滞育激素调控因子的分离纯化与N-乙基马来酰亚胺敏感因子的克隆及表达分析 |
论文目录 | | | 缩略词表 | 第1-7
页 | | 摘要 | 第7-8
页 | | Abstract | 第8-9
页 | | 第一章 前言 | 第9-22
页 | | 1 神经肽的概述 | 第9-14
页 | | · 肽的生物合成 | 第10-11
页 | | · 肽的表达释放 | 第11-12
页 | | · 昆虫的神经肽 | 第12-14
页 | | 2 神经肽的功能 | 第14-15
页 | | · 神经调节功能 | 第14-15
页 | | · 激素调节功能 | 第15
页 | | 3 神经肽的调控 | 第15-21
页 | | · 转运释放调控 | 第16
页 | | · 相关转运蛋白 | 第16-19
页 | | · 潜在调控因子 | 第19-21
页 | | 4 总结 | 第21-22
页 | | 第二章 材料方法 | 第22-43
页 | | 1 材料收集 | 第22
页 | | 2 常用方法 | 第22-25
页 | | · 总RNA抽提 | 第22
页 | | · mRNA的纯化 | 第22-23
页 | | · cDNA反转录 | 第23
页 | | · PCR扩增反应 | 第23
页 | | · 回收连接转化 | 第23-24
页 | | · 质粒抽提鉴定 | 第24-25
页 | | 3 RACE反应 | 第25-26
页 | | · 5'-cDNA扩增 | 第25-26
页 | | · 3'-cDNA扩增 | 第26
页 | | 4 Northern blot | 第26-28
页 | | · 试剂样品准备 | 第26-27
页 | | · 制胶电泳转膜 | 第27-28
页 | | · 放射探针标记 | 第28
页 | | · 杂交洗膜曝光 | 第28
页 | | 5 Southern blot | 第28-29
页 | | · 抽基因组DNA | 第28-29
页 | | · 酶切电泳转膜 | 第29
页 | | · 杂交洗膜曝光 | 第29
页 | | 6 RT-PCR | 第29-30
页 | | · 试剂样品准备 | 第29-30
页 | | · 电泳转膜杂交 | 第30
页 | | 7 原位杂交 | 第30-31
页 | | · 杂交探针准备 | 第30
页 | | · 杂交反应步骤 | 第30-31
页 | | 8 蛋白表达 | 第31-36
页 | | · 大肠杆菌系统 | 第31-34
页 | | · 杆状病毒系统 | 第34-36
页 | | 9 抗体制备 | 第36
页 | | 10 荧光双染 | 第36-37
页 | | · 荧光抗体标记 | 第36-37
页 | | · 免疫反应步骤 | 第37
页 | | 11 Western blot | 第37-39
页 | | · 蛋白样品制备 | 第37
页 | | · 制胶电泳染色 | 第37-39
页 | | 12 组织抽提 | 第39
页 | | 13 蛋白纯化 | 第39-41
页 | | · 传统柱层析法 | 第40-41
页 | | · RP—HPLC法 | 第41
页 | | 14 活性分析 | 第41-42
页 | | · 体内注射活性 | 第41
页 | | · 体外培养活性 | 第41-42
页 | | 15 质谱鉴定 | 第42-43
页 | | 第三章 结果分析 | 第43-64
页 | | 第一部分 调节滞育激素的脑因子(brain factor)研究 | 第43-51
页 | | 1 脑因子的初步鉴定 | 第43-46
页 | | 2 脑因子的分离纯化 | 第46-48
页 | | 3 脑因子的活性分析 | 第48-50
页 | | 4 脑因子的序列测定 | 第50-51
页 | | 第二部分 N-乙基马来酰亚胺敏感因子(NSF)克隆、表达和功能分析 | 第51-64
页 | | 1 NSF cDNA全长的克隆 | 第51-54
页 | | 2 NSF mRNA的组织分布 | 第54-57
页 | | 3 NSF在基因组的拷贝数 | 第57
页 | | 4 NSF活性结构域的表达 | 第57-58
页 | | 5 NSF多克隆抗体的制备 | 第58-59
页 | | 6 NSF,PTTH,DH共定位 | 第59-61
页 | | 7 NSF mRNA的发育变化 | 第61-63
页 | | 8 NSF protein的发育变化 | 第63-64
页 | | 总结展望 | 第64-67
页 | | 参考文献 | 第67-73
页 | | 致谢 | 第73-74
页 | | 附录 | 第74-75页 |
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