论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略词表 | 第10-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-48页 |
| 1.1 引言 | 第19页 |
| 1.2 真菌多糖的研究概况 | 第19-34页 |
| 1.2.1 真菌多糖的提取和纯化 | 第19-21页 |
| 1.2.2 真菌多糖的结构解析 | 第21-26页 |
| 1.2.2.1 多糖结构的化学分析 | 第22-23页 |
| 1.2.2.2 仪器分析法 | 第23-25页 |
| 1.2.2.3 生物学法 | 第25-26页 |
| 1.2.3 真菌多糖的免疫调节活性 | 第26-31页 |
| 1.2.3.1 真菌多糖对免疫器官和组织的影响 | 第27页 |
| 1.2.3.2 真菌多糖对免疫细胞的作用 | 第27-31页 |
| 1.2.4 真菌多糖发挥作用的模式识别受体及转导通路 | 第31-34页 |
| 1.3 猴头菇及猴头菇多糖研究概况 | 第34-35页 |
| 1.3.1 猴头菇简介 | 第34页 |
| 1.3.2 猴头菇多糖研究进展 | 第34-35页 |
| 1.4 本课题研究意义和研究内容 | 第35-39页 |
| 1.4.1 研究目的及意义 | 第35-36页 |
| 1.4.2 研究内容和技术路线 | 第36-39页 |
| 参考文献 | 第39-48页 |
| 第二章 猴头菇多糖的提取、分离纯化和结构鉴定 | 第48-71页 |
| 2.1 引言 | 第48页 |
| 2.2 实验材料与试剂 | 第48-50页 |
| 2.3 实验主要仪器与设备 | 第50-51页 |
| 2.4 实验方法 | 第51-55页 |
| 2.4.1 猴头菇粗多糖的提取 | 第51页 |
| 2.4.2 猴头菇多糖的醇沉、去蛋白 | 第51-52页 |
| 2.4.3 猴头菇多糖的纯化 | 第52页 |
| 2.4.4 猴头菇纯化多糖的基本成分测定 | 第52-53页 |
| 2.4.5 分子量的测定 | 第53页 |
| 2.4.6 傅里叶变换红外光谱(FT-IR)测定 | 第53页 |
| 2.4.7 单糖组成 | 第53-54页 |
| 2.4.8 高碘酸氧化和Smith降解 | 第54-55页 |
| 2.4.9 热稳定(TG/DSC)分析 | 第55页 |
| 2.4.10 核磁共振(NMR)分析 | 第55页 |
| 2.4.11 数据统计分析 | 第55页 |
| 2.5 实验结果与分析 | 第55-65页 |
| 2.5.1 猴头菇粗多糖的提取 | 第55-56页 |
| 2.5.2 猴头菇多糖的离子交换柱层析 | 第56-57页 |
| 2.5.3 猴头菇多糖HEP-W的葡聚糖凝胶柱层析 | 第57页 |
| 2.5.4 猴头菇多糖HEP-W的纯度及基本成分测定 | 第57-58页 |
| 2.5.5 猴头菇多糖HEP-W的结构鉴定 | 第58-65页 |
| 2.5.5.1 HPGPC测定 | 第58-59页 |
| 2.5.5.2 傅里叶变换红外光谱(FT-IR)分析 | 第59-60页 |
| 2.5.5.3 单糖组成分析 | 第60-61页 |
| 2.5.5.4 高碘酸氧化和Smith降解 | 第61-63页 |
| 2.5.5.5 热稳定性(TG-DSC)分析 | 第63-64页 |
| 2.5.5.6 核磁共振分析 | 第64-65页 |
| 2.6 本章小结 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 第三章 猴头菇纯化多糖HEP-W的链构象表征及小鼠脾淋巴细胞免疫活性 | 第71-93页 |
| 3.1 引言 | 第71-72页 |
| 3.2 实验材料与试剂 | 第72-74页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第72页 |
| 3.2.2 实验动物 | 第72页 |
| 3.2.3 实验试剂 | 第72-74页 |
| 3.3 实验主要仪器与设备 | 第74-75页 |
| 3.4 实验方法 | 第75-79页 |
| 3.4.1 猴头菇多糖HEP-W溶液的配制 | 第75-76页 |
| 3.4.2 猴头菇多糖HEP-W的链构象表征 | 第76-77页 |
| 3.4.2.1 原子力显微镜(AFM)观测 | 第76页 |
| 3.4.2.2 刚果红实验 | 第76页 |
| 3.4.2.3 X-射线衍射(XRD)分析 | 第76页 |
| 3.4.2.4 猴头菇多糖HEP-W的粘度分析 | 第76页 |
| 3.4.2.5 猴头菇多糖HEP-W的粒径分布测定 | 第76-77页 |
| 3.4.3 猴头菇多糖HEP-W对正常小鼠脾淋巴细胞的免疫活性研究 | 第77-78页 |
