论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-29页 |
| 1.1 人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1) | 第11-19页 |
| 1.1.1 人免疫缺陷病毒Ⅰ型简介 | 第11-14页 |
| 1.1.2 人类免疫缺陷病毒Ⅰ型反式激活因子tat | 第14-17页 |
| 1.1.3 HIV-1感染的危害与治疗 | 第17-19页 |
| 1.2 人巨细胞病毒(HCMV) | 第19-29页 |
| 1.2.1 人巨细胞病毒的简介 | 第19-23页 |
| 1.2.2 人巨细胞病毒的感染复制周期 | 第23-26页 |
| 1.2.3 人巨细胞病毒的基因表达 | 第26-29页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第29-52页 |
| 2.1 实验中使用的基本仪器、设备 | 第29-30页 |
| 2.2 基本实验试剂 | 第30页 |
| 2.3 常规分子克隆实验技术 | 第30-37页 |
| 2.3.1 大肠杆菌DH5α化转感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
| 2.3.2 大肠杆菌DH5α电转感受态的制备 | 第31-32页 |
| 2.3.3 大肠杆菌DH5α感受态的使用 | 第32-33页 |
| 2.3.4 SDS碱裂解法小量抽提质粒DNA | 第33-34页 |
| 2.3.5 Northern Blot实验 | 第34-36页 |
| 2.3.6 PCR和限制性酶切 | 第36页 |
| 2.3.7 定点突变PCR | 第36-37页 |
| 2.4 酵母双杂交系列实验 | 第37-43页 |
| 2.4.1 cDNA文库的滴定和扩增 | 第37-39页 |
| 2.4.2 酵母双杂交所用培养基 | 第39页 |
| 2.4.3 酵母感受态的制备以及酵母转化 | 第39-40页 |
| 2.4.4 酵母质粒提取 | 第40-41页 |
| 2.4.5 酵母双杂交筛选文库 | 第41-42页 |
| 2.4.6 X-gal显色实验 | 第42-43页 |
| 2.5 细胞水平实验 | 第43-46页 |
| 2.5.1 细胞培养基及试剂 | 第43页 |
| 2.5.2 细胞培养(以HFF细胞为例) | 第43-45页 |
| 2.5.3 磷酸钙法转染细胞(以293T细胞为例) | 第45页 |
| 2.5.4 脂质体法转染细胞(以Lipofectine2000转染Hela细胞为例) | 第45-46页 |
| 2.6 体外蛋白质检测实验 | 第46-50页 |
| 2.6.1 PAGE电泳和Western Blot检测 | 第46-49页 |
| 2.6.2 免疫共沉淀实验 | 第49页 |
| 2.6.3 间接免疫荧光实验 | 第49-50页 |
| 2.7 病毒水平实验 | 第50-52页 |
| 2.7.1 感染HFF细胞、扩增HCMV | 第50-51页 |
| 2.7.2 测定HCMV的病毒滴度 | 第51-52页 |
| 第三章 基因工程改造的核酶RNase P可以有效抑制人免疫缺陷病毒Ⅰ型的复制 | 第52-66页 |
| 3.1 概述 | 第52-54页 |
| 3.2 实验过程和结果 | 第54-64页 |
| 3.2.1 核酶RNase P的构建以及其在体外切割HIV-1的tat基因RNA序列的特性研究 | 第54-57页 |
| 3.2.2 人细胞内瞬时表达核酶RNase P抑制HIV-1的基因表达和复制 | 第57-60页 |
| 3.2.3 人细胞内稳定表达核酶RNase P抑制HIV-1病毒的产生 | 第60-64页 |
| 3.3 分析与讨论 | 第64-66页 |
| 第四章 人巨细胞病毒和人免疫缺陷病毒Ⅰ型间蛋白相互作用的研究 | 第66-91页 |
| 4.1 概述 | 第66-70页 |
| 4.2 实验过程和结果 | 第70-86页 |
| 4.2.1 HIV-1和HCMV病毒蛋白相互作用的Co-IP验证 | 第70-73页 |
| 4.2.2 HCMV病毒蛋白RL1相关的研究 | 第73-77页 |
| 4.2.3 HCMV病毒蛋白RL1与HIV-1的Nef蛋白和tat蛋白相互作用对LTR转录活性的影响 | 第77-79页 |
| 4.2.4 HCMV病毒蛋白RL1与宿主蛋白hnRNPK相互作用的验证 | 第79-81页 |
| 4.2.5 HCMV病毒蛋白RL1与宿主蛋白hnRNPK相互作用对HIV-1基因表达的影响 | 第81-86页 |
| 4.3 分析与讨论 | 第86-91页 |
| 参考文献 | 第91-100页 |
| 攻博期间已发表或正在撰写的论文 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
