论文目录 | |
摘要 | 第11-14页 |
ABSTRACT | 第14-17页 |
缩略词表 | 第17-19页 |
第一章 文献综述 | 第19-45页 |
第一节 大豆异黄酮与人体健康 | 第19-30页 |
1 大豆异黄酮的化学性质及来源 | 第20-21页 |
1.1 大豆异黄酮的结构与化学性质 | 第20-21页 |
1.2 大豆异黄酮的植物来源和含量 | 第21页 |
2 大豆异黄酮在植物中的生理功能 | 第21-22页 |
2.1 参与防御反应 | 第21-22页 |
2.2 固氮共生 | 第22页 |
3 大豆异黄酮与人体健康相关的生物学效应 | 第22-24页 |
3.1 抗肿瘤活性 | 第23页 |
3.2 防治妇女绝经后疾病 | 第23页 |
3.3 调节血脂和减少心血管疾病 | 第23-24页 |
3.4 神经保护作用 | 第24页 |
4 大豆异黄酮的药代动力学性质及可能的分子靶点 | 第24-26页 |
4.1 雌激素样作用 | 第25页 |
4.2 抗氧化作用 | 第25页 |
4.3 抗炎活性 | 第25-26页 |
4.4 相关酶和信号通路抑制作用 | 第26页 |
4.5 基因甲基化调控 | 第26页 |
5 植物活性成分健康价值的评估方法 | 第26-30页 |
5.1 流行病学研究 | 第26-27页 |
5.2 细胞和动物模型 | 第27-28页 |
5.3 临床研究 | 第28-30页 |
第二节 用于生产活性分子的植物系统研究进展 | 第30-36页 |
1 植物生物反应器研究进展 | 第30-33页 |
1.1 植物生物反应器表达系统 | 第30-31页 |
1.2 植物生物反应器的优点和局限性 | 第31-32页 |
1.3 植物生物反应器应用实例 | 第32-33页 |
2 增加植物中活性分子生产研究策略 | 第33-36页 |
2.1 代谢途径工程 | 第33-34页 |
2.2 组织培养技术 | 第34-35页 |
2.3 快速育种 | 第35页 |
2.4 从生物炼制过程中获得活性分子 | 第35-36页 |
第三节 增加大豆异黄酮含量的遗传改良研究进展 | 第36-45页 |
1 大豆异黄酮生物合成途径 | 第36-40页 |
1.1 苯丙氨酸解氨酶 | 第36-38页 |
1.2 查尔酮合酶 | 第38页 |
1.3 异黄酮合酶 | 第38-39页 |
1.4 黄烷酮3-羟化酶 | 第39页 |
1.5 查儿酮异构酶 | 第39-40页 |
1.6 类黄酮途径调节基因 | 第40页 |
2 异黄酮代谢途径调控策略 | 第40-42页 |
2.1 内源性关键代谢酶或转录因子的调控 | 第41页 |
2.2 外源性关键代谢酶基因的表达 | 第41-42页 |
2.3 外源性转录因子调控 | 第42页 |
2.4 微生物生产 | 第42页 |
3 本研究的目的意义 | 第42-45页 |
第二章 GENISTEIN对小鼠脑缺血模型的保护活性及机制探讨 | 第45-61页 |
1 材料与方法 | 第45-50页 |
1.1 动物 | 第45-46页 |
1.2 药品与试剂 | 第46页 |
1.3 主要仪器 | 第46页 |
1.4 方法 | 第46-50页 |
1.4.1 动物分组及处理 | 第46-47页 |
1.4.2 小鼠局灶性大脑中动脉梗塞模型建立 | 第47页 |
1.4.3 神经行为学评分 | 第47页 |
1.4.4 脑梗死体积测定 | 第47-48页 |
1.4.5 细胞凋亡分析 | 第48-49页 |
1.4.6 脑组织SOD,MDA和GPx的测定 | 第49页 |
1.4.7 皮层线粒体制备 | 第49页 |
1.4.8 组织及线粒体内ROS生成测定 | 第49页 |
1.4.9 Caspase-3活性分析 | 第49-50页 |
1.4.10 Western Blot | 第50页 |
1.4.11 数据统计 | 第50页 |
2 结果与分析 | 第50-56页 |
2.1 Genistein对脑缺血小鼠脑梗死体积和神经行为学评分的影响 | 第50-51页 |
2.2 Genistein对脑缺血小鼠神经细胞凋亡的影响 | 第51-52页 |
