论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 缩略语 | 第10-20页 |
| 第1章 绪论 | 第20-33页 |
| 1.1 三叶青 | 第20-21页 |
| 1.2 三叶青中的主要化学成分 | 第21-23页 |
| 1.2.1 黄酮类化合物 | 第21页 |
| 1.2.2 酚酸类化合物 | 第21-22页 |
| 1.2.3 三萜及甾体类化合物 | 第22页 |
| 1.2.4 挥发油和脂肪酸类化合物 | 第22页 |
| 1.2.5 其他化合物 | 第22-23页 |
| 1.3 三叶青的生理活性 | 第23-27页 |
| 1.3.1 抗肿瘤作用 | 第23-25页 |
| 1.3.2 免疫调节作用 | 第25-26页 |
| 1.3.3 抗氧化作用 | 第26页 |
| 1.3.4 抗炎、镇痛与解热作用 | 第26-27页 |
| 1.3.5 保肝作用 | 第27页 |
| 1.3.6 抗病毒作用 | 第27页 |
| 1.4 急性毒性 | 第27-28页 |
| 1.5 三叶青的临床应用 | 第28-29页 |
| 1.5.1 抗肿瘤和抗癌 | 第28页 |
| 1.5.2 治疗血液病及心脑血管疾病 | 第28页 |
| 1.5.3 治疗肝炎 | 第28-29页 |
| 1.5.4 其他临床应用 | 第29页 |
| 1.6 本课题研究的目的、意义及主要内容 | 第29-33页 |
| 1.6.1 课题来源 | 第29页 |
| 1.6.2 研究目的和意义 | 第29-30页 |
| 1.6.3 主要研究内容 | 第30-33页 |
| 第2章 三叶青提取物体外抗氧化和抗增殖活性的研究 | 第33-40页 |
| 2.1 引言 | 第33-34页 |
| 2.2 实验材料与设备 | 第34-35页 |
| 2.2.1 原料 | 第34页 |
| 2.2.2 实验材料 | 第34页 |
| 2.2.3 设备和仪器 | 第34-35页 |
| 2.2.4 实验细胞株 | 第35页 |
| 2.3 试验方法 | 第35-36页 |
| 2.3.1 三叶青不同极性提取物的制备 | 第35页 |
| 2.3.2 三叶青提取物体外化学抗氧化活性的测定 | 第35-36页 |
| 2.3.3 三叶青提取物抑制癌细胞增殖活性的测定 | 第36页 |
| 2.4 数据分析 | 第36-37页 |
| 2.5 结果与分析 | 第37-39页 |
| 2.5.1 三叶青提取物体外抗氧化活性 | 第37-38页 |
| 2.5.2 三叶青提取物体外抗增殖活性 | 第38-39页 |
| 2.6 讨论 | 第39页 |
| 2.7 本章小结 | 第39-40页 |
| 第3章 三叶青化学成分的结构表征及主要活性成分的定量测定 | 第40-70页 |
| 3.1 引言 | 第40-41页 |
| 3.2 材料与设备 | 第41-42页 |
| 3.2.1 原料 | 第41页 |
| 3.2.2 试验材料 | 第41页 |
| 3.2.3 设备和仪器 | 第41-42页 |
| 3.3 方法 | 第42-44页 |
| 3.3.1 三叶青提取物的制备 | 第42页 |
| 3.3.2 三叶青提取物总酚和总黄酮含量的测定 | 第42页 |
| 3.3.3 三叶青提取物的UPLC-ESI-QTOF-MS2定性分析 | 第42-43页 |
| 3.3.4 三叶青酚类成分的UPLC-ESI-Qq Q-MS2定量分析 | 第43-44页 |
| 3.4 数据分析 | 第44页 |
| 3.5 结果与分析 | 第44-68页 |
| 3.5.1 三叶青提取物总酚和总黄酮含量 | 第44-45页 |
| 3.5.2 三叶青化学成分的结构表征 | 第45-67页 |
| 3.5.3 三叶青提取物主要活性成分的定量测定 | 第67-68页 |
