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CCT3基因调控胃癌细胞增殖及机制研究

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CCT3基因调控胃癌细胞增殖及机制研究
论文目录
 
中文摘要第1-5页
Abstract第5-11页
缩略语表第11-13页
第一章 前言第13-16页
第二章 CCT3在胃癌组织和胃癌细胞株中的表达第16-28页
  2.1 实验材料第16-17页
    2.1.1 实验试剂第16-17页
    2.1.2 实验器材第17页
    2.1.3 组织标本第17页
    2.1.4 细胞株第17页
    2.1.5 主要工作液配制第17页
  2.2 实验方法第17-21页
    2.2.1 临床组织病理切片的制备第17-18页
    2.2.2 组织标本免疫组化染色第18页
    2.2.3 细胞培养第18-19页
    2.2.4 胃癌细胞株及人胃粘膜上皮细胞株中CCT3基因qRT-PCR检测第19-20页
    2.2.5 统计学方法第20-21页
  2.3 结果第21-23页
    2.3.1 CCT3基因在TCGA数据库表达分析第21页
    2.3.2 胃癌组织中CCT3蛋白的表达高于癌旁组织第21-22页
    2.3.3 胃癌细胞株及人胃粘膜上皮细胞株中CCT3基因的表达第22-23页
  2.4 讨论第23-28页
第三章 靶向沉默CCT3基因对胃癌细胞功能的影响第28-49页
  3.1 实验材料第28-32页
    3.1.1 实验质粒第28页
    3.1.2 实验菌株TOP10第28页
    3.1.3 细胞株第28-29页
    3.1.4 实验试剂第29-30页
    3.1.5 实验器材第30-31页
    3.1.6 主要工作液配制第31-32页
  3.2 实验方法第32-37页
    3.2.1 总体实验流程第32页
    3.2.2 细胞培养第32页
    3.2.3 CCT3基因RNAi慢病毒载体制备第32-33页
    3.2.4 CCT3基因RNAi慢病毒包装第33-34页
    3.2.5 CCT3基因RNAi慢病毒感染胃癌细胞株第34-35页
    3.2.6 qRT-PCR检测CCT3基因mRNA水平的沉默效率第35页
    3.2.7 Western blot检测CCT3基因蛋白水平的沉默效率第35页
    3.2.8 Cellomics细胞计数检测第35-36页
    3.2.9 MTT细胞活力检测第36页
    3.2.10 克隆形成检测第36页
    3.2.11 细胞凋亡检测第36-37页
    3.2.12 统计学方法第37页
  3.3 结果第37-44页
    3.3.1 慢病毒感染效率第37页
    3.3.2 CCT3-shRNA-LV感染后沉默CCT3基因第37-40页
    3.3.3 RNAi沉默CCT3基因对胃癌细胞增殖的影响第40-42页
    3.3.4 RNAi沉默CCT3基因对胃癌细胞活性的影响第42-43页
    3.3.5 RNAi沉默CCT3基因对胃癌细胞克隆的影响第43-44页
    3.3.6 RNAi沉默CCT3基因对胃癌细胞凋亡的影响第44页
  3.4 讨论第44-49页
第四章 CCT3基因沉默后对胃癌细胞裸鼠成瘤的影响第49-64页
  4.1 实验材料第49-50页
    4.1.1 试剂第49页
    4.1.2 实验器材第49页
    4.1.3 细胞株第49页
    4.1.4 实验动物第49-50页
  4.2 实验方法第50-51页
    4.2.1 实验流程第50页
    4.2.2 细胞培养第50页
    4.2.3 CCT3基因RNAi慢病毒感染胃癌BGC-823 细胞第50页
    4.2.4 皮下接种第50-51页
    4.2.5 检测成瘤情况第51页
    4.2.6 统计学方法第51页
  4.3 结果第51-61页
    4.3.1 慢病毒感染BGC-823 细胞的效率第51-53页
    4.3.2 沉默CCT3后对裸鼠成瘤的影响第53-58页
    4.3.3 活体小动物成像第58-61页
  4.4 讨论第61-64页
第五章 CCT3基因对胃癌发生发展影响的机制探索第64-88页
  5.1 实验材料第64-65页
    5.1.1 芯片信息第64页
    5.1.2 实验器材第64-65页
    5.1.3 实验试剂第65页
    5.1.4 细胞株第65页
    5.1.5 实验主要工作液配制第65页
  5.2 实验方法第65-68页
    5.2.1 实验流程第65-66页
    5.2.2 样品细胞总RNA抽提和质检第66页
    5.2.3 IVT反应获得片段化aRNA第66页
    5.2.4 芯片杂交洗染、扫描第66-67页
    5.2.5 差异表达基因qRT-PCR和Western blot检测验证第67页
    5.2.6 PathScan? Antibody Array检测第67-68页
    5.2.7 统计学方法第68页
  5.3 结果第68-81页
    5.3.1 RNA质检结果第68-69页
    5.3.2 芯片数据质控第69-72页
    5.3.3 Affymetrix芯片数据结果第72-74页
    5.3.4 生物信息分析第74-77页
    5.3.5 差异表达基因qRT-PCR和Western blot检测验证结果第77-80页
    5.3.6 PathScan? Antibody Array检测结果第80-81页
  5.4 讨论第81-88页
第六章 结论第88-89页
参考文献第89-96页
综述一 CCT3与肿瘤的关系及研究现状第96-108页
参考文献第104-108页
综述二 肿瘤微环境与免疫第108-131页
参考文献第122-131页
在学期间的研究成果第131-132页
附件第132-134页
致谢第134页

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