论文目录 | |
| 致谢 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩写词表 | 第10-16页 |
| 第一部分 溶瘤痘苗病毒对人肝癌细胞的抑制作用及机制研究 | 第16-81页 |
| 引言 | 第16-22页 |
| 第1章 溶瘤痘苗病毒VV-Onco对肝癌细胞的体外杀伤效果 | 第22-32页 |
| 1.1 材料与方法 | 第22-28页 |
| 1.1.1 主要仪器、试剂及实验材料 | 第22-24页 |
| 1.1.2 主要溶液及培养基的配置 | 第24页 |
| 1.1.3 细胞的复苏、冻存与传代培养 | 第24-25页 |
| 1.1.4 病毒的扩增与滴度测定 | 第25-27页 |
| 1.1.5 溶瘤腺病毒ZD55和溶瘤痘苗病毒VV-Onco对肝癌细胞杀伤效果 | 第27页 |
| 1.1.6 肝癌细胞对溶瘤痘苗病毒VV-Onco复制能力的影响 | 第27-28页 |
| 1.2 实验结果 | 第28-32页 |
| 1.2.1 溶瘤腺病毒ZD55和溶瘤痘苗病毒VV-Onco对肝癌细胞Hep3B的杀伤效果比较 | 第28-29页 |
| 1.2.2 溶瘤腺病毒ZD55和溶瘤痘苗病毒VV-Onco对肝癌细胞MHCC97-H的杀伤效果比较 | 第29-30页 |
| 1.2.3 溶瘤痘苗病毒VV-Onco对三种肝癌细胞的杀伤效果 | 第30-31页 |
| 1.2.4 肝癌细胞对溶瘤痘苗病毒VV-Onco复制能力的影响 | 第31-32页 |
| 第2章 溶瘤痘苗病毒VV-Onco对肝癌细胞的克隆形成能力及凋亡的影响 | 第32-40页 |
| 2.1 材料与方法 | 第32-35页 |
| 2.1.1 主要仪器、试剂及实验材料 | 第32页 |
| 2.1.2 主要溶液及培养基的配置 | 第32-33页 |
| 2.1.3 溶瘤腺病毒ZD55和溶瘤痘苗病毒VV-Onco对肝癌细胞克隆能力的影响 | 第33页 |
| 2.1.4 Hochest33342染色法检测溶瘤腺病毒ZD55和溶瘤痘苗病毒VV-Oncco对肝癌细胞凋亡的影响 | 第33页 |
| 2.1.5 FITC-Annexin V/PI凋亡试剂盒检测溶瘤痘苗病毒对肝癌细胞凋亡的影响 | 第33-35页 |
| 2.2 实验结果 | 第35-40页 |
| 2.2.1 溶瘤腺病毒ZD55和溶瘤痘苗病毒VV-Onco对肝癌细胞细胞克隆能力的影响 | 第35-37页 |
| 2.2.2 Hochest33342染色法检测溶瘤腺病毒ZD55和溶瘤痘苗病毒VV-Onco对肝癌细胞凋亡的影响 | 第37-40页 |
| 第3章 溶瘤痘苗病毒VV-Onco对肝癌细胞信号通路的影响 | 第40-53页 |
| 3.1 材料与方法 | 第40-48页 |
| 3.1.1 主要仪器、试剂及实验材料 | 第40-41页 |
| 3.1.2 主要溶液的配置 | 第41-42页 |
| 3.1.3 Western blot方法检测溶瘤痘苗病毒VV-Onco对肝癌细胞信号通路的影响 | 第42-48页 |
| 3.2 实验结果 | 第48-53页 |
| 3.2.1 溶瘤痘苗病毒VV-Onco对Caspase家族蛋白及PARP的影响 | 第48-49页 |
| 3.2.2 溶瘤痘苗病毒VV-Onco对内质网压力相关信号通路的影响 | 第49-50页 |
| 3.2.3 溶瘤痘苗病毒VV-Onco对自噬相关信号通路的影响 | 第50-51页 |
| 3.2.4 溶瘤痘苗病毒VV-Onco对Wnt等信号通路的影响 | 第51-53页 |
| 第4章 溶瘤痘苗病毒VV-Onco对肝癌细胞自噬的影响 | 第53-58页 |
| 4.1 材料与方法 | 第53-54页 |
| 4.1.1 主要仪器、试剂及实验材料 | 第53页 |
| 4.1.2 主要溶液及培养基的配置 | 第53页 |
| 4.1.3 利用自噬双标腺病毒指示体系检测自噬 | 第53-54页 |
| 4.1.4 吖啶橙染色检测细胞嗜酸性小体 | 第54页 |
| 4.2 实验结果 | 第54-58页 |
| 4.2.1 利用自噬双标腺病毒指示体系检测自噬 | 第54-55页 |
| 4.2.2 吖啶橙染色检测细胞嗜酸性小体 | 第55-58页 |
| 第5章 溶瘤痘苗病毒W-Onco对荷瘤小鼠体内抗肿瘤效果评价 | 第58-64页 |
| 5.1 材料与方法 | 第58-61页 |
| 5.1.1 主要仪器、试剂及实验材料 | 第58页 |
| 5.1.2 主要溶液及培养基的配置 | 第58-59页 |
| 5.1.3 痘苗病毒的纯化 | 第59-60页 |
