论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-15页 |
| ABSTRACT | 第15-25页 |
| 符号说明 | 第25-27页 |
| 第一章 前言 | 第27-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-76页 |
| 第一部分 MEF2D对DYRK1A的转录调控 | 第30-68页 |
| 2.1 实验材料及试剂 | 第30-37页 |
| 2.2 实验仪器 | 第37-39页 |
| 2.3 质粒的构建 | 第39-48页 |
| 2.4 细胞培养 | 第48-49页 |
| 2.5 细胞转染 | 第49-50页 |
| 2.6 双荧光素酶报告基因系统 | 第50页 |
| 2.7 RNA提取及RT-PCR | 第50-53页 |
| 2.8 蛋白电泳及蛋白印迹分析 | 第53-57页 |
| 2.9 凝胶迁移率实验 | 第57-60页 |
| 2.10 染色质免疫共沉淀 | 第60-66页 |
| 2.11 免疫共沉淀 | 第66-67页 |
| 2.12 核苷酸序列编号 | 第67页 |
| 2.13 数据分析 | 第67-68页 |
| 第二部分 DYRK1A对MEF2D的磷酸化修饰及功能影响 | 第68-76页 |
| 2.14 实验材料及试剂 | 第68-70页 |
| 2.15 主要实验仪器 | 第70页 |
| 2.16 表达载体的构建 | 第70-72页 |
| 2.17 Luciferase assay双荧光素酶报告基因检测 | 第72页 |
| 2.18 MS质谱寻找磷酸化位点 | 第72-74页 |
| 2.19 凝胶考马斯亮蓝染色及蛋白条带显色 | 第74-75页 |
| 2.20 NH_4Cl处理HEK293细胞 | 第75页 |
| 2.21 数据分析 | 第75-76页 |
| 第三章 实验结果 | 第76-97页 |
| 第一部分 MEF2D对DYRK1A的转录调控 | 第76-89页 |
| 3.1 MEF2D可以调节DYRK1A基因转录 | 第76-78页 |
| 3.2 MEF2D特异性激活DYRK1A isoform 5启动子 | 第78-81页 |
| 3.3 DYRK1A启动子区MEF2D结合位点的确定 | 第81-83页 |
| 3.4 DY-MRE的功能确认 | 第83-86页 |
| 3.5 在小鼠神经发育过程中MEF2D表达与DYRK1A表达呈正相关性 | 第86-87页 |
| 3.6 MEF2D通过调节DYRK1A的激酶活性来影响NFATc2蛋白表达 | 第87-89页 |
| 第二部分 DYRK1A对MEF2D的磷酸化修饰及功能影响 | 第89-97页 |
| 3.7 DYRK1A升高MEF2D的表达 | 第89-91页 |
| 3.8 质谱检测DYRK1A对MEF2D的磷酸化修饰 | 第91-93页 |
| 3.9 MEF2D的磷酸化导致其转录活性降低 | 第93-94页 |
| 3.10 MEF2D磷酸化对MEF2D降解的影响 | 第94-97页 |
| 第四章 讨论和结论 | 第97-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第102-103页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-110页 |
| ENGLISH ARTICLE Ⅰ | 第110-144页 |
| ENGLISH ARTICLE Ⅱ | 第144-180页 |
