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微藻中抗糖基化活性成分的筛选、纯化以及抗神经炎症的研究

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微藻中抗糖基化活性成分的筛选、纯化以及抗神经炎症的研究
论文目录
 
摘要第1-8页
Abstract第8-17页
主要符号表第17-19页
第一章 绪论第19-43页
  1.1 引言第19-20页
  1.2 阿尔兹海默症研究进展第20-30页
    1.2.1 晚期糖基化终产物与阿尔兹海默症第21-28页
    1.2.2 神经炎症与阿尔兹海默症第28-29页
    1.2.3 天然活性成分的神经保护作用第29-30页
  1.3 微藻生物活性成分第30-37页
    1.3.1 微藻代谢产物概述第30-32页
    1.3.2 类胡萝卜素第32-35页
    1.3.3 多不饱和脂肪酸第35-36页
    1.3.4 蛋白质第36-37页
    1.3.5 多糖第37页
  1.4 微藻及其活性成分的健康价值第37-41页
    1.4.1 抗氧化活性第37-38页
    1.4.2 抗炎作用第38-39页
    1.4.3 抗糖基化和抗糖尿病第39页
    1.4.4 减肥第39-40页
    1.4.5 抗癌作用第40-41页
  1.5 研究意义与内容第41-43页
    1.5.1 研究意义第41页
    1.5.2 研究内容第41-42页
    1.5.3 技术路线第42-43页
第二章 抗糖基化活性藻株的筛选第43-60页
  2.1 引言第43页
  2.2 实验材料与仪器第43-46页
    2.2.1 藻种及培养基第43-44页
    2.2.2 实验材料与试剂第44-45页
    2.2.3 实验仪器与设备第45-46页
  2.3 实验方法第46-49页
    2.3.1 微藻的培养第46-47页
    2.3.2 细胞生物量的测定第47页
    2.3.3 不同极性粗提物的制备第47页
    2.3.4 糖基化模型的建立第47-48页
    2.3.5 数据分析第48-49页
  2.4 结果与讨论第49-59页
    2.4.1 微藻生长特性研究第49-50页
    2.4.2 牛血清白蛋白-葡萄糖模型中微藻提取物对AGEs形成的影响第50-53页
    2.4.3 牛血清白蛋白-甲基乙二醛模型中微藻提取物对AGEs形成的影响第53-56页
    2.4.4 BSA-葡萄糖模型中五株海洋微藻不同浓度丙酮水提取物对AGEs形成的影响第56-57页
    2.4.5 BSA-MGO模型中五株海洋微藻不同浓度丙酮水提取物对AGEs形成的影响第57-59页
  2.5 小结第59-60页
第三章 抗糖基化有效成分的分析方法的建立第60-80页
  3.1 引言第60-61页
  3.2 实验材料与仪器第61-62页
    3.2.1 藻种第61页
    3.2.2 实验材料与试剂第61页
    3.2.3 实验仪器与设备第61-62页
  3.3 实验方法第62-66页
    3.3.1 岩藻黄醇与岩藻黄素标准溶液的配制第62页
    3.3.2 丙酮水提取物中类胡萝卜素高效液相色谱方法的建立第62-65页
    3.3.3 丙酮水提取物关键类胡萝卜素超高效液相色谱-串联质谱方法的建立第65-66页
    3.3.4 数据分析第66页
  3.4 结果与讨论第66-78页
    3.4.1 关键类胡萝卜素的液相方法建立第66-73页
    3.4.2 关键色素的液相色谱-质谱鉴定第73-76页
    3.4.3 关键性色素与AGEs含量的相关性第76-77页
    3.4.4 岩藻黄醇与岩藻黄素的抗AGEs活性第77-78页
  3.5 小结第78-80页
第四章 构建N.laevis生产岩藻黄醇与岩藻黄素的非线性动力学模型第80-98页
  4.1 引言第80-81页
  4.2 实验材料与仪器第81页
    4.2.1 藻株及培养基第81页
    4.2.2 实验材料与试剂第81页
    4.2.3 实验仪器与设备第81页
  4.3 实验方法第81-85页
    4.3.1 硅藻N.laevis的自养、异养和混养培养第81-82页
    4.3.2 生物量的测定第82页
    4.3.3 硝酸钠浓度的测定第82页
    4.3.4 葡萄糖浓度的测定第82-83页
    4.3.5 岩藻黄醇和岩藻黄素含量的测定第83页
    4.3.6 动力学模型第83-85页
    4.3.7 数据处理第85页
  4.4 结果与讨论第85-96页
    4.4.1 不同培养方式硅藻N.laevis的生长情况第85-88页
    4.4.2 硅藻N.laevis的细胞生长动力学模型第88-90页
    4.4.3 岩藻黄醇和岩藻黄素的产物形成动力学第90-92页
    4.4.4 葡萄糖的消耗动力学第92-95页
