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NGF、NGFR在卵巢癌中的表达及调控卵巢癌糖酵解的功能和机制研究

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NGF、NGFR在卵巢癌中的表达及调控卵巢癌糖酵解的功能和机制研究
论文目录
 
摘要第1-5页
abstract第5-10页
中英文缩略词表第10-11页
前言第11-15页
第1章 神经生长因子及其受体在上皮性卵巢肿瘤中的表达第15-31页
  1.1 背景第15页
  1.2 材料与方法第15-23页
    1.2.1 临床组织标本第15-16页
    1.2.2 组织样本RNA抽提相关试剂第16页
    1.2.3 蛋白抽提及免疫印迹相关试剂第16页
    1.2.4 ELISA检测相关试剂第16-17页
    1.2.5 westernblot及免疫组化相关抗体第17页
    1.2.6 免疫组织化学染色相关试剂:第17页
    1.2.7 实验仪器及设备第17-18页
    1.2.8 卵巢肿瘤组织及癌旁组织mRNA提取第18-20页
    1.2.9 卵巢肿瘤组织及癌旁组织蛋白提取第20-21页
    1.2.10 ELISA检测蛋白含量第21页
    1.2.11 组织样本westernblot检测第21-22页
    1.2.12 卵巢肿瘤组织与正常卵巢组织免疫组化实验第22-23页
    1.2.13 统计学分析第23页
  1.3 结果第23-28页
    1.3.1 在恶性上皮性卵巢肿瘤组织和正常卵巢组织中NGF及其受体mRNA的定量表达第23-24页
    1.3.2 在良性卵巢肿瘤组织和恶性上皮性卵巢肿瘤组织中NGF及其受体mRNA的表达第24-25页
    1.3.3 恶性上皮性卵巢肿瘤组织与正常卵巢组织中NGF及其受体蛋白的定量表达第25-26页
    1.3.4 恶性上皮性卵巢肿瘤组织和良性卵巢肿瘤组织中NGF及其受体蛋白的定量表达第26-27页
    1.3.5 利用Westernblot方法分析不同样本中NGF及其受体蛋白的定量表达第27页
    1.3.6 免疫组织化学方法检测NGF及其受体在正常卵巢组织和上皮性恶性卵巢肿瘤中的表达第27-28页
  1.4 讨论第28-31页
第2章 NGFR调控卵巢癌细胞糖代谢的实验研究第31-71页
  2.1 背景第31-32页
  2.2 材料与方法第32-50页
    2.2.1 细胞系第32页
    2.2.2 质粒第32页
    2.2.3 细胞培养及检测相关试剂第32-33页
    2.2.4 糖代谢相关检测试剂第33页
    2.2.5 荧光素酶活性检测试剂第33页
    2.2.6 质粒抽提纯化试剂第33页
    2.2.7 细胞总RNA抽提相关试剂第33页
    2.2.8 RT-PCR相关试剂第33-34页
    2.2.9 蛋白抽提及免疫印迹(WesternBlot)相关试剂第34页
    2.2.10 抗体第34-35页
    2.2.11 染色质免疫共沉淀实验试剂第35页
    2.2.12 主要仪器第35页
    2.2.13 细胞培养第35-36页
    2.2.14 siRNA转染第36页
    2.2.15 shNGFR质粒构建及慢病毒稳转株建立第36-39页
    2.2.16 构建NGFR真核表达克隆第39-41页
    2.2.17 pGL3-NGFR报告质粒的构建第41-42页
    2.2.18 启动子活性分析实验第42页
    2.2.19 RNA抽提第42-43页
    2.2.20 逆转录(RT)反应第43页
    2.2.21 荧光定量PCR实验第43-44页
    2.2.22 蛋白免疫印迹实验第44-45页
    2.2.23 葡萄糖吸收检测实验第45-46页
    2.2.24 乳酸分泌检测实验第46页
    2.2.25 细胞能量代谢实验第46-47页
    2.2.26 染色质免疫共沉淀(ChIP)实验第47-50页
    2.2.27 数据统计第50页
  2.3 实验结果第50-62页
    2.3.1 构建稳定敲减NGFR的卵巢癌细胞株第50-51页
    2.3.2 敲减NGFR可显著抑制Akt信号和ERK信号的活化第51-53页
    2.3.3 敲减NGFR可显著抑制HIF-1α的表达。第53-54页
    2.3.4 抑制NGFR表达可显著抑制糖酵解第54-57页
    2.3.5 低氧环境诱导SK-OV-3和HO-8910细胞系中NGFR的表达第57-58页
    2.3.6 HIF-1α调控NGFR的表达第58-59页
    2.3.7 NGF信号增强HIF-1α介导的糖酵解过程第59-62页
  2.4 讨论第62-71页
全文总结第71-72页
致谢第72-73页
参考文献第73-82页
攻读学位期间的研究成果第82-83页
综述第83-101页
参考文献第97-101页

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