| 3.6 讨论 | 第68-69页 |
| 3.7 本章小结 | 第69-70页 |
| 第4章 三叶青提取物在模拟体外消化和肠道菌群发酵过程中的变化 | 第70-85页 |
| 4.1 引言 | 第70页 |
| 4.2 材料与设备 | 第70-72页 |
| 4.2.1 原料 | 第70页 |
| 4.2.2 实验材料 | 第70-71页 |
| 4.2.3 设备和仪器 | 第71-72页 |
| 4.3 方法 | 第72-74页 |
| 4.3.1 三叶青叶片和块根提取物的制备 | 第72页 |
| 4.3.2 体外模拟口腔、胃和肠消化过程 | 第72页 |
| 4.3.3 体外肠道微生物发酵过程 | 第72-73页 |
| 4.3.4 三叶青叶片和块根总酚和总黄酮含量的测定 | 第73页 |
| 4.3.5 三叶青酚类成分在消化过程中代谢产物的定性分析 | 第73-74页 |
| 4.3.6 三叶青酚类成分在消化过程中代谢产物的定量分析 | 第74页 |
| 4.4 数据分析 | 第74-75页 |
| 4.5 结果与分析 | 第75-84页 |
| 4.5.1 体外模拟消化和肠道微生物发酵对三叶青叶片提取物的影响 | 第75-80页 |
| 4.5.2 体外模拟消化和肠道微生物发酵对三叶青块根提取物的影响 | 第80-84页 |
| 4.6 讨论 | 第84页 |
| 4.7 本章小结 | 第84-85页 |
| 第5章 三叶青提取物经SD大鼠灌胃后的代谢产物的研究 | 第85-98页 |
| 5.1 引言 | 第85-86页 |
| 5.2 材料与设备 | 第86-87页 |
| 5.2.1 原料 | 第86页 |
| 5.2.2 试剂 | 第86页 |
| 5.2.3 设备和仪器 | 第86页 |
| 5.2.4 实验动物 | 第86-87页 |
| 5.3 方法 | 第87页 |
| 5.3.1 三叶青提取物的制备 | 第87页 |
| 5.3.2 大鼠的饲养 | 第87页 |
| 5.3.3 实验分组 | 第87页 |
| 5.3.4 血浆和尿液样品的制备 | 第87页 |
| 5.3.5 三叶青提取物经大鼠灌胃后代谢产物的测定 | 第87页 |
| 5.4 数据分析 | 第87-88页 |
| 5.5 结果与分析 | 第88-94页 |
| 5.5.1 三叶青叶片提取物经大鼠灌胃后的代谢产物 | 第88-91页 |
| 5.5.2 三叶青根部提取物经大鼠灌胃后的代谢产物 | 第91-94页 |
| 5.6 讨论 | 第94-97页 |
| 5.6.1 三叶青提取物经大鼠灌胃后被吸收的植物化学物 | 第94页 |
| 5.6.2 三叶青提取物在大鼠体内的代谢产物及其代谢通路 | 第94-97页 |
| 5.7 本章小结 | 第97-98页 |
| 第6章 三叶青提取物对D-半乳糖诱导大鼠氧化损伤的修复作用 | 第98-110页 |
| 6.1 引言 | 第98-99页 |
| 6.2 材料与设备 | 第99-100页 |
| 6.2.1 原料 | 第99页 |
| 6.2.2 试验材料 | 第99页 |
| 6.2.3 设备和仪器 | 第99-100页 |
| 6.2.4 试验动物 | 第100页 |
| 6.3 方法 | 第100-102页 |
| 6.3.1 三叶青提取物的制备 | 第100页 |
| 6.3.2 D-半乳糖诱导大鼠氧化损伤模型的建立 | 第100-101页 |
| 6.3.3 血清和组织样本的制备 | 第101页 |
| 6.3.4 T-AOC活性的测定 | 第101页 |
| 6.3.5 SOD活力的测定 | 第101页 |
| 6.3.6 GSH-PX活力的测定 | 第101页 |
| 6.3.7 GSH含量的测定 | 第101-102页 |
| 6.3.8 MDA含量的测定 | 第102页 |
