论文目录 | |
| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略语的中英文对照 | 第13-14页 |
| 第一篇 文献综述 | 第14-44页 |
| 第一章 Wip1基因研究进展 | 第14-22页 |
| 1 Wip1概述 | 第14-16页 |
| 1.1 Wip1 分子构成 | 第14-15页 |
| 1.2 Wip1 作用机制 | 第15页 |
| 1.3 Wip1 的致癌性 | 第15-16页 |
| 2 Wip1 调控 | 第16-17页 |
| 2.1 Wip1 转录调控 | 第16页 |
| 2.2 Wip1 转录后调控 | 第16-17页 |
| 3 Wip1研究展望 | 第17-18页 |
| 参考文献 | 第18-22页 |
| 第二章 巨噬细胞迁移、吞噬、炎症反应相关综述 | 第22-36页 |
| 1 巨噬细胞与迁移 | 第22-28页 |
| 1.1 细胞迁移的机制 | 第22-23页 |
| 1.2 F-actin与细胞迁移 | 第23-24页 |
| 1.3 细胞迁移相关信号通路 | 第24-27页 |
| 1.4 巨噬细胞迁移与动脉粥样硬化 | 第27-28页 |
| 2 巨噬细胞吞噬的研究 | 第28-30页 |
| 2.1 巨噬细胞吞噬 | 第28-29页 |
| 2.2 巨噬清道夫受体CD36 | 第29-30页 |
| 3 巨噬细胞炎性因子 | 第30-31页 |
| 3.1 炎症 | 第30页 |
| 3.2 炎性因子 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-36页 |
| 第三章 骨髓间充质干细胞增殖、迁移相关综述 | 第36-44页 |
| 1 骨髓间充质干细胞 | 第36页 |
| 2 骨髓间充质干细胞的迁移 | 第36-38页 |
| 2.1 选择素 | 第37页 |
| 2.2 趋化因子 | 第37页 |
| 2.3 整合素 | 第37-38页 |
| 3 骨髓间充质干细胞的增殖 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 第二篇 试验部分 | 第44-108页 |
| 第一章 Wip1调控巨噬细胞迁移、吞噬、炎症反应机制研究 | 第44-84页 |
| 1 材料与方法 | 第44-56页 |
| 1.1 实验动物与处理 | 第44-45页 |
| 1.2 DNA提取 | 第45页 |
| 1.3 小鼠基因型鉴定 | 第45-46页 |
| 1.4 巨噬细胞的获取 | 第46页 |
| 1.5 小鼠腹腔巨噬细胞流式鉴定 | 第46页 |
| 1.6 小鼠巨噬细胞/睾丸组织总RNA的提取 | 第46-47页 |
| 1.7 总RNA的电泳检测 | 第47页 |
| 1.8 Wip1-pcDNA3.1(+)质粒的构建 | 第47-51页 |
| 1.9 巨噬细胞质粒转染 | 第51页 |
| 1.10 实时荧光定量(q-PCR)检测 | 第51-52页 |
| 1.11 蛋白质免疫印迹 | 第52-53页 |
| 1.12 细胞F-actin染色 | 第53页 |
| 1.13 巨噬细胞迁移检测 | 第53-54页 |
| 1.14 巨噬细胞黏附能力检测 | 第54-55页 |
| 1.15 巨噬细胞RhoA、Rac1、CDC42-GTP活性检测 | 第55-56页 |
| 1.16 巨噬细胞分泌TNF-a、IL-6、IL-1β炎性因子检测 | 第56页 |
| 1.17 数据分析 | 第56页 |
| 2 实验结果 | 第56-75页 |
| 2.1 小鼠鼠尾DNA的提取及基因型的鉴定 | 第56-57页 |
| 2.2 Wip1-pcDNA3.1(+)过表达载体构建 | 第57-58页 |
| 2.3 巨噬细胞系转染后Transwell检测 | 第58-59页 |
| 2.4 原代巨噬细胞鉴定 | 第59-60页 |
| 2.5 原代巨噬细胞黏附能力检测 | 第60-61页 |
| 2.6 原代巨噬细胞Transwell检测 | 第61页 |
| 2.7 Rho家族在Wip1-WT和Wip1~(-/-)巨噬细胞中mRNA表达情况 | 第61-62页 |
