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维生素C抑制ERK1/2磷酸化上调collagen Ⅵ表达促进3T3-L1前脂肪细胞成脂分化

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维生素C抑制ERK1/2磷酸化上调collagen Ⅵ表达促进3T3-L1前脂肪细胞成脂分化
论文目录
 
英文缩写词说明第1-12页
摘要第12-15页
ABSTRACT第15-20页
第一部分 文献综述第20-37页
1 脂肪组织与前脂肪细胞第20-25页
  1.1 脂肪组织第20-21页
  1.2 前脂肪细胞第21-24页
  1.3 脂肪细胞因子第24-25页
2 VC与前脂肪细胞分化第25-31页
  2.1 VC的发现第25-26页
  2.2 VC的生物学功能第26-27页
  2.3 VC的吸收及进入哺乳动物细胞的途径第27-28页
  2.4 VC参与靶基因表达调控第28-29页
  2.5 VC对前脂肪细胞成脂分化的影响第29-31页
3 胶原蛋白与前脂肪细胞成脂分化第31-33页
  3.1 WAT中的胶原蛋白第31-32页
  3.2 脂肪细胞中的Col Ⅵ第32-33页
4 ERK1/2 信号通路与前脂肪细胞成脂分化第33-35页
  4.1 ERK1/2 信号通路第33-34页
  4.2 ERK1/2 信号通路与前脂肪细胞成脂分化第34-35页
5 VC、ERK1/2 信号通路与胶原蛋白第35-36页
6 论文研究的目的及意义第36-37页
第二部分 AA2P促进 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化第37-59页
1 实验设计第37页
2 实验材料与试剂第37-43页
  2.1 实验材料第37页
  2.2 实验试剂及配制第37-43页
3 实验仪器第43-44页
4 实验步骤第44-53页
  4.1 3T3-L1前脂肪细胞复苏与冻存第44-45页
  4.2 3T3-L1前脂肪细胞诱导培养第45页
  4.3 油红O染色及萃取第45-46页
  4.4 细胞总RNA提取、检测及定量第46-47页
  4.5 细胞总RNA反转录为cDNA第47-48页
  4.6 cDNA内参 β-actin检测第48页
  4.7 Real-time PCR第48-49页
  4.8 细胞总蛋白抽提第49-50页
  4.9 细胞总蛋白浓度测定第50页
  4.10 细胞总蛋白变性及质量检测第50-51页
  4.11 Western Blot检测靶蛋白第51-52页
  4.12 统计学分析第52-53页
5 实验结果第53-57页
  5.1 AA2P促进前脂肪细胞最佳浓度筛选第53页
  5.2 AA2P促进 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的形态学观察第53-54页
  5.3 AA2P对 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中靶基因表达的影响第54-56页
  5.4 AA2P影响 3T3-L1细胞成脂分化过程中靶蛋白表达的影响第56-57页
6 讨论第57-58页
7 小结第58-59页
第三部分 ERK1/2 磷酸化抑制剂抑制 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化第59-68页
1 实验设计第59页
2 实验材料与试剂第59页
  2.1 实验材料第59页
  2.2 实验试剂及配制第59页
3 实验仪器第59-60页
4 实验步骤第60-61页
  4.1 3T3-L1前脂肪细胞复苏与冻存第60页
  4.2 3T3-L1前脂肪细胞诱导培养第60页
  4.3 油红O染色及萃取第60页
  4.4 细胞总RNA提取、检测及定量第60页
  4.5 细胞总RNA反转录为cDNA第60页
  4.6 cDNA内参 β-actin检测第60页
  4.7 Real-time PCR第60页
  4.8 细胞全蛋白抽提第60页
  4.9 细胞全蛋白浓度测定第60页
  4.10 细胞全蛋白变性及质量检测第60页
  4.11 Western Blot检测靶蛋白第60-61页
  4.12 统计学分析第61页
5 实验结果第61-65页
  5.1 ERK1/2 信号通路抑制剂U0126干预浓度筛选第61-62页
  5.2 U0126抑制 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的形态观察结果第62-63页
  5.3 U0126对 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中靶基因表达的影响第63-64页
  5.4 U0126对 3T3-L1细胞成脂分化过程中靶蛋白表达的影响第64-65页
6 讨论第65-67页
7 小结第67-68页
第四部分 总胶原蛋白合成抑制剂抑制 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化第68-77页