| 6.4 数据分析 | 第102页 |
| 6.5 结果与分析 | 第102-108页 |
| 6.5.1 动物生长状态 | 第102-103页 |
| 6.5.2 各组大鼠血浆和组织中T-AOC水平比较 | 第103-104页 |
| 6.5.3 各组大鼠血浆和组织中SOD活力比较 | 第104-105页 |
| 6.5.4 各组大鼠血浆和组织中GSH-Px活力比较 | 第105-106页 |
| 6.5.5 各组大鼠血清、组织中GSH含量比较 | 第106-107页 |
| 6.5.6 各组大鼠血清、组织中MDA含量比较 | 第107-108页 |
| 6.6 讨论 | 第108-109页 |
| 6.6.1 D-半乳糖可诱导大鼠产生体内氧化损伤 | 第108页 |
| 6.6.2 三叶青叶和根提取物对D-半乳糖诱导大鼠抗氧化损伤的保护作用 | 第108-109页 |
| 6.7 本章小结 | 第109-110页 |
| 第7章 三叶青叶片酚类成分诱导肝癌细胞 Hep G2 凋亡的分子机制 | 第110-131页 |
| 7.1 引言 | 第110-111页 |
| 7.2 材料与设备 | 第111-112页 |
| 7.2.1 试验材料 | 第111页 |
| 7.2.2 设备和仪器 | 第111-112页 |
| 7.3 方法 | 第112-114页 |
| 7.3.1 三叶青叶片酚类的SPE纯化 | 第112页 |
| 7.3.2 三叶青叶片提取纯化物总酚、总黄酮的测定 | 第112页 |
| 7.3.3 三叶青叶片提取纯化物酚类的UPLC-ESI-QTOF-MS2定性分析 | 第112页 |
| 7.3.4 三叶青叶片提取纯化物酚类的UPLC-ESI-Qq Q-MS2定量分析 | 第112页 |
| 7.3.5 对Hep G2活性的影响（MTT检测） | 第112页 |
| 7.3.6 平板克隆形成实验 | 第112-113页 |
| 7.3.7 流式细胞术测Hep G2细胞凋亡率 | 第113页 |
| 7.3.8 DAPI染色观察Hep G2细胞的凋亡形态学变化 | 第113页 |
| 7.3.9 DCFH-DA染色检测细胞内活性氧水平 | 第113页 |
| 7.3.10 JC-1 染色检测线粒体膜电势 | 第113-114页 |
| 7.3.11 Western blot分析蛋白表达水平 | 第114页 |
| 7.4 数据分析 | 第114-115页 |
| 7.5 结果与分析 | 第115-128页 |
| 7.5.1 三叶青叶经SPE纯化后的酚类化合物的结构表征和定量分析 | 第115-119页 |
| 7.5.2 三叶青叶提取纯化物对Hep G2细胞生长的影响（MTT法） | 第119页 |
| 7.5.3 三叶青叶提取纯化物对Hep G2克隆体形成的影响 | 第119-120页 |
| 7.5.4 三叶青叶提取纯化物对Hep G2凋亡的影响（流式细胞仪法） | 第120-121页 |
| 7.5.5 三叶青叶提取纯化物对 Hep G2 细胞形态学的影响 | 第121-122页 |
| 7.5.6 三叶青叶提取纯化物对Hep G2细胞内活性氧的影响 | 第122-123页 |
| 7.5.7 三叶青叶提取纯化物对Hep G2细胞内线粒体膜电势的影响 | 第123-124页 |
| 7.5.8 三叶青叶酚类对Hep G2细胞的死亡受体通路相关蛋白的影响 | 第124-125页 |
| 7.5.9 三叶青叶酚类对Hep G2细胞的线粒体通路相关蛋白影响 | 第125-127页 |
| 7.5.10 三叶青叶酚类对Hep G2细胞MAPK通路相关蛋白的影响 | 第127-128页 |
| 7.6 讨论 | 第128-130页 |
| 7.6.1 三叶青叶提取纯化物的定性定量分析 | 第128页 |
