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映山红花总黄酮抑制UTR-RhoA-ROCK通路改善大鼠心肌梗死后心室重构的研究

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映山红花总黄酮抑制UTR-RhoA-ROCK通路改善大鼠心肌梗死后心室重构的研究
论文目录
 
英文缩略词(Abbreviation)第1-10页
摘要第10-14页
abstract第14-20页
1、引言第20-25页
2、材料与方法第25-44页
  2.1 实验动物第25页
  2.2 药品与试剂第25-27页
  2.3 实验仪器第27-28页
  2.4 实验方法与内容第28-44页
    2.4.1 大鼠在体实验第28-34页
      2.4.1.1 动物MI模型制备第28-29页
      2.4.1.2 实验分组及给药第29-30页
      2.4.1.3 超声心动图检测第30页
      2.4.1.4 心脏形态学观察第30-31页
      2.4.1.5 心肌细胞横切面积测定和天狼星红染色第31页
      2.4.1.6 非梗死区心肌组织蛋白总量的提取和测定第31-32页
      2.4.1.7 Western blot实验第32-33页
      2.4.1.8 RhoA活性检测第33-34页
    2.4.2 原代细胞实验第34-40页
      2.4.2.1 乳鼠心肌细胞原代培养第34页
      2.4.2.2 乳鼠成纤维细胞原代培养第34-35页
      2.4.2.3 心肌细胞和成纤维细胞鉴定第35页
      2.4.2.4 细胞重构模型的建立与分组第35页
      2.4.2.5 MTT实验与酶标仪检测第35-36页
      2.4.2.6 细胞转染实验第36-37页
      2.4.2.7 免疫荧光检测第37页
      2.4.2.8 细胞RNA提取和qRT-PCR检测第37-39页
      2.4.2.9 Western blot实验第39页
      2.4.2.10 RhoA活性检测第39-40页
      2.4.2.11 钙成像检测第40页
    2.4.3 离体血管张力测定及心脏表面血流量测定第40-43页
      2.4.3.1 PSS和KPSS液配制第40页
      2.4.3.2 离体血管环制备第40-41页
      2.4.3.3 血管张力测定第41-42页
      2.4.3.4 实验分组第42页
      2.4.3.5 心脏表面血流量测定第42-43页
    2.4.4 统计学处理第43-44页
3、实验结果第44-86页
  3.1 TFR对大鼠心梗后心室重构的影响第44-52页
    3.1.1 TFR对大鼠心梗后大鼠存活率的影响第44-45页
    3.1.2 TFR对大鼠心梗后心脏重量指数的影响第45-46页
    3.1.3 TFR对大鼠心梗前后心功能的影响第46-47页
    3.1.4 TFR对大鼠心梗后心肌肥大和纤维化的影响第47-49页
    3.1.5 TFR对大鼠心梗后非梗死区心肌组织纤维化相关蛋白表达的影响第49-51页
    3.1.6 TFR对大鼠心梗后非梗死区心肌组织UTR-RhoA-ROCK相关蛋白表达的影响第51-52页
  3.2 TFR对原代乳鼠心肌细胞肥大和成纤维细胞增殖的影响第52-65页
    3.2.1 原代心肌细胞和成纤维细胞的培养与鉴定第52-53页
    3.2.2 hUⅡ对心肌细胞和成纤维细胞活力的影响第53-54页
    3.2.3 TFR对心肌细胞和成纤维细胞活力的影响第54页
    3.2.4 TFR对hUⅡ诱导心肌细胞肥大的影响第54-57页
    3.2.5 TFR对hUⅡ诱导成纤维细胞增殖的影响第57-59页
    3.2.6 TFR对hUⅡ诱导心肌细胞肥大后UTR-RhoA-ROCK通路的影响第59-61页
    3.2.7 TFR对hUⅡ诱导成纤维细胞增殖后UTR-RhoA-ROCK通路的影响第61-62页
    3.2.8 TFR对hUⅡ诱导心肌细胞肥大后胞内钙含量变化的影响第62-64页
    3.2.9 TFR对hUⅡ诱导成纤维细胞增殖后胞内钙含量变化的的影响第64-65页
  3.3 ROCK-siRNA对TFR抑制hUⅡ诱导心肌细胞肥大和成纤维细胞增殖的影响第65-72页
    3.3.1 siRNA下调ROCK1/2 水平的鉴定第65-67页
    3.3.2 ROCK-siRNA对TFR抑制hUⅡ诱导心肌细胞肥大的影响第67-70页
    3.3.3 ROCK-siRNA对TFR抑制hUⅡ诱导成纤维细胞增殖的影响第70-72页
  3.4 TFR对心梗后大鼠心肌血流灌注和离体冠状动脉血管张力的影响第72-86页
    3.4.1 TFR对离体大鼠冠状动脉血管的舒张作用第72-74页
    3.4.2 TFR舒张U46619、PE及高钾预收缩冠脉的EC50和Emax比较第74-75页
    3.4.3 TFR对离体大鼠肠系膜上动脉血管的舒张作用第75-77页
    3.4.4 TFR对离体大鼠腹主动脉血管的舒张作用第77-79页
    3.4.5 TFR对离体大鼠门静脉和肠系膜上静脉血管的舒张作用第79-81页
    3.4.6 TFR对离体大鼠血管舒张作用的选择性第81-83页
    3.4.7 TFR对慢性心梗大鼠离体冠脉血管的舒张作用第83-84页
    3.4.8 TFR对在体大鼠急性心梗后心肌血流灌注的影响第84-86页
4、讨论第86-96页
  4.1 UTR-RhoA-ROCK在心梗后心室重构中的作用第86-87页
  4.2 TFR对心梗后心室重构的改善作用第87-90页
    4.2.1 TFR改善慢性心梗大鼠心功能失调和心室重构第87-89页
      4.2.1.1 心梗后心室重构模型的成功建立第87页
      4.2.1.2 TFR改善慢性心梗大鼠心功能失调第87-88页
      4.2.1.3 TFR改善慢性心梗大鼠心室重构第88-89页
    4.2.2 TFR改善hUⅡ诱导的细胞水平重构第89-90页
  4.3 TFR改善心梗后心室重构的机制探讨第90-95页
    4.3.1 TFR改善慢性心梗大鼠心室重构的UTR-RhoA-ROCK机制第90页
    4.3.2 TFR改善hUⅡ诱导心肌细胞肥大和纤维化的可能机制第90-93页
      4.3.2.1 TFR改善hUⅡ诱导心肌细胞肥大的UTR-RhoA-ROCK2-MLCK阻断机制第91-92页
      4.3.2.2 TFR改善hUⅡ诱导成纤维增殖的UTR-RhoA-ROCK1-MLCK阻断机制第92-93页
    4.3.3 钙在TFR改善hUⅡ诱导细胞重构中的角色第93-94页
    4.3.4 TFR改善心梗后大鼠心功能的血管机制第94-95页
      4.3.4.1 TFR舒张离体大鼠冠脉血管的特点及意义第94-95页
      4.3.4.2 TFR改善急性心梗大鼠梗死区血流的意义第95页
  4.4 研究局限性第95-96页
5、结论第96-97页
参考文献第97-105页
附录第105-107页
个人简历第105-107页
致谢第107-108页
综述第108-124页
参考文献第117-124页

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