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UXT结合蛋白VHL调控AR通路的分子机制研究

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UXT结合蛋白VHL调控AR通路的分子机制研究
论文目录
 
本论文的创新点第1-7页
中文摘要第7-9页
Abstract第9-11页
常用缩写第11-16页
第一章 前言第16-33页
  1. VHL研究概况第16-31页
  1.1 VHL相关疾病第16-17页
  1.2 VHL疾病的临床分类及其致病原因第17-19页
  1.3 VHL基因及其蛋白质的结构第19-20页
  1.4 VHL的细胞定位第20-21页
  1.5 VHL蛋白质的转录后修饰第21-26页
  1.6 VHL蛋白质的功能第26-31页
  2. VHL与WNT通路第31页
  3. VHL疾病的治疗第31-32页
  4. 本论文研究的目的和意义第32-33页
第二章 一种改进的酵母双杂交方法的建立第33-51页
  1. 酵母双杂交方法介绍第33-35页
  2. 材料第35-36页
  2.1 质粒和菌种第35页
  2.2 主要试剂和试剂盒第35-36页
  2.3 试剂配方第36页
  3. 方法第36-44页
  3.1 bait pGBKT7-VHL构建第36-40页
  3.2 用pGBKT7-VHL在人脑cDNA文库中筛选相互作用的蛋白质第40-44页
  4. 结果第44-47页
  4.1 pGBKT7-VHL的构建第44页
  4.2 酵母双杂交筛选到的猎物的PCR验证第44-45页
  4.3 酵母双杂交筛选到的猎物对应的基因及其蛋白质区段第45-46页
  4.4 酵母双杂交筛选到的猎物回转验证第46-47页
  5. 讨论第47-51页
  5.1 用酵母双杂交筛选VHL互作蛋白的原因以及新构建的酵母双杂交系统的优缺点第47-48页
  5.2 对筛到的猎物与VHL互作的功能分析第48-51页
第三章 VHL促进Dvl2 K301位发生K48位泛素化降解第51-67页
  1. WNT通路与DVL关系的介绍第51-56页
  1.1 WNT通路介绍第51页
  1.2 Dvl蛋白质的结构第51-53页
  1.3 Dvl蛋白质的功能第53-54页
  1.4 Dvl的磷酸化调控第54-55页
  1.5 Dvl的稳定性调控第55页
  1.6 Dvl缺失小鼠模型第55-56页
  2. 材料第56-59页
  2.1 菌种和细胞系第56页
  2.2 抗体、转染试剂和化学试剂第56-57页
  2.3 引物和载体构建第57-59页
  3. 方法第59-63页
  3.1 构建定点突变和缺失突变以及干涉载体反向PCR的具体操作第59-60页
  3.2 哺乳动物细胞系的传代培养第60页
  3.3 细胞冻存第60页
  3.4 细胞复苏第60-61页
  3.5 哺乳动物细胞的转染(表达用)第61页
  3.6 免疫共沉淀实验第61-62页
  3.7 蛋白质电泳、Westernblot和泛素化检测第62页
  3.8 报告基因分析第62-63页
  4. 结果第63-65页
  4.1 VHL介导Dvl2的K301发生泛素分子K48位的泛素化而不是K63位的泛素化第63-64页
  4.2 VHL通过下调Dvl2的表达来降低LEF启动子活性第64-65页
  5. 讨论第65-67页
第四章 VHL调控AR通路的分子机制第67-99页
  1. UXT蛋白质的研究概况第67-76页
  1.1 雄性激素受体(AR)第70-73页
  1.2 AR与前列腺癌第73-74页
  1.3 蛋白质的核质穿梭第74-76页
  2. 材料第76-79页
  2.1 菌种和细胞系第76页
  2.2 抗体、转染试剂和化学试剂第76-77页
  2.3 试剂配方第77页
  2.4 引物和载体构建第77-79页
  3. 方法第79-81页
  3.1 常规的分子和细胞操作第79页
  3.2 GST Pulldown实验第79-80页
  3.3 免疫荧光定位分析第80-81页
  3.4 细胞核质分离实验第81页
  4. 结果第81-96页
  4.1 酵母双杂交验证UXT与VHL互作第81-82页
  4.2 UXT与VHL在体外和体内的相互作用第82-86页
  4.3 VHL与UXT互作的区域的确定第86页
  4.4 大转录本UXT-V1和小转录本与VHL的互作第86-87页
  4.5 大转录本UXT-V1和小转录本与AR互作,并不依赖于配体雄激素DHT第87-88页
  4.6 VHL与雄激素受体AR互作第88-89页
  4.7 VHL诱导AR泛素化第89-93页
  4.8 VHL调控AR转录激活活性第93-96页
  5. 讨论第96-99页
研究总结第99-100页
参考文献第100-110页
博士期间发表文章第110-111页
致谢第111-112页

本篇论文共112页,点击这进入下载页面
 
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