| 5.1.4 痘苗病毒的滴度测定 | 第60页 |
| 5.1.5 溶瘤痘苗病毒VV-Onco对肝癌细胞的体内抗肿瘤效果测定 | 第60-61页 |
| 5.2 实验结果 | 第61-64页 |
| 5.2.1 痘苗病毒VV-Onco对荷瘤裸鼠体内肿瘤抑制效果 | 第61-62页 |
| 5.2.2 小动物活体成像技术分析痘苗病毒VV-Onco对荷瘤裸鼠的肿瘤抑制效果 | 第62-64页 |
| 第6章 溶瘤痘苗病毒VV-Onco对慢性粒细胞白血病细胞株K562及其阿霉素耐药细胞株K562/ADR和伊马替尼耐药细胞株K562/G的杀伤效果 | 第64-69页 |
| 6.0 前言 | 第64页 |
| 6.1 材料与方法 | 第64-66页 |
| 6.1.1 主要仪器、试剂及实验材料 | 第64-65页 |
| 6.1.2 主要溶液及培养基的配置 | 第65页 |
| 6.1.3 细胞的复苏、冻存与传代培养 | 第65页 |
| 6.1.4 病毒的扩增与滴度测定 | 第65页 |
| 6.1.5 溶瘤痘苗病毒VV-Onco对三种慢性粒细胞白血病细胞杀伤效果 | 第65-66页 |
| 6.2 实验结果 | 第66-69页 |
| 讨论 | 第69-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 第二部分 组蛋白去乙酰化酶抑制剂NaBu和LBH589对慢性粒细胞白血病细胞株K562及其阿霉素耐药细胞株K562/ADR的作用和机制研究 | 第81-104页 |
| 引言 | 第81-83页 |
| 第1章 组蛋白去乙酰化酶抑制剂NaBu和LBH589对K562和K562/ADR的杀伤效果 | 第83-87页 |
| 1.1 材料与方法 | 第83-84页 |
| 1.1.1 主要仪器、试剂及实验材料 | 第83页 |
| 1.1.2 主要溶液及培养基的配置 | 第83-84页 |
| 1.1.3 细胞的复苏、冻存与传代培养 | 第84页 |
| 1.1.4 组蛋白去乙酰化酶抑制剂NaBu和LBH589对K562和K562/ADR的杀伤效果 | 第84页 |
| 1.2 实验结果 | 第84-87页 |
| 第2章 组蛋白去乙酰化酶抑制剂NaBu和LBH589对K562、K562/ADR的细胞周期和凋亡的影响 | 第87-91页 |
| 2.1 材料与方法 | 第87-88页 |
| 2.1.1 主要仪器、试剂及实验材料 | 第87页 |
| 2.1.2 主要溶液及培养基的配置 | 第87页 |
| 2.1.3 组蛋白去乙酰化酶抑制剂NaBu和LBH589对K562、K562/ADR的细胞周期的影响 | 第87-88页 |
| 2.1.4 FITC-AnnexinVPI凋亡试剂盒检测组蛋白去乙酰化酶抑制剂NaBu和LBH589对K562、K562/ADR的凋亡的影响 | 第88页 |
| 2.2 实验结果 | 第88-91页 |
| 2.2.1 组蛋白去乙酰化酶抑制剂NaBu和LBH589对K562和K562/ADR细胞周期的影响 | 第88-89页 |
| 2.2.2 组蛋白去乙酰化酶抑制剂NaBu和LBH589对K562、K562/ADR细胞的凋亡的影响 | 第89-91页 |
| 第3章 组蛋白去乙酰化酶抑制剂NaBu和LBH589对K562和K562/ADR细胞信号通路的影响 | 第91-97页 |
| 3.1 材料与方法 | 第91页 |
| 3.1.1 主要仪器、试剂及实验材料 | 第91页 |
| 3.1.2 主要溶液的配置 | 第91页 |
| 3.1.3 Western blot方法检测组蛋白去乙酰化酶抑制剂NaBu和LBH589对K562、K562/ADR的信号通路影响 | 第91页 |
| 3.2 实验结果 | 第91-97页 |
| 3.2.1 NaBu和LBH589对K562和K562/ADR细胞caspase家族蛋白和PARP表达的影响 | 第91-92页 |
| 3.2.2 NaBu和LBH589对K562和K562/ADR细胞Bcl-2家族蛋白表达的影响 | 第92-93页 |
| 3.2.3 NaBu和LBH589对K562和K562/ADR细胞耐药相关蛋白表达的影响 | 第93-95页 |
| 3.2.4 NaBu和LBH589对K562和K562/ADR细胞Akt-mTOR信号通路的影响 | 第95-97页 |
| 讨论 | 第97-100页 |
| 参考文献 | 第100-104页 |
| 综述 | 第104-121页 |
| 参考文献 | 第115-121页 |
| 作者简历与攻读学位期间取得的科研成果 | 第121-122页 |