| 3.4.3.1 猴头菇多糖HEP-W的内毒素(LPS)检测 | 第77页 |
| 3.4.3.2 小鼠脾淋巴细胞的分离 | 第77页 |
| 3.4.3.3 小鼠脾淋巴细胞增殖能力测定 | 第77-78页 |
| 3.4.3.4 IL-2、IL-4、IFN-γ分泌含量的测定 | 第78页 |
| 3.4.4 数据统计分析 | 第78-79页 |
| 3.5 结果与分析 | 第79-88页 |
| 3.5.1 猴头菇多糖HEP-W的链构象表征 | 第79-84页 |
| 3.5.1.1 猴头菇多糖HEP-W的原子力显微镜(AFM)观察 | 第79-80页 |
| 3.5.1.2 猴头菇多糖HEP-W的刚果红实验 | 第80-81页 |
| 3.5.1.3 猴头菇多糖HEP-W的X射线衍射分析 | 第81-82页 |
| 3.5.1.4 猴头菇多糖HEP-W的粘度分析 | 第82-83页 |
| 3.5.1.5 猴头菇多糖HEP-W的粒度分布 | 第83-84页 |
| 3.5.2 猴头菇多糖HEP-W对正常小鼠脾淋巴细胞的免疫活性 | 第84-88页 |
| 3.5.2.1 内毒素的测定 | 第84-85页 |
| 3.5.2.2 猴头菇多糖HEP-W对正常小鼠脾淋巴细胞的增殖作用 | 第85-87页 |
| 3.5.2.3 猴头菇多糖HEP-W对正常小鼠脾淋巴细胞体外诱导的IL-2、IL-4和IFN-γ的影响 | 第87-88页 |
| 3.6 本章小结 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-93页 |
| 第四章 猴头菇纯化多糖HEP-W对巨噬细胞的免疫调节活性研究 | 第93-115页 |
| 4.1 前言 | 第93-94页 |
| 4.2 实验材料与试剂 | 第94-96页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第94页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第94-96页 |
| 4.3 实验主要仪器与设备 | 第96-97页 |
| 4.4 实验方法 | 第97-101页 |
| 4.4.1 猴头菇多糖HEP-W溶液配制及实验分组 | 第97页 |
| 4.4.2 巨噬细胞RAW264.7的培养 | 第97页 |
| 4.4.3 猴头菇多糖HEP-W对细胞存活率的影响 | 第97-98页 |
| 4.4.4 猴头菇多糖HEP-W对细胞活性氧(ROS)水平的影响 | 第98页 |
| 4.4.5 猴头菇多糖HEP-W对细胞吞噬中性红的影响 | 第98页 |
| 4.4.6 猴头菇多糖HEP-W对细胞吞噬FITC-标记的大肠杆菌的影响 | 第98-99页 |
| 4.4.7 猴头菇多糖HEP-W对细胞分泌NO、IL-6及TNF-α的影响 | 第99页 |
| 4.4.8 猴头菇多糖HEP-W对iNOS、IL-6和TNF-αmRNA表达的影响 | 第99-101页 |
| 4.4.9 数据统计分析 | 第101页 |
| 4.5 结果与分析 | 第101-111页 |
| 4.5.1 猴头菇多糖HEP-W对巨噬细胞存活率的影响 | 第101-102页 |
| 4.5.2 猴头菇多糖HEP-W对巨噬细胞分泌活性氧(ROS)的影响 | 第102-103页 |
| 4.5.3 猴头菇多糖HEP-W对巨噬细胞吞噬能力的影响 | 第103-106页 |
| 4.5.3.1 猴头菇多糖HEP-W对细胞吞噬中性红的影响 | 第104-105页 |
| 4.5.3.2 猴头菇多糖HEP-W对细胞吞噬FITC标记的大肠杆菌的影响 | 第105-106页 |
| 4.5.4 猴头菇多糖HEP-W对巨噬细胞分泌NO的影响 | 第106-107页 |
| 4.5.5 猴头菇多糖HEP-W对巨噬细胞分泌IL-6及TNF-α的影响 | 第107-109页 |
| 4.5.6 猴头菇多糖HEP-W对巨噬细胞细胞因子mRNA表达的影响 | 第109-111页 |
| 4.6 本章小结 | 第111页 |
| 参考文献 | 第111-115页 |
| 第五章 猴头菇纯化多糖HEP-W的免疫调节机理研究 | 第115-142页 |
| 5.1 前言 | 第115-116页 |
| 5.2 实验材料与试剂 | 第116-120页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第116页 |
| 5.2.2 实验试剂 | 第116-120页 |
| 5.3 实验主要仪器与设备 | 第120-121页 |
| 5.4 实验方法 | 第121-124页 |
| 5.4.1 猴头菇纯化多糖HEP-W溶液配制及实验分组 | 第121页 |
| 5.4.2 小鼠巨噬细胞RAW264.7的培养 | 第121页 |
