论文目录 | |
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 第一章 研究背景 | 第11-25页 |
| 1.1 乙型肝炎及其治疗的研究现状 | 第11-12页 |
| 1.2 中药氧化苦参碱治疗乙型肝炎的研究现状 | 第12-14页 |
| 1.3 噬菌体展示技术用于药物靶标淘选的研究现状 | 第14-16页 |
| 1.4 His标签融合蛋白及其原核表达纯化 | 第16-19页 |
| 1.5 分子对接及Autodock | 第19-22页 |
| 1.6 等温滴定量热法ITC | 第22-25页 |
| 第二章 氧化苦参碱结合蛋白靶标的淘选 | 第25-44页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第25-29页 |
| 2.1.1 组织样本 | 第25页 |
| 2.1.2 主要试剂及配方 | 第25-28页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第28-29页 |
| 2.2 方法 | 第29-37页 |
| 2.2.1 肝胆湿热证慢性乙型肝炎T7噬菌体cDNA文库的构建 | 第29-35页 |
| 2.2.2 氧化苦参碱结合蛋白靶标的淘选 | 第35-37页 |
| 2.3 结果 | 第37-43页 |
| 2.3.1 HE染色 | 第37页 |
| 2.3.2 总RNA的制备 | 第37页 |
| 2.3.3 mRNA的分离 | 第37-38页 |
| 2.3.4 宿主菌BLT5615LB琼脂平板培养 | 第38页 |
| 2.3.5 T7噬菌体cDNA文库 | 第38-39页 |
| 2.3.6 cDNA文库的鉴定 | 第39页 |
| 2.3.7 氧化苦参碱结合蛋白靶标的淘选 | 第39-40页 |
| 2.3.8 氧化苦参碱结合噬菌体序列测序及比对 | 第40-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-44页 |
| 第三章 UQCRB蛋白原核表达及纯化 | 第44-72页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第44-49页 |
| 3.1.1 菌株、细胞及载体 | 第44页 |
| 3.1.2 主要试剂及配方 | 第44-48页 |
| 3.1.3 主要实验仪器 | 第48-49页 |
| 3.2 方法 | 第49-63页 |
| 3.2.1 UQCRB目的基因的获取 | 第49-51页 |
| 3.2.2 UQCRB目的基因克隆载体的构建 | 第51-55页 |
| 3.2.3 His标签UQCRB融合蛋白原核表达载体的构建 | 第55-59页 |
| 3.2.4 His标签UQCRB融合蛋白原核表达 | 第59-61页 |
| 3.2.5 His标签UQCRB融合蛋白的纯化 | 第61-63页 |
| 3.3 结果 | 第63-71页 |
| 3.3.1 UQCRB目的基因的获取 | 第63页 |
| 3.3.2 UQCRB目的基因克隆载体的构建 | 第63-66页 |
| 3.3.3 His标签UQCRB融合蛋白原核表达载体的构建 | 第66-69页 |
| 3.3.4 His标签UQCRB融合蛋白原核表达 | 第69-70页 |
| 3.3.5 His标签UQCRB融合蛋白的纯化 | 第70-71页 |
| 3.4 讨论 | 第71-72页 |
| 第四章 UQCRB蛋白与氧化苦参碱的相互作用研究 | 第72-82页 |
| 4.1 材料 | 第72-74页 |
| 4.1.1 主要试剂及配方 | 第72-73页 |
| 4.1.2 主要实验仪器 | 第73-74页 |
| 4.2 方法 | 第74-75页 |
| 4.2.1 分析序列属于UQCRB蛋白基因的氧化苦参碱结合噬菌体与氧化苦参碱亲和鉴定 | 第74-75页 |
| 4.2.2 UQCRB及氧化苦参碱计算机分子对接模拟 | 第75页 |
| 4.2.3 UQCRB与氧化苦参碱的ITC滴定 | 第75页 |
| 4.3 结果 | 第75-79页 |
| 4.3.1 分析序列属于UQCRB蛋白基因的氧化苦参碱结合噬菌体与氧化苦参碱亲和鉴定 | 第75-78页 |
| 4.3.2 UQCRB及氧化苦参碱计算机分子对接模拟 | 第78-79页 |
| 4.3.3 UQCRB与氧化苦参碱的ITC滴定 | 第79页 |
| 4.4 讨论 | 第79-82页 |
| 结语 | 第82-84页 |
| 研究总结 | 第82页 |
| 存在不足 | 第82页 |
| 研究创新性 | 第82页 |
| 研究意义 | 第82页 |
| 研究展望 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-91页 |
| 附录 | 第91-105页 |
| 附录1: 肝胆湿热证乙型肝炎病人的纳入标准 | 第91页 |
| 附录2: 氧化苦参碱结合噬菌体分析序列属于其他蛋白基因的测序及比对结果 | 第91-102页 |
| 附录3: 英文缩略语 | 第102-105页 |
| 在校期间发表论文情况 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 统计学审核证明 | 第107-108页 |
| 详细摘要 | 第108-130页 |
