论文目录 | |
摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-17页 |
主要符号表 | 第17-19页 |
第一章 绪论 | 第19-43页 |
1.1 引言 | 第19-20页 |
1.2 阿尔兹海默症研究进展 | 第20-30页 |
1.2.1 晚期糖基化终产物与阿尔兹海默症 | 第21-28页 |
1.2.2 神经炎症与阿尔兹海默症 | 第28-29页 |
1.2.3 天然活性成分的神经保护作用 | 第29-30页 |
1.3 微藻生物活性成分 | 第30-37页 |
1.3.1 微藻代谢产物概述 | 第30-32页 |
1.3.2 类胡萝卜素 | 第32-35页 |
1.3.3 多不饱和脂肪酸 | 第35-36页 |
1.3.4 蛋白质 | 第36-37页 |
1.3.5 多糖 | 第37页 |
1.4 微藻及其活性成分的健康价值 | 第37-41页 |
1.4.1 抗氧化活性 | 第37-38页 |
1.4.2 抗炎作用 | 第38-39页 |
1.4.3 抗糖基化和抗糖尿病 | 第39页 |
1.4.4 减肥 | 第39-40页 |
1.4.5 抗癌作用 | 第40-41页 |
1.5 研究意义与内容 | 第41-43页 |
1.5.1 研究意义 | 第41页 |
1.5.2 研究内容 | 第41-42页 |
1.5.3 技术路线 | 第42-43页 |
第二章 抗糖基化活性藻株的筛选 | 第43-60页 |
2.1 引言 | 第43页 |
2.2 实验材料与仪器 | 第43-46页 |
2.2.1 藻种及培养基 | 第43-44页 |
2.2.2 实验材料与试剂 | 第44-45页 |
2.2.3 实验仪器与设备 | 第45-46页 |
2.3 实验方法 | 第46-49页 |
2.3.1 微藻的培养 | 第46-47页 |
2.3.2 细胞生物量的测定 | 第47页 |
2.3.3 不同极性粗提物的制备 | 第47页 |
2.3.4 糖基化模型的建立 | 第47-48页 |
2.3.5 数据分析 | 第48-49页 |
2.4 结果与讨论 | 第49-59页 |
2.4.1 微藻生长特性研究 | 第49-50页 |
2.4.2 牛血清白蛋白-葡萄糖模型中微藻提取物对AGEs形成的影响 | 第50-53页 |
2.4.3 牛血清白蛋白-甲基乙二醛模型中微藻提取物对AGEs形成的影响 | 第53-56页 |
2.4.4 BSA-葡萄糖模型中五株海洋微藻不同浓度丙酮水提取物对AGEs形成的影响 | 第56-57页 |
2.4.5 BSA-MGO模型中五株海洋微藻不同浓度丙酮水提取物对AGEs形成的影响 | 第57-59页 |
2.5 小结 | 第59-60页 |
第三章 抗糖基化有效成分的分析方法的建立 | 第60-80页 |
3.1 引言 | 第60-61页 |
3.2 实验材料与仪器 | 第61-62页 |
3.2.1 藻种 | 第61页 |
3.2.2 实验材料与试剂 | 第61页 |
3.2.3 实验仪器与设备 | 第61-62页 |
3.3 实验方法 | 第62-66页 |
3.3.1 岩藻黄醇与岩藻黄素标准溶液的配制 | 第62页 |
3.3.2 丙酮水提取物中类胡萝卜素高效液相色谱方法的建立 | 第62-65页 |
3.3.3 丙酮水提取物关键类胡萝卜素超高效液相色谱-串联质谱方法的建立 | 第65-66页 |
3.3.4 数据分析 | 第66页 |
3.4 结果与讨论 | 第66-78页 |
3.4.1 关键类胡萝卜素的液相方法建立 | 第66-73页 |
3.4.2 关键色素的液相色谱-质谱鉴定 | 第73-76页 |
3.4.3 关键性色素与AGEs含量的相关性 | 第76-77页 |
3.4.4 岩藻黄醇与岩藻黄素的抗AGEs活性 | 第77-78页 |
3.5 小结 | 第78-80页 |
第四章 构建N.laevis生产岩藻黄醇与岩藻黄素的非线性动力学模型 | 第80-98页 |
4.1 引言 | 第80-81页 |
4.2 实验材料与仪器 | 第81页 |
4.2.1 藻株及培养基 | 第81页 |
4.2.2 实验材料与试剂 | 第81页 |
4.2.3 实验仪器与设备 | 第81页 |
4.3 实验方法 | 第81-85页 |
4.3.1 硅藻N.laevis的自养、异养和混养培养 | 第81-82页 |
4.3.2 生物量的测定 | 第82页 |
4.3.3 硝酸钠浓度的测定 | 第82页 |
4.3.4 葡萄糖浓度的测定 | 第82-83页 |
4.3.5 岩藻黄醇和岩藻黄素含量的测定 | 第83页 |
4.3.6 动力学模型 | 第83-85页 |
4.3.7 数据处理 | 第85页 |
4.4 结果与讨论 | 第85-96页 |
4.4.1 不同培养方式硅藻N.laevis的生长情况 | 第85-88页 |
4.4.2 硅藻N.laevis的细胞生长动力学模型 | 第88-90页 |
4.4.3 岩藻黄醇和岩藻黄素的产物形成动力学 | 第90-92页 |
4.4.4 葡萄糖的消耗动力学 | 第92-95页 |
4.4.5 硝酸钠的消耗动力学 | 第95-96页 |
4.5 模型验证 | 第96-97页 |
4.6 小结 | 第97-98页 |
