论文目录 | |
中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
目录 | 第7-9页 |
第一章 引言 | 第9-23页 |
1.1 人巨细胞病毒 | 第9-15页 |
1.1.1 人巨细胞病毒简介 | 第9-12页 |
1.1.2 人巨细胞病毒的生命周期 | 第12-13页 |
1.1.3 人巨细胞病毒的基因表达 | 第13-15页 |
1.2 蛋白质问相互作用研究的常见方法 | 第15-17页 |
1.2.1 酵母双杂交系统 | 第15-16页 |
1.2.2 免疫共沉淀 | 第16页 |
1.2.3 共聚焦荧光显微镜 | 第16-17页 |
1.3 手足口病 | 第17-23页 |
1.3.1 手足口病简介 | 第17-18页 |
1.3.2 手足口病的病源体 | 第18-20页 |
1.3.3 手足口病的世界流行史 | 第20-21页 |
1.3.4 EV71的分子流行病学 | 第21-22页 |
1.3.5 手足口病的病原诊断 | 第22-23页 |
第二章 基础实验材料与方法 | 第23-40页 |
2.1 实验仪器与实验设备 | 第23-24页 |
2.2 基础实验材料与试剂 | 第24页 |
2.3 基本分子克隆相关实验 | 第24-27页 |
2.3.1 化学转化感受态细胞DH5α的制备 | 第24-25页 |
2.3.2 化学转化感受态细胞DH5α的使用 | 第25页 |
2.3.3 小量质粒DNA抽提——碱裂解法 | 第25-26页 |
2.3.4 PCR反应和限制性酶切 | 第26页 |
2.3.5 Over-lap PCR | 第26-27页 |
2.4 酵母双杂交相关实验 | 第27-30页 |
2.4.1 酵母培养基的配制 | 第27-28页 |
2.4.2 酵母转化 | 第28-29页 |
2.4.3 酵母双杂交验证蛋白相互作用 | 第29页 |
2.4.4 X-gal显色实验 | 第29-30页 |
2.5 细胞生物学相关实验 | 第30-32页 |
2.5.1 细胞培养相关试剂 | 第30页 |
2.5.2 细胞培养方法 | 第30-31页 |
2.5.3 细胞转染——磷酸钙法 | 第31-32页 |
2.6 蛋白质学相关实验 | 第32-35页 |
2.6.1 SDS-PAGE凝胶电泳和Western Blot | 第32-34页 |
2.6.2 免疫共沉淀(Co-IP) | 第34页 |
2.6.3 蛋白质的细胞内定位——间接免疫荧光共聚焦 | 第34-35页 |
2.7 病毒学相关实验 | 第35-38页 |
2.7.1 临床样品的处理与分离鉴定 | 第35-36页 |
2.7.2 临床样品的核酸鉴定 | 第36-37页 |
2.7.3 病毒滴度的测定 | 第37页 |
2.7.4 病毒的大量扩增 | 第37页 |
2.7.5 病毒生长曲线测定 | 第37-38页 |
2.8 病毒的序列比对及分型——系统发生树分析 | 第38-40页 |
2.8.1 系统发生树简介 | 第38-39页 |
2.8.2 系统发生树构建方法 | 第39页 |
2.8.3 用MEGA构建系统发生树 | 第39-40页 |
第三章 人巨细胞病毒DNA解旋酶与细胞蛋白因子相互作用的研究 | 第40-67页 |
3.1 概述 | 第40-41页 |
3.2 实验方法与材料 | 第41-47页 |
3.2.1 实验所用材料 | 第41-44页 |
3.2.2 实验所用方法 | 第44-47页 |
3.3 实验过程与结果 | 第47-59页 |
3.3.1 酵母双杂交验证Snapin与UL105相互作用 | 第47-48页 |
3.3.2 Co-IP验证Snapin与UL105相互作用 | 第48-49页 |
3.3.3 Snapin的H2区在与UL105的相互作用中起到关键作用 | 第49-51页 |
3.3.4 Snapin与UL105的细胞内共定位 | 第51-52页 |
3.3.5 Snapin表达量高低对UL105细胞内定位的影响 | 第52-57页 |
3.3.6 Snapin与UL105、UL70的相互作用相互独立 | 第57-58页 |
3.3.7 Snapin与UL105的相互作用对HCMV复制和感染的影响 | 第58-59页 |
3.4 分析与讨论 | 第59-62页 |
3.5 后续相关实验及计划 | 第62-67页 |
3.5.1 Co-IP验证UL105与DNAJA3的相互作用 | 第63-64页 |
3.5.2 过量表达UL105并未对DNAJA3的线粒体定位造成影响 | 第64-65页 |
3.5.3 后续计划 | 第65-67页 |
第四章 2010年南昌市手足口病的流行病学调查研究 | 第67-83页 |
4.1 概述 | 第67-68页 |
4.2 实验方法与材料 | 第68-70页 |
4.3 实验过程与结果 | 第70-78页 |
4.3.1 临床病例的收集与实验设计 | 第70-71页 |
4.3.2 2010年南昌手足口病病例的特征分布 | 第71-73页 |
4.3.3 2010年南昌手足口病病例样本的核酸检测 | 第73-75页 |
4.3.4 2010年南昌EV71分离株的序列比对与分型 | 第75-78页 |
4.4 分析与讨论 | 第78-80页 |
4.5 后续相关实验及计划 | 第80-83页 |
4.5.1 所收集手足口病病例的抽样调查 | 第80-82页 |
4.5.2 所收集高热呼吸道感染病例的抽样调查 | 第82页 |
4.5.3 后续实验计划 | 第82-83页 |
总结 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-91页 |
博士期间已发表或正在撰写的论文 | 第91-92页 |
致谢 | 第92页 |