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FOXC1在脊椎动物心脏发生中的作用机制研究

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FOXC1在脊椎动物心脏发生中的作用机制研究
论文目录
 
中文摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
中英文名词对照表第9-10页
第一章 文献综述第10-42页
  1.1 前言第10-14页
    1.1.1 哺乳动物心脏的结构与功能第10页
    1.1.2 哺乳动物心脏发生的基本过程第10-11页
    1.1.3 斑马鱼是研究心血管系统发育的优势模型第11-13页
    1.1.4 FOXC1转录因子在心脏发生过程中的研究进展第13-14页
  1.2 斑马鱼心脏发生的主要过程及分子机制第14-22页
    1.2.1 斑马鱼心脏谱系的命运决定第15-17页
    1.2.2 斑马鱼原始心管的形成第17-18页
    1.2.3 斑马鱼心管的膨大与环化第18-19页
    1.2.4 斑马鱼胚胎心脏房室通道的特化与房室瓣膜的形成第19-21页
    1.2.5 斑马鱼心脏收缩与传导系统的形成第21-22页
  1.3 FOXC1的结构和功能研究进展第22-31页
    1.3.1 FOXC1转录因子的结构和功能特征第22-24页
    1.3.2 FOXC1突变导致Axenfeld-Rieger综合征第24-25页
    1.3.3 FOXC1在脊椎动物体节发生过程中发挥重要作用第25页
    1.3.4 FOXC1调控内皮细胞特化进而影响血管发育第25-26页
    1.3.5 FOXC1在肿瘤发生发展中起到重要作用第26-28页
    1.3.6 FOXC1调控神经系统发育第28页
    1.3.7 FOXC1参与了脊椎动物心脏发生并且与人的心衰的病理进程相关第28-31页
  1.4 本论文的研究目的和意义第31-32页
参考文献第32-42页
第二章 foxc1a功能缺失导致斑马鱼胚胎心血管系统发育缺陷第42-68页
  2.1 前言第43页
  2.2 材料与方法第43-50页
  2.3 结果第50-62页
    2.3.1 foxc1a功能缺失的斑马鱼胚胎表现出形态发育上的缺陷第50-52页
    2.3.2 敲除foxc1a破坏斑马鱼胚胎心脏结构第52-54页
    2.3.3 敲除foxc1a影响斑马鱼胚胎心室的收缩功能第54-56页
    2.3.4 敲除foxc1a导致斑马鱼胚胎房室通道特化异常第56-58页
    2.3.5 敲除foxc1a导致斑马鱼胚胎心房和心室分化异常第58-60页
    2.3.6 敲除foxc1a特异地影响斑马鱼胚胎头部的血管新生第60页
    2.3.7 foxc1a突变的斑马鱼胚胎中红细胞分化异常第60-62页
  2.4 讨论第62-63页
参考文献第63-68页
第三章 nkx2.5部分介导了foxc1a在斑马鱼心脏发生中的作用第68-90页
  3.1 前言第69-70页
  3.2 材料与方法第70-74页
  3.3 结果第74-85页
    3.3.1 敲除foxc1a不影响斑马鱼胚胎原肠作用过程中胚层的图式形成第74-75页
    3.3.2 foxc1a功能缺失的斑马鱼胚胎心脏前体细胞特化发生异常第75-77页
    3.3.3 血液血管前体细胞关键转录因子在foxc1a敲除的斑马鱼胚胎前部侧板中胚层头端的表达不受影响第77-80页
    3.3.4 时间特异性地过表达nkx2.5可以部分拯救foxc1a敲除的斑马鱼胚胎的心脏缺陷第80-82页
    3.3.5 体节期foxc1a突变体胚胎中RA信号及WNT信号相关基因表达受到影响第82-84页
    3.3.6 foxc1a突变会导致多个微小RNA在原肠早期表达水平发生改变第84-85页
  3.4 讨论第85-86页
参考文献第86-90页
第四章 斑马鱼Foxc1a通过直接结合到nkx2.5的启动子上调控其在体节期前部侧板中胚层的表达第90-110页
  4.1 前言第91-92页
  4.2 材料与方法第92-98页
  4.3 结果第98-108页
    4.3.1 斑马鱼foxc1a的时空表达图式第98-99页
    4.3.2 foxc1a转基因斑马鱼的构建与筛选第99-100页
    4.3.3 foxc1a转基因斑马鱼中荧光报告基因的表达与内源foxc1a表达一致第100页
    4.3.4 斑马鱼foxc1a与nkx2.5在体节期存在共表达第100-101页
    4.3.5 斑马鱼nkx2.5转录起始位点上游-506bp的典型的foxc1a结合位点对于foxc1a过表达并无响应第101-102页
    4.3.6 斑马鱼nkx2.5启动子截短的双荧光素酶报告基因分析证明nkx2.5转录起始位点上游1kbp内至少存在两个潜在的Foxc1a结合位点第102-104页
    4.3.7 染色质免疫共沉淀实验证实斑马鱼nkx2.5近端启动子上存在两段可能的Foxc1a结合区域第104-105页
    4.3.8 双荧光素酶报告基因分析证明斑马鱼nkx2.5启动子上存在两个响应Foxc1a的结合位点第105-108页
  4.4 讨论第108页
参考文献第108-110页
第五章 哺乳动物细胞中NKX2-5的表达受FOXC1的调控第110-124页
  5.1 前言第111-112页
  5.2 材料与方法第112-115页
  5.3 结果第115-120页
    5.3.1 人FOXC1和NKX2-5与斑马鱼foxc1a和nkx2.5的共线性分析第115-116页
    5.3.2 在大鼠心肌细胞中敲降Foxc1导致NKX2-5表达下降第116-117页
    5.3.3 在大鼠心肌细胞中过表达Foxc1导致NKX2-5表达上升第117页
    5.3.4 人的NKX2-5启动子以剂量依赖的方式受人FOXC1调控第117-118页
    5.3.5 人的NKX2-5转录起始位点上游1 Kbp内存在FOXC1结合位点第118-119页
    5.3.6 人FOXC1在不同细胞类型中对NKX2-5启动子调控方式不同第119页
    5.3.7 心脏发生异常病人携带的FOXC1点突变会导致NKX2-5表达异常第119-120页
  5.4 讨论第120-122页
参考文献第122-124页
附录 攻读博士学位期间参与的工作及取得的成果第124-128页
致谢第128-131页

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