
　　　　4 连接效率测定第49 页
　　　　5 cDNA插入片段的分析第49-50 页
　　第四节 文库的筛选第50-51 页
　　　　1 96孔板大通量提取文库质粒DNA第50 页
　　　　2 文库质粒DNA点高密度膜第50 页
　　　　3 混合文库DNA探针标记第50-51 页
　　　　4 杂交及洗膜，压片第51 页
　　　　5 差异表达基因的挑选及再鉴定第51 页
　　　　6 测序第51 页
　　第五节 RNA原位杂交验证第51-66 页
　　　　一第52-58 页
　　　　　　1 石蜡切片的RNA原位杂交第52-57 页
　　　　　　2 胚胎的整体RNA原位杂交第57-58 页
　　　　二 结果与讨论第58-66 页
　　　　　　1 文库的构建第58-61 页
　　　　　　2 文库的筛选第61-65 页
　　　　　　3 原位杂交结果和讨论第65-66 页
第三章 水稻胚胎文库的均一化第66-73 页
　　引言第66 页
　　第一节 方法和材料第66-70 页
　　　　1 材料的准备第66 页
　　　　2 单双链DNA分离预实验条件确定第66-67 页
　　　　3 单链DNA(ssDNA)的制备第67 页
　　　　4 drive DNA的制备第67 页
　　　　5 杂交第67-68 页
　　　　6 转化第68 页
　　　　7 水稻胚胎均一化文库的质量检测第68-70 页
　　　　8 水稻胚胎均一化文库的筛选第70 页
　　第二节 结果和讨论第70-72 页
　　　　1 水稻胚胎均一化文库的构建第70 页
　　　　2 水稻胚胎均一化文库的质量检测第70-71 页
　　　　3 水稻胚胎均一化文库的筛选第71-72 页
　　第三节 问题与展望第72-73 页
第四章 利用基因芯片技术研究水稻胚胎基因表达谱第73-88 页
　　引言第73 页
　　第一节 材料与方法第73-75 页
　　　　1 水稻材料第73 页
　　　　2 cDNA的合成第73-74 页
　　　　3 cRNA合成第74 页
　　　　4 芯片杂交第74 页
　　　　5 数据分析第74 页
　　　　6 目的基因的获得第74-75 页
　　　　7 RNA原位杂交第75 页
　　第二节 结果和讨论第75-88 页
　　　　1 试验设计第75-76 页
　　　　2 芯片杂交结果的整体可靠性分析第76-78 页
　　　　3 对芯片杂交数据的整体分析第78-82 页
　　　　4 对芯片结果的分类分析第82-86 页
　　　　5 未知功能的水稻胚胎发育基因第86 页
　　　　6 部分差异表达基因的RNA原位杂交检测第86-88 页
第五章 农杆菌介导的水稻遗传转化第88-103 页
　　引言第88 页
　　第一节 材料与方法第88-99 页
　　　　1 常规材料的准备第88-92 页
　　　　2 构建表达载体过程中所用的常规质粒与一般载体构建策略第92-95 页
　　　　3 水稻超量表达载体的改造及构建策略第95-97 页
　　　　4 CIPK基因超量表达载体及RNAi载体的构建第97-98 页
　　　　5 水稻愈伤组织的诱导与转化第98-99 页
　　　　6 再生植株的PCR鉴定第99 页
　　第二节 结果和讨论第99-103 页
　　　　1 水稻超量表达载体的改造及构建策略第99-100 页
　　　　2 pZY载体的改造第100 页
　　　　3 利用水稻超量表达载体改造RNAi表达载体第100-101 页
　　　　4 CIPK基因的表达载体的构建第101-102 页
　　　　5 T0代转基因植株的获得第102 页
　　　　6 转基因植株的PCR鉴定第102-103 页
第六章 拟南芥CRK1的结构和生化分析第103-131 页
　　引言第103 页
　　第一节 AtCRK1基因序列分析第103-111 页
　　　　一 材料和方法第103-105 页
　　　　　　1 文库的筛选及5'-RACE第103-104 页
　　　　　　2 Northern杂交第104-105 页
　　　　二 结果和讨论第105-111 页
　　第二节 AtCRK1的钙调素结合性质分析第111-125 页
　　　　一 材料和方法第113-123 页
　　　　　　1 全基因和缺失突变体表达载体的构建第113-123 页
　　　　二 结果和讨论第123-125 页
　　第三节 AtCRK1的生化特性分析第125-131 页
　　　　一 材料和方法第125-126 页
　　　　二 结果和讨论第126-131 页
第七章 总讨论第131-135 页
　　1.研究水稻胚胎发生的意义第131-132 页
　　2.关于基因芯片结果的讨论第132-133 页
　　3.钙调素结合蛋白激酶的研究进展第133-135 页
参考文献第135-156 页
在读期间发表与投稿论文第156-157 页
致谢第157 页

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