    4.4.5 硝酸钠的消耗动力学第95-96页
  4.5 模型验证第96-97页
  4.6 小结第97-98页
第五章 抗糖基化化合物岩藻黄醇和岩藻黄素的分离、纯化及鉴定第98-117页
  5.1 引言第98页
  5.2 实验材料与仪器第98-100页
    5.2.1 藻种第98页
    5.2.2 实验材料与试剂第98-99页
    5.2.3 实验仪器与设备第99-100页
  5.3 实验方法第100-103页
    5.3.1 硅藻N.laevis培养第100页
    5.3.2 超声辅助溶剂萃取岩藻黄醇与岩藻黄素第100页
    5.3.3 湿法提取与干藻粉中萃取岩藻黄醇与岩藻黄素第100页
    5.3.4 UPLC-MS/MS检测提取物中油脂的组成第100-101页
    5.3.5 SPE分离岩藻黄醇与岩藻黄素第101-102页
    5.3.6 快速硅胶柱层析分离岩藻黄醇与岩藻黄素第102页
    5.3.7 薄层色谱法(TLC)纯化岩藻黄醇与岩藻黄素第102-103页
    5.3.8 岩藻黄醇与岩藻黄素的HPLC-PDA定量分析及纯度测定第103页
    5.3.9 岩藻黄醇与岩藻黄素的NMR鉴定第103页
    5.3.10 统计分析第103页
  5.4 结果与讨论第103-116页
    5.4.1 超声辅助溶剂萃取岩藻黄醇与岩藻黄素的比较第103-105页
    5.4.2 干藻粉萃取与湿法提取岩藻黄醇与岩藻黄素的比较第105-106页
    5.4.3 提取物中脂质的UPLC-MS/MS分析第106-110页
    5.4.4 SPE分离纯化岩藻黄醇与岩藻黄素第110-111页
    5.4.5 快速硅胶层析柱分离纯化岩藻黄醇与岩藻黄素第111-112页
    5.4.6 TLC纯化岩藻黄醇与岩藻黄素第112-114页
    5.4.7 纯化的岩藻黄醇与岩藻黄素的NMR鉴定第114-116页
  5.5 小结第116-117页
第六章 岩藻黄醇及岩藻黄素抗糖基化机理探讨第117-136页
  6.1 引言第117页
  6.2 实验材料与仪器第117-119页
    6.2.1 实验材料与试剂第117-119页
    6.2.2 实验仪器与设备第119页
  6.3 实验方法第119-125页
    6.3.1 岩藻黄醇与岩藻黄素自由基清除能力的评估第119-122页
    6.3.2 岩藻黄醇与岩藻黄素清除活性羰基化合物能力的评估第122页
    6.3.3 HPLC法测定二羰基化合物含量第122-123页
    6.3.4 岩藻黄醇与岩藻黄素对自由基诱导的蛋白氧化损伤的抑制作用第123-124页
    6.3.5 统计分析第124-125页
  6.4 结果与讨论第125-135页
    6.4.1 岩藻黄醇与岩藻黄素胞外抗氧化活性的评价第125-130页
    6.4.2 岩藻黄醇与岩藻黄素清除活性羰基化合物能力第130-133页
    6.4.3 岩藻黄醇与岩藻黄素对蛋白氧化损伤的抑制作用第133-135页
  6.5 小结第135-136页
第七章 岩藻黄醇及岩藻黄素抗神经炎症探讨第136-150页
  7.1 引言第136-137页
  7.2 实验材料与仪器第137-138页
    7.2.1 细胞株第137页
    7.2.2 实验材料与试剂第137-138页
    7.2.3 实验仪器与设备第138页
  7.3 实验方法第138-142页
    7.3.1 细胞复苏、传代和冻存第138-139页
    7.3.2 细胞活力检测第139页
    7.3.3 细胞内ROS含量的检测第139-140页
    7.3.4 NO产物的测定第140页
    7.3.5 探究岩藻黄醇和岩藻黄素对BV2细胞促炎因子转录水平的影响第140页
    7.3.6 总RNA的提取和RT-PCR第140-141页
    7.3.7 Westernblot法测定COX-2蛋白表达第141页
    7.3.8 数据处理与分析第141-142页
  7.4 结果与讨论第142-148页
    7.4.1 岩藻黄醇与岩藻黄素对BV2细胞活力的影响第142页
    7.4.2 岩藻黄醇与岩藻黄素对LPS诱导的BV2细胞内ROS生成的影响第142-144页
    7.4.3 岩藻黄醇与岩藻黄素对LPS诱导的BV2细胞内NO含量的影响第144-145页
    7.4.4 岩藻黄醇与岩藻黄素对LPS诱导的BV2细胞炎症反应的干预作用第145-148页
    7.4.5 岩藻黄醇与岩藻黄素对LPS诱导的BV2细胞COX-2蛋白表达的影响第148页
  7.5 小结第148-150页
结论与展望第150-153页
1.结论第150-151页
2.论文创新点第151页
3.展望第151-153页
参考文献第153-165页
攻读博士学位期间取得的研究成果第165-167页
致谢第167-169页
附件第169页

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