第五章 抗糖基化化合物岩藻黄醇和岩藻黄素的分离、纯化及鉴定 | 第98-117页 |
5.1 引言 | 第98页 |
5.2 实验材料与仪器 | 第98-100页 |
5.2.1 藻种 | 第98页 |
5.2.2 实验材料与试剂 | 第98-99页 |
5.2.3 实验仪器与设备 | 第99-100页 |
5.3 实验方法 | 第100-103页 |
5.3.1 硅藻N.laevis培养 | 第100页 |
5.3.2 超声辅助溶剂萃取岩藻黄醇与岩藻黄素 | 第100页 |
5.3.3 湿法提取与干藻粉中萃取岩藻黄醇与岩藻黄素 | 第100页 |
5.3.4 UPLC-MS/MS检测提取物中油脂的组成 | 第100-101页 |
5.3.5 SPE分离岩藻黄醇与岩藻黄素 | 第101-102页 |
5.3.6 快速硅胶柱层析分离岩藻黄醇与岩藻黄素 | 第102页 |
5.3.7 薄层色谱法(TLC)纯化岩藻黄醇与岩藻黄素 | 第102-103页 |
5.3.8 岩藻黄醇与岩藻黄素的HPLC-PDA定量分析及纯度测定 | 第103页 |
5.3.9 岩藻黄醇与岩藻黄素的NMR鉴定 | 第103页 |
5.3.10 统计分析 | 第103页 |
5.4 结果与讨论 | 第103-116页 |
5.4.1 超声辅助溶剂萃取岩藻黄醇与岩藻黄素的比较 | 第103-105页 |
5.4.2 干藻粉萃取与湿法提取岩藻黄醇与岩藻黄素的比较 | 第105-106页 |
5.4.3 提取物中脂质的UPLC-MS/MS分析 | 第106-110页 |
5.4.4 SPE分离纯化岩藻黄醇与岩藻黄素 | 第110-111页 |
5.4.5 快速硅胶层析柱分离纯化岩藻黄醇与岩藻黄素 | 第111-112页 |
5.4.6 TLC纯化岩藻黄醇与岩藻黄素 | 第112-114页 |
5.4.7 纯化的岩藻黄醇与岩藻黄素的NMR鉴定 | 第114-116页 |
5.5 小结 | 第116-117页 |
第六章 岩藻黄醇及岩藻黄素抗糖基化机理探讨 | 第117-136页 |
6.1 引言 | 第117页 |
6.2 实验材料与仪器 | 第117-119页 |
6.2.1 实验材料与试剂 | 第117-119页 |
6.2.2 实验仪器与设备 | 第119页 |
6.3 实验方法 | 第119-125页 |
6.3.1 岩藻黄醇与岩藻黄素自由基清除能力的评估 | 第119-122页 |
6.3.2 岩藻黄醇与岩藻黄素清除活性羰基化合物能力的评估 | 第122页 |
6.3.3 HPLC法测定二羰基化合物含量 | 第122-123页 |
6.3.4 岩藻黄醇与岩藻黄素对自由基诱导的蛋白氧化损伤的抑制作用 | 第123-124页 |
6.3.5 统计分析 | 第124-125页 |
6.4 结果与讨论 | 第125-135页 |
6.4.1 岩藻黄醇与岩藻黄素胞外抗氧化活性的评价 | 第125-130页 |
6.4.2 岩藻黄醇与岩藻黄素清除活性羰基化合物能力 | 第130-133页 |
6.4.3 岩藻黄醇与岩藻黄素对蛋白氧化损伤的抑制作用 | 第133-135页 |
6.5 小结 | 第135-136页 |
第七章 岩藻黄醇及岩藻黄素抗神经炎症探讨 | 第136-150页 |
7.1 引言 | 第136-137页 |
7.2 实验材料与仪器 | 第137-138页 |
7.2.1 细胞株 | 第137页 |
7.2.2 实验材料与试剂 | 第137-138页 |
7.2.3 实验仪器与设备 | 第138页 |
7.3 实验方法 | 第138-142页 |
7.3.1 细胞复苏、传代和冻存 | 第138-139页 |
7.3.2 细胞活力检测 | 第139页 |
7.3.3 细胞内ROS含量的检测 | 第139-140页 |
7.3.4 NO产物的测定 | 第140页 |
7.3.5 探究岩藻黄醇和岩藻黄素对BV2细胞促炎因子转录水平的影响 | 第140页 |
7.3.6 总RNA的提取和RT-PCR | 第140-141页 |
7.3.7 Westernblot法测定COX-2蛋白表达 | 第141页 |
7.3.8 数据处理与分析 | 第141-142页 |
7.4 结果与讨论 | 第142-148页 |
7.4.1 岩藻黄醇与岩藻黄素对BV2细胞活力的影响 | 第142页 |
7.4.2 岩藻黄醇与岩藻黄素对LPS诱导的BV2细胞内ROS生成的影响 | 第142-144页 |
7.4.3 岩藻黄醇与岩藻黄素对LPS诱导的BV2细胞内NO含量的影响 | 第144-145页 |
7.4.4 岩藻黄醇与岩藻黄素对LPS诱导的BV2细胞炎症反应的干预作用 | 第145-148页 |
7.4.5 岩藻黄醇与岩藻黄素对LPS诱导的BV2细胞COX-2蛋白表达的影响 | 第148页 |
7.5 小结 | 第148-150页 |
结论与展望 | 第150-153页 |
1.结论 | 第150-151页 |
2.论文创新点 | 第151页 |
3.展望 | 第151-153页 |
参考文献 | 第153-165页 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第165-167页 |
致谢 | 第167-169页 |
附件 | 第169页 |