| 2.8 Rho家族在Wip1-WT和Wip1~(-/-)巨噬细胞中蛋白表达情况 | 第62-63页 |
| 2.9 Rac1-、RhoA-,CDC42-GTP活性检测 | 第63-64页 |
| 2.10 Wip-WT和Wip1~(-/-)巨噬细胞F-actin染色 | 第64-65页 |
| 2.11 Rac1抑制剂对Wip-WT和Wip1~(-/-)巨噬细胞迁移的影响 | 第65-66页 |
| 2.12 Wip-WT和Wip1-/-巨噬细胞AKT及pAKT蛋白表达量 | 第66页 |
| 2.13 PI3K/AKT通路与细胞迁移 | 第66-67页 |
| 2.14 小鼠巨噬细胞Rac1-GTPase、PI3K/AKT通路与Wip1关系 | 第67-68页 |
| 2.15 Wip-WT和Wip1~(-/-)巨噬细胞体内迁移 | 第68-70页 |
| 2.16 wip1-WT和wip1~(-/-)巨噬细胞吞噬相关表面Marker | 第70-72页 |
| 2.17 Wip1调控CD36的通路研究 | 第72-74页 |
| 2.18 Wip1影响巨噬细胞炎性因子的分泌 | 第74-75页 |
| 3 讨论 | 第75-81页 |
| 参考文献 | 第81-84页 |
| 第二章 Wip1调控骨髓间充质干细胞增殖和迁移机制研究 | 第84-108页 |
| 1 材料方法 | 第84-90页 |
| 1.1 实验动物 | 第84页 |
| 1.2 骨髓间充质干细胞的提取 | 第84-85页 |
| 1.3 骨髓间充质干细胞特异性表面分子流式检测 | 第85页 |
| 1.4 骨髓间充质干细胞形态鉴定与分化特性检测 | 第85页 |
| 1.5 骨髓间充质干细胞增殖检测 | 第85-86页 |
| 1.6 骨髓间充质干细胞细胞周期检测 | 第86页 |
| 1.7 蛋白质免疫印迹 | 第86-87页 |
| 1.8 骨髓间充质干细胞免疫荧光 | 第87页 |
| 1.9 细胞衰老β-半乳糖苷酶染色 | 第87-88页 |
| 1.10 骨髓间充质干细胞划痕实验 | 第88页 |
| 1.11 Transwell检测骨髓间充质干细胞迁移能力实验 | 第88页 |
| 1.12 骨髓间充质干细胞Rac1-GTP活性检测 | 第88-89页 |
| 1.13 骨髓间充质干细胞F-actin染色 | 第89页 |
| 1.14 数据分析 | 第89-90页 |
| 2 实验结果 | 第90-101页 |
| 2.1 骨髓间充质干细胞分子特异性检测 | 第90页 |
| 2.2 骨髓间充质干细胞细胞形态、分化特性检测 | 第90-91页 |
| 2.3 Wip1-WT、Wip1~(-/-)骨髓间充质干细胞增殖差异分析 | 第91页 |
| 2.4 Wip1-WT、Wip1~(-/-)骨髓间充质干细胞细胞周期分析 | 第91-92页 |
| 2.5 Wip1-WT、Wip1~(-/-)骨髓间充质干细胞细胞周期蛋白cyclin B1表达分析 | 第92-93页 |
| 2.6 骨髓间充质干细胞生长状态观察 | 第93-94页 |
| 2.7 骨髓间充质干细胞衰老检测 | 第94-95页 |
| 2.8 骨髓间充质干细胞划痕检测 | 第95-96页 |
| 2.9 骨髓间充质干细胞transwell检测 | 第96页 |
| 2.10 骨髓间充质干细胞Rac1-GTPase活性检测 | 第96-97页 |
| 2.11 骨髓间充质干细胞AKT活性检测 | 第97-98页 |
| 2.12 Wip1影响骨髓间充质干细胞迁移通路研究 | 第98-99页 |
| 2.13 Wip1影响骨髓间充质干细胞F-actin分布 | 第99-100页 |
| 2.14 Wip1过表达后抑制骨髓间充质干细胞体外迁移 | 第100页 |
| 2.15 Wip1过表达对骨髓间充质干细胞体外培养早衰的逆转 | 第100-101页 |
| 3 讨论 | 第101-104页 |
| 参考文献 | 第104-108页 |
| 全文结论 | 第108-110页 |
| 创新 | 第110-112页 |
| 致谢 | 第112-114页 |
| 攻读博士学位期间发表的文章 | 第114-116页 |
| 附录 | 第116-120页 |