| 7.6.2 三叶青叶提取纯化物可抑制Hep G2细胞生长和诱导其凋亡 | 第128页 |
| 7.6.3 三叶青叶提取纯化物诱导Hep G2细胞凋亡的分子机制 | 第128-130页 |
| 7.7 本章小结 | 第130-131页 |
| 第8章 三叶青酚类成分对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及其机制的研究 | 第131-163页 |
| 8.1 引言 | 第131页 |
| 8.2 材料与设备 | 第131-133页 |
| 8.2.1 原料 | 第131-132页 |
| 8.2.2 试验材料 | 第132页 |
| 8.2.3 设备和仪器 | 第132-133页 |
| 8.2.4 实验动物 | 第133页 |
| 8.3 方法 | 第133-138页 |
| 8.3.1 三叶青根部酚类成分的SPE纯化 | 第133页 |
| 8.3.2 三叶青根部提取物经纯化后总酚、总黄酮的测定 | 第133页 |
| 8.3.3 三叶青根部酚类的UPLC-ESI-QTOF-MS2定性分析 | 第133页 |
| 8.3.4 三叶青根部酚类的UPLC-ESI-Qq Q-MS2定量分析 | 第133页 |
| 8.3.5 荷瘤小鼠模型的建立 | 第133-135页 |
| 8.3.6 急性毒性实验 | 第135页 |
| 8.3.7 体内肿瘤抑制实验 | 第135-137页 |
| 8.3.8 三叶青提取物对荷瘤小鼠免疫功能影响的实验 | 第137-138页 |
| 8.3.9 对荷瘤小鼠抗氧化作用 | 第138页 |
| 8.4 数据分析 | 第138页 |
| 8.5 结果与分析 | 第138-157页 |
| 8.5.1 三叶青根经SPE纯化后的酚类化合物的结构表征和定量分析 | 第138-143页 |
| 8.5.2 三叶青酚类提取物对昆明小鼠的急性毒性作用 | 第143页 |
| 8.5.3 三叶青酚类提取物对H22荷瘤小鼠的体内肿瘤抑制作用及其机制 | 第143-149页 |
| 8.5.4 三叶青提取物对H22荷瘤小鼠的免疫功能的影响 | 第149-155页 |
| 8.5.5 三叶青提取物对H22荷瘤小鼠的体内抗氧化活性的影响 | 第155-157页 |
| 8.6 讨论 | 第157-162页 |
| 8.6.1 三叶青酚类成分的体内抗肿瘤作用及其机制 | 第157-160页 |
| 8.6.2 三叶青酚类提取物改善荷瘤小鼠的免疫系统 | 第160-161页 |
| 8.6.3 三叶青酚类提取物提高荷瘤小鼠的体内抗氧化活性 | 第161-162页 |
| 8.7 本章小结 | 第162-163页 |
| 第9章 结论与展望 | 第163-166页 |
| 9.1 结论 | 第163-165页 |
| 9.1.1 三叶青提取物具有体外抗氧化和抗增殖活性 | 第163页 |
| 9.1.2 三叶青根和叶的酚类化合物为其主要活性成分 | 第163页 |
| 9.1.3 三叶青根和叶酚类成分在体外模拟胃肠道消化过程中降解 | 第163-164页 |
| 9.1.4 三叶青根和叶的酚类成分能够被大鼠吸收和代谢 | 第164页 |
| 9.1.5 三叶青提取物能够提高氧化衰老大鼠的体内抗氧化水平 | 第164页 |
| 9.1.6 三叶青叶酚类能够通过外源性和内源性的通路诱导癌细胞凋亡 | 第164页 |
| 9.1.7 三叶青酚类抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长 | 第164-165页 |
| 9.2 进一步工作的方向 | 第165-166页 |
| 致谢 | 第166-167页 |
| 参考文献 | 第167-175页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第175-178页 |
