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人巨细胞病毒解旋酶与细胞因子Snapin相互作用研究及2010年南昌手足口病流行病学调查研究

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人巨细胞病毒解旋酶与细胞因子Snapin相互作用研究及2010年南昌手足口病流行病学调查研究
论文目录
 
中文摘要第1-6页
Abstract第6-7页
目录第7-9页
第一章 引言第9-23页
  1.1 人巨细胞病毒第9-15页
    1.1.1 人巨细胞病毒简介第9-12页
    1.1.2 人巨细胞病毒的生命周期第12-13页
    1.1.3 人巨细胞病毒的基因表达第13-15页
  1.2 蛋白质问相互作用研究的常见方法第15-17页
    1.2.1 酵母双杂交系统第15-16页
    1.2.2 免疫共沉淀第16页
    1.2.3 共聚焦荧光显微镜第16-17页
  1.3 手足口病第17-23页
    1.3.1 手足口病简介第17-18页
    1.3.2 手足口病的病源体第18-20页
    1.3.3 手足口病的世界流行史第20-21页
    1.3.4 EV71的分子流行病学第21-22页
    1.3.5 手足口病的病原诊断第22-23页
第二章 基础实验材料与方法第23-40页
  2.1 实验仪器与实验设备第23-24页
  2.2 基础实验材料与试剂第24页
  2.3 基本分子克隆相关实验第24-27页
    2.3.1 化学转化感受态细胞DH5α的制备第24-25页
    2.3.2 化学转化感受态细胞DH5α的使用第25页
    2.3.3 小量质粒DNA抽提——碱裂解法第25-26页
    2.3.4 PCR反应和限制性酶切第26页
    2.3.5 Over-lap PCR第26-27页
  2.4 酵母双杂交相关实验第27-30页
    2.4.1 酵母培养基的配制第27-28页
    2.4.2 酵母转化第28-29页
    2.4.3 酵母双杂交验证蛋白相互作用第29页
    2.4.4 X-gal显色实验第29-30页
  2.5 细胞生物学相关实验第30-32页
    2.5.1 细胞培养相关试剂第30页
    2.5.2 细胞培养方法第30-31页
    2.5.3 细胞转染——磷酸钙法第31-32页
  2.6 蛋白质学相关实验第32-35页
    2.6.1 SDS-PAGE凝胶电泳和Western Blot第32-34页
    2.6.2 免疫共沉淀(Co-IP)第34页
    2.6.3 蛋白质的细胞内定位——间接免疫荧光共聚焦第34-35页
  2.7 病毒学相关实验第35-38页
    2.7.1 临床样品的处理与分离鉴定第35-36页
    2.7.2 临床样品的核酸鉴定第36-37页
    2.7.3 病毒滴度的测定第37页
    2.7.4 病毒的大量扩增第37页
    2.7.5 病毒生长曲线测定第37-38页
  2.8 病毒的序列比对及分型——系统发生树分析第38-40页
    2.8.1 系统发生树简介第38-39页
    2.8.2 系统发生树构建方法第39页
    2.8.3 用MEGA构建系统发生树第39-40页
第三章 人巨细胞病毒DNA解旋酶与细胞蛋白因子相互作用的研究第40-67页
  3.1 概述第40-41页
  3.2 实验方法与材料第41-47页
    3.2.1 实验所用材料第41-44页
    3.2.2 实验所用方法第44-47页
  3.3 实验过程与结果第47-59页
    3.3.1 酵母双杂交验证Snapin与UL105相互作用第47-48页
    3.3.2 Co-IP验证Snapin与UL105相互作用第48-49页
    3.3.3 Snapin的H2区在与UL105的相互作用中起到关键作用第49-51页
    3.3.4 Snapin与UL105的细胞内共定位第51-52页
    3.3.5 Snapin表达量高低对UL105细胞内定位的影响第52-57页
    3.3.6 Snapin与UL105、UL70的相互作用相互独立第57-58页
    3.3.7 Snapin与UL105的相互作用对HCMV复制和感染的影响第58-59页
  3.4 分析与讨论第59-62页
  3.5 后续相关实验及计划第62-67页
    3.5.1 Co-IP验证UL105与DNAJA3的相互作用第63-64页
    3.5.2 过量表达UL105并未对DNAJA3的线粒体定位造成影响第64-65页
    3.5.3 后续计划第65-67页
第四章 2010年南昌市手足口病的流行病学调查研究第67-83页
  4.1 概述第67-68页
  4.2 实验方法与材料第68-70页
  4.3 实验过程与结果第70-78页
    4.3.1 临床病例的收集与实验设计第70-71页
    4.3.2 2010年南昌手足口病病例的特征分布第71-73页
    4.3.3 2010年南昌手足口病病例样本的核酸检测第73-75页
    4.3.4 2010年南昌EV71分离株的序列比对与分型第75-78页
  4.4 分析与讨论第78-80页
  4.5 后续相关实验及计划第80-83页
    4.5.1 所收集手足口病病例的抽样调查第80-82页
    4.5.2 所收集高热呼吸道感染病例的抽样调查第82页
    4.5.3 后续实验计划第82-83页
总结第83-84页
参考文献第84-91页
博士期间已发表或正在撰写的论文第91-92页
致谢第92页

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