2.3 Genistein对脑缺血小鼠抗氧化酶活性及MDA含量的影响 | 第52-53页 |
2.4 Genistein对脑缺血小鼠ROS生成的影响 | 第53-54页 |
2.5 Genistein对脑缺血小鼠线粒体功能的影响 | 第54-55页 |
2.6 Genistein对脑缺血小鼠NF-κB信号通路激活的影响 | 第55-56页 |
3 讨论 | 第56-61页 |
第三章 GENISTEIN对体外神经元氧化损伤的保护作用及机制探讨 | 第61-73页 |
1 材料与方法 | 第61-64页 |
1.1 动物 | 第61页 |
1.2 药品 | 第61-62页 |
1.3 主要仪器 | 第62页 |
1.4 实验方法 | 第62-64页 |
1.4.1 原代神经元培养 | 第62页 |
1.4.2 过氧化氢损伤模型建立和药物处理 | 第62-63页 |
1.4.3 ROS生成测定 | 第63页 |
1.4.4 Hoechest 33258染色 | 第63页 |
1.4.5 Caspase-3和caspase-9活性分析 | 第63页 |
1.4.6 Western Blot | 第63-64页 |
1.4.7 数据统计 | 第64页 |
2 结果与分析 | 第64-70页 |
2.1 Genistein对过氧化氢诱导的神经元细胞损伤的保护作用 | 第64-65页 |
2.2 Genistein对过氧化氢诱导的神经元ROS生成的影响 | 第65-66页 |
2.3 Genistein对过氧化氢诱导的神经元凋亡的影响 | 第66-67页 |
2.4 Genistein对氧化应激诱导的凋亡相关蛋白表达的影响 | 第67-68页 |
2.5 Genistein对过氧化氢诱导的神经元NF-κB信号通路激活的影响 | 第68-69页 |
2.6 Genistein对过氧化氢诱导的神经元JNK和ERK信号通路激活的影响 | 第69-70页 |
3 讨论 | 第70-73页 |
第四章 在烟草系统中产生GENISTEIN的遗传修饰 | 第73-97页 |
1 材料与方法 | 第73-82页 |
1.1 实验材料 | 第73-74页 |
1.2 主要试剂 | 第74页 |
1.3 供试菌株和载体 | 第74页 |
1.4 主要仪器 | 第74页 |
1.5 实验方法 | 第74-82页 |
1.5.1 总RNA的提取、纯化及cDNA第一链的合成 | 第74-75页 |
1.5.2 大豆IFS1和IFS2基因cDNA片段的克隆 | 第75-76页 |
1.5.3 植物过量表达载体的构建 | 第76-78页 |
1.5.4 农杆菌叶盘浸染法转化烟草 | 第78-79页 |
1.5.5 转基因植株阳性鉴定 | 第79-80页 |
1.5.6 转基因植株基因表达分析 | 第80-81页 |
1.5.7 转基因植株基因拷贝数检测 | 第81页 |
1.5.8 转基因植株Genistein含量测定 | 第81页 |
1.5.9 数据统计 | 第81-82页 |
2 结果与分析 | 第82-92页 |
2.1 IFS1和IFS2基因的克隆及序列分析 | 第82-83页 |
2.2 IFS1和IFS2基因表达载体的构建和验证 | 第83-84页 |
2.3 重组质粒转化根癌农杆菌 | 第84页 |
2.4 转基因烟草的分子鉴定 | 第84-85页 |
2.5 转基因烟草的基因表达分析 | 第85-88页 |
2.6 转基因烟草的基因拷贝数检测 | 第88-90页 |
2.7 转基因烟草植株表型分析 | 第90-91页 |
2.8 转基因烟草Genistein含量检测 | 第91-92页 |
3 讨论 | 第92-97页 |
全文结论 | 第97-99页 |
本研究创新之处 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-121页 |
附录 | 第121-139页 |
附录一 实验方法 | 第121-130页 |
附录二 常用培养基和相关试剂的配置 | 第130-134页 |
附录三 基因序列信息 | 第134-139页 |
攻读学位期间已发表及待发表学术论文 | 第139-141页 |
致谢 | 第141页 |