1 实验设计第68页
2 实验材料与试剂第68页
  2.1 实验材料第68页
  2.2 实验试剂及配制第68页
3 实验仪器第68-69页
4 实验步骤第69-70页
  4.1 3T3-L1前脂肪细胞复苏与冻存第69页
  4.2 3T3-L1前脂肪细胞诱导培养第69页
  4.3 油红O染色及萃取第69页
  4.4 细胞总RNA提取、检测及定量第69页
  4.5 细胞总RNA反转录为cDNA第69页
  4.6 cDNA内参 β-actin检测第69页
  4.7 Real-time PCR第69页
  4.8 细胞全蛋白抽提第69页
  4.9 细胞全蛋白浓度测定第69页
  4.10 细胞全蛋白变性及质量检测第69页
  4.11 Western Blot检测靶蛋白第69-70页
  4.12 统计学分析第70页
5 实验结果第70-75页
  5.1 胶原蛋白合成抑制剂EDHB最佳干预浓度筛选第70-71页
  5.2 EDHB影响 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的形态学观察结果第71-72页
  5.3 EDHB对 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中靶基因表达的影响第72-74页
  5.4 EDHB对 3T3-L1细胞成脂分化过程中靶蛋白表达的影响第74-75页
6 讨论第75-76页
7 小结第76-77页
第五部分 慢病毒敲低Col VI抑制 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化第77-87页
1 实验设计第77页
2 实验材料和试剂第77-78页
  2.1 实验材料第77页
  2.2 载体及siRNA序列第77-78页
  2.3 实验试剂及配制第78页
3 实验仪器第78页
4 实验步骤第78-80页
  4.1 3T3-L1前脂肪细胞复苏第78页
  4.2 慢病毒感染第78-79页
  4.3 3T3-L1前脂肪细胞诱导培养第79页
  4.4 油红O染色及萃取第79页
  4.5 细胞总RNA提取、检测及定量第79页
  4.6 细胞总RNA反转录为cDNA第79页
  4.7 cDNA内参 β-actin检测第79页
  4.8 Real-time PCR第79页
  4.9 细胞全蛋白抽提第79页
  4.10 细胞全蛋白浓度测定第79页
  4.11 细胞全蛋白变性及质量检测第79页
  4.12 Western Blot检测靶蛋白第79页
  4.13 统计学分析第79-80页
5 实验结果第80-85页
  5.1 慢病毒感染 3T3-L1前脂肪细胞MOI值筛选及最佳感染条件摸索第80页
  5.2 敲低Col VI对 3T3-L1细胞成脂分化形态的影响第80-82页
  5.3 敲低Col VI对 3T3-L1细胞成脂分化过程中靶基因表达的影响第82-84页
  5.4 敲低Col VI对 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中靶蛋白表达的影响第84-85页
6 讨论第85-86页
7 小结第86-87页
第六部分 EDHB与U0126合用抑制 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化第87-93页
1 实验设计第87页
2 实验材料与试剂第87页
  2.1 实验材料第87页
  2.2 实验试剂及配制第87页
3 实验仪器第87页
4 实验步骤第87-89页
  4.1 3T3-L1前脂肪细胞复苏与冻存第87页
  4.2 3T3-L1前脂肪细胞诱导培养第87-88页
  4.3 油红O染色及萃取第88页
  4.4 细胞总RNA提取、检测及定量第88页
  4.5 细胞总RNA反转录为cDNA第88页
  4.6 cDNA内参 β-actin检测第88页
  4.7 Real-time PCR第88页
  4.8 细胞全蛋白抽提第88页
  4.9 细胞全蛋白浓度测定第88页
  4.10 细胞全蛋白变性及质量检测第88页
  4.11 Western Blot检测靶蛋白第88页
  4.12 统计学分析第88-89页
5 实验结果第89-92页
  5.1 EDHB和U0126合用抑制 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的形态学检测结果第89页
  5.2 EDHB与U0126合用对 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中靶基因表达的影响第89-91页
  5.3 EDHB与U0126合用对 3T3-L1细胞成脂分化过程中靶蛋白表达的影响第91-92页
6 讨论第92页
7 小结第92-93页
全文讨论与总结第93-98页
参考文献第98-109页
攻读博士期间发表的学术论文第109-110页
致谢第110-111页
英文文章第111-142页

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