| 5.4.3 小鼠巨噬细胞膜表面识别HEP-W受体的研究 | 第121-122页 |
| 5.4.4 Westernblot检测HEP-W对巨噬细胞免疫通路的影响 | 第122-124页 |
| 5.4.5 数据统计分析 | 第124页 |
| 5.5 结果与分析 | 第124-137页 |
| 5.5.1 猴头菇多糖HEP-W对RAW264.7细胞表面膜受体的识别 | 第124-129页 |
| 5.5.1.1 不同细胞膜受体对HEP-W分泌NO、IL-6以及TNF-α的影响 | 第125-128页 |
| 5.5.1.2 不同细胞膜受体对HEP-W分泌ROS的影响 | 第128-129页 |
| 5.5.2 猴头菇多糖HEP-W对MyD88依赖性（MyD88/IRAK-1/TRAF-6信号传导通路的影响 | 第129-133页 |
| 5.5.2.1 猴头菇多糖HEP-W对MyD88信号传导通路的影响 | 第129-130页 |
| 5.5.2.2 猴头菇多糖HEP-W对IRAK-1信号传导通路的影响 | 第130-132页 |
| 5.5.2.3 猴头菇多糖HEP-W对TRAF-6信号传导通路的影响 | 第132-133页 |
| 5.5.3 猴头菇多糖HEP-W对PI3K/Akt信号传导通路的影响 | 第133-135页 |
| 5.5.4 猴头菇多糖HEP-W对MAPKs信号传导通路的影响 | 第135-137页 |
| 5.5.5 猴头菇多糖HEP-W激活巨噬细胞可能的信号传导通路 | 第137页 |
| 5.6 本章小结 | 第137-138页 |
| 参考文献 | 第138-142页 |
| 第六章 猴头菇纯化多糖HEP-W对环磷酰胺致免疫低下小鼠的影响 | 第142-163页 |
| 6.1 前言 | 第142-143页 |
| 6.2 实验材料与试剂 | 第143-146页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第143页 |
| 6.2.2 实验动物和细胞株 | 第143-144页 |
| 6.2.3 实验试剂 | 第144-146页 |
| 6.3 实验主要仪器与设备 | 第146-148页 |
| 6.4 实验方法 | 第148-151页 |
| 6.4.1 猴头菇多糖HEP-W对免疫抑制小鼠外周血白细胞及骨髓有核细胞计数的影响 | 第148页 |
| 6.4.2 猴头菇多糖HEP-W对免疫抑制小鼠脾脏指数的影响 | 第148页 |
| 6.4.3 猴头菇多糖HEP-W对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 | 第148-149页 |
| 6.4.3.1 脾淋巴细胞的获得 | 第148-149页 |
| 6.4.3.2 CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖活力 | 第149页 |
| 6.4.4 猴头菇多糖HEP-W对免疫抑制小鼠NK细胞杀伤活力的影响 | 第149-150页 |
| 6.4.5 猴头菇多糖HEP-W对免疫抑制小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响 | 第150页 |
| 6.4.6 猴头菇多糖HEP-W对免疫抑制小鼠血清中IL-2含量的影响 | 第150页 |
| 6.4.7 猴头菇多糖HEP-W对免疫抑制小鼠血清中抗氧化指标的影响 | 第150-151页 |
| 6.4.8 数据统计分析 | 第151页 |
| 6.5 结果与分析 | 第151-159页 |
| 6.5.1 猴头菇纯化多糖HEP-W对免疫抑制小鼠外周血白细胞及骨髓有核细胞的影响 | 第151-153页 |
| 6.5.2 猴头菇纯化多糖HEP-W对免疫抑制小鼠脾脏指数、NK细胞活性的影响 | 第153-154页 |
| 6.5.3 猴头菇纯化多糖HEP-W对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 | 第154-156页 |
| 6.5.4 猴头菇纯化多糖HEP-W对免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力、血清IL-2含量的影响 | 第156-157页 |
| 6.5.5 猴头菇纯化多糖HEP-W对免疫抑制小鼠抗氧化能力的影响 | 第157-159页 |
| 6.6 本章小结 | 第159页 |
| 参考文献 | 第159-163页 |
| 结论与展望 | 第163-166页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第166-168页 |
| 致谢 | 第168-170页 |
| 附件 | 第170页 |
