论文目录 | |
中文摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
中英文名词对照表 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-42页 |
1.1 前言 | 第10-14页 |
1.1.1 哺乳动物心脏的结构与功能 | 第10页 |
1.1.2 哺乳动物心脏发生的基本过程 | 第10-11页 |
1.1.3 斑马鱼是研究心血管系统发育的优势模型 | 第11-13页 |
1.1.4 FOXC1转录因子在心脏发生过程中的研究进展 | 第13-14页 |
1.2 斑马鱼心脏发生的主要过程及分子机制 | 第14-22页 |
1.2.1 斑马鱼心脏谱系的命运决定 | 第15-17页 |
1.2.2 斑马鱼原始心管的形成 | 第17-18页 |
1.2.3 斑马鱼心管的膨大与环化 | 第18-19页 |
1.2.4 斑马鱼胚胎心脏房室通道的特化与房室瓣膜的形成 | 第19-21页 |
1.2.5 斑马鱼心脏收缩与传导系统的形成 | 第21-22页 |
1.3 FOXC1的结构和功能研究进展 | 第22-31页 |
1.3.1 FOXC1转录因子的结构和功能特征 | 第22-24页 |
1.3.2 FOXC1突变导致Axenfeld-Rieger综合征 | 第24-25页 |
1.3.3 FOXC1在脊椎动物体节发生过程中发挥重要作用 | 第25页 |
1.3.4 FOXC1调控内皮细胞特化进而影响血管发育 | 第25-26页 |
1.3.5 FOXC1在肿瘤发生发展中起到重要作用 | 第26-28页 |
1.3.6 FOXC1调控神经系统发育 | 第28页 |
1.3.7 FOXC1参与了脊椎动物心脏发生并且与人的心衰的病理进程相关 | 第28-31页 |
1.4 本论文的研究目的和意义 | 第31-32页 |
参考文献 | 第32-42页 |
第二章 foxc1a功能缺失导致斑马鱼胚胎心血管系统发育缺陷 | 第42-68页 |
2.1 前言 | 第43页 |
2.2 材料与方法 | 第43-50页 |
2.3 结果 | 第50-62页 |
2.3.1 foxc1a功能缺失的斑马鱼胚胎表现出形态发育上的缺陷 | 第50-52页 |
2.3.2 敲除foxc1a破坏斑马鱼胚胎心脏结构 | 第52-54页 |
2.3.3 敲除foxc1a影响斑马鱼胚胎心室的收缩功能 | 第54-56页 |
2.3.4 敲除foxc1a导致斑马鱼胚胎房室通道特化异常 | 第56-58页 |
2.3.5 敲除foxc1a导致斑马鱼胚胎心房和心室分化异常 | 第58-60页 |
2.3.6 敲除foxc1a特异地影响斑马鱼胚胎头部的血管新生 | 第60页 |
2.3.7 foxc1a突变的斑马鱼胚胎中红细胞分化异常 | 第60-62页 |
2.4 讨论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-68页 |
第三章 nkx2.5部分介导了foxc1a在斑马鱼心脏发生中的作用 | 第68-90页 |
3.1 前言 | 第69-70页 |
3.2 材料与方法 | 第70-74页 |
3.3 结果 | 第74-85页 |
3.3.1 敲除foxc1a不影响斑马鱼胚胎原肠作用过程中胚层的图式形成 | 第74-75页 |
3.3.2 foxc1a功能缺失的斑马鱼胚胎心脏前体细胞特化发生异常 | 第75-77页 |
3.3.3 血液血管前体细胞关键转录因子在foxc1a敲除的斑马鱼胚胎前部侧板中胚层头端的表达不受影响 | 第77-80页 |
3.3.4 时间特异性地过表达nkx2.5可以部分拯救foxc1a敲除的斑马鱼胚胎的心脏缺陷 | 第80-82页 |
3.3.5 体节期foxc1a突变体胚胎中RA信号及WNT信号相关基因表达受到影响 | 第82-84页 |
3.3.6 foxc1a突变会导致多个微小RNA在原肠早期表达水平发生改变 | 第84-85页 |
3.4 讨论 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-90页 |
第四章 斑马鱼Foxc1a通过直接结合到nkx2.5的启动子上调控其在体节期前部侧板中胚层的表达 | 第90-110页 |
4.1 前言 | 第91-92页 |
4.2 材料与方法 | 第92-98页 |
4.3 结果 | 第98-108页 |
4.3.1 斑马鱼foxc1a的时空表达图式 | 第98-99页 |
4.3.2 foxc1a转基因斑马鱼的构建与筛选 | 第99-100页 |
4.3.3 foxc1a转基因斑马鱼中荧光报告基因的表达与内源foxc1a表达一致 | 第100页 |
4.3.4 斑马鱼foxc1a与nkx2.5在体节期存在共表达 | 第100-101页 |
4.3.5 斑马鱼nkx2.5转录起始位点上游-506bp的典型的foxc1a结合位点对于foxc1a过表达并无响应 | 第101-102页 |
4.3.6 斑马鱼nkx2.5启动子截短的双荧光素酶报告基因分析证明nkx2.5转录起始位点上游1kbp内至少存在两个潜在的Foxc1a结合位点 | 第102-104页 |
4.3.7 染色质免疫共沉淀实验证实斑马鱼nkx2.5近端启动子上存在两段可能的Foxc1a结合区域 | 第104-105页 |
4.3.8 双荧光素酶报告基因分析证明斑马鱼nkx2.5启动子上存在两个响应Foxc1a的结合位点 | 第105-108页 |
4.4 讨论 | 第108页 |
参考文献 | 第108-110页 |
第五章 哺乳动物细胞中NKX2-5的表达受FOXC1的调控 | 第110-124页 |
5.1 前言 | 第111-112页 |
5.2 材料与方法 | 第112-115页 |
5.3 结果 | 第115-120页 |
5.3.1 人FOXC1和NKX2-5与斑马鱼foxc1a和nkx2.5的共线性分析 | 第115-116页 |
5.3.2 在大鼠心肌细胞中敲降Foxc1导致NKX2-5表达下降 | 第116-117页 |
5.3.3 在大鼠心肌细胞中过表达Foxc1导致NKX2-5表达上升 | 第117页 |
5.3.4 人的NKX2-5启动子以剂量依赖的方式受人FOXC1调控 | 第117-118页 |
5.3.5 人的NKX2-5转录起始位点上游1 Kbp内存在FOXC1结合位点 | 第118-119页 |
5.3.6 人FOXC1在不同细胞类型中对NKX2-5启动子调控方式不同 | 第119页 |
5.3.7 心脏发生异常病人携带的FOXC1点突变会导致NKX2-5表达异常 | 第119-120页 |
5.4 讨论 | 第120-122页 |
参考文献 | 第122-124页 |
附录 攻读博士学位期间参与的工作及取得的成果 | 第124-128页 |
致谢 | 第128-131页 |