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单核—巨噬细胞和中性粒细胞抗问号钩端螺旋体感染能力差异及机制研究

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单核—巨噬细胞和中性粒细胞抗问号钩端螺旋体感染能力差异及机制研究
论文目录
 
致谢第1-6页
中文摘要第6-8页
Abstract第8-11页
英文缩写词表第11-17页
第一章: 引言第17-27页
  1.1 钩端螺旋体第17-18页
  1.2 钩端螺旋体病第18-19页
  1.3 吞噬细胞及其主要杀菌机制第19-23页
    1.3.1 吞噬小体的成熟第20-21页
    1.3.2 吞噬细胞的抗菌特性第21-23页
  1.4 趋化因子对免疫细胞的趋化作用第23-24页
  1.5 血管内皮细胞粘附因子对免疫细胞的粘附第24-25页
  1.6 论文研究内容及目的第25-27页
    1.6.1 研究内容第25-26页
    1.6.2 研究目的第26-27页
第二章: 单核-巨噬细胞与中性粒细胞对钩体吞噬作用的差异第27-42页
  2.1 前言第27页
  2.2 材料与方法第27-38页
    2.2.1 主要仪器及试剂第27-29页
    2.2.2 菌株和细胞株来源及培养第29页
    2.2.3 实验动物第29页
    2.2.4 人外周血中性粒细胞分选第29-30页
    2.2.5 人外周血单核细胞分选第30-32页
    2.2.6 小鼠外周血中性粒细胞分选第32-33页
    2.2.7 小鼠外周血单核细胞分选第33-34页
    2.2.8 问号钩体感染细胞模型第34-35页
    2.2.9 不同吞噬细胞内钩端螺旋体的检测第35-36页
    2.2.10 透射电镜观察各吞噬细胞对钩体的吞噬作用第36-37页
    2.2.11 不同吞噬细胞胞内钩体数量检测第37页
    2.2.12 统计学分析第37-38页
  2.3 实验结果第38-41页
    2.3.1 不同吞噬细胞内钩体荧光强度比较第38-39页
    2.3.2 不同吞噬细胞吞噬钩体电镜实验结果第39-40页
    2.3.3 不同吞噬细胞吞噬钩体定量分析第40-41页
  2.4 讨论第41-42页
第三章: 单核-巨噬细胞与中性粒细胞对钩体杀灭作用的差异第42-51页
  3.1 前言第42页
  3.2 材料与方法第42-46页
    3.2.1 主要仪器及试剂第42-43页
    3.2.2 实验动物第43页
    3.2.3 问号钩体、细胞株第43页
    3.2.4 钩体死亡率标准曲线绘制第43-44页
    3.2.5 激光共聚焦显微镜法检测不同吞噬细胞内钩体活力第44页
    3.2.6 荧光分光光度法检测不同吞噬细胞内钩体死亡率第44-46页
    3.2.7 不同吞噬细胞内钩体的存活情况及生长情况分析第46页
    3.2.8 统计学分析第46页
  3.3 实验结果第46-50页
    3.3.1 不同吞噬细胞内钩体活力比较第46-47页
    3.3.2 不同吞噬细胞内钩死亡率比较第47-48页
    3.3.3 不同吞噬细胞内钩体生长情况比较第48-50页
  3.4 小结第50-51页
第四章: 不同吞噬细胞内溶酶体、ROS、NO、Ca~(2+)对杀灭钩体的作用及差异第51-74页
  4.1 前言第51-52页
  4.2 材料与方法第52-58页
    4.2.1 主要仪器及试剂第52-53页
    4.2.2 实验动物第53页
    4.2.3 问号钩体、细胞株第53页
    4.2.4 实验方法第53-57页
      4.2.4.1 激光共聚焦显微镜法检测不同吞噬细胞内钩体与溶酶体共定位第53-55页
      4.2.4.2 细胞活性氧ROS检测第55页
      4.2.4.3 不同吞噬细胞内ROS对钩体杀灭能力的影响第55页
      4.2.4.4 细胞内NO检测第55-56页
      4.2.4.5 不同吞噬细胞内NO对钩体杀灭能力的影响第56页
      4.2.4.6 细胞内游离钙离子浓度检测第56页
      4.2.4.7 不同吞噬细胞内Ca~(2+)对钩体杀灭能力的影响第56-57页
    4.2.5 统计学分析第57-58页
  4.3 实验结果第58-72页
    4.3.1 问号钩端螺旋体在不同吞噬细胞内与溶酶体共定位率第58-60页
    4.3.2 问号钩体感染前后不同吞噬细胞内活性氧ROS变化第60-62页
    4.3.3 ROS在不同吞噬细胞内对钩体杀灭能力的影响第62-64页
    4.3.4 问号钩体感染前后不同吞噬细胞内NO变化第64-66页
    4.3.5 NO在不同吞噬细胞内对钩体杀灭能力的影响第66-68页
    4.3.6 问号钩体感染前后不同吞噬细胞内Ca~(2+)浓度变化第68-70页
    4.3.7 Ca~(2+)浓度在不同吞噬细胞内对钩体杀灭能力的影响第70-72页
  4.4 小结第72-74页
第五章: 问号钩体感染动物模型中单核-巨噬细胞与中性粒细胞浸润比较第74-86页
  5.1 前言第74页
  5.2 材料与方法第74-78页
    5.2.1 主要仪器及试剂第74-75页
    5.2.2 实验动物及问号钩端螺旋体第75页
    5.2.3 问号钩体感染动物模型第75页
    5.2.4 小鼠肺、肝、肾组织样本收集第75页
    5.2.5 组织银染检测入侵钩体第75页
    5.2.6 HE染色第75-77页
    5.2.7 免疫组化第77-78页
    5.2.8 统计学分析第78页
  5.3 实验结果第78-84页
    5.3.1 感染动物肺、肝、肾组织中钩体检测第78-79页
    5.3.2 感染动物肺、肝、肾组织病理变化第79-80页
    5.3.3 感染动物肺、肝、肾组织中单核-巨噬细胞浸润检测第80-82页
    5.3.4 感染动物肺、肝、肾组织中中性粒细胞浸润检测第82-84页
  5.4 小结第84-86页
第六章: 问号钩体感染小鼠或钩体病人血清中趋化因子变化研究第86-94页
  6.1 引言第86页
  6.2 材料与方法第86-90页
    6.2.1 主要仪器及试剂第86-87页
    6.2.2 实验动物及问号钩端螺旋体第87页
    6.2.3 问号钩体感染动物模型第87页
    6.2.4 感染小鼠及钩体病病人血清样本收集第87-88页
    6.2.5 趋化因子抗体芯片检测第88-89页
    6.2.6 统计学分析第89-90页
  6.3 实验结果第90-93页
    6.3.1 感染钩体小鼠血清中趋化因子水平变化第90-91页
    6.3.2 钩体病人血清中趋化因子水平变化第91-93页
  6.4 小结第93-94页
第七章: 问号钩体感染小鼠后血管内皮细胞粘附因子表达水平变化研究第94-104页
  7.1 引言第94-95页
  7.2 材料与方法第95-98页
    7.2.1 主要仪器及试剂第95页
    7.2.2 实验动物及问号钩端螺旋体第95-96页
    7.2.3 问号钩体感染动物模型第96页
    7.2.4 小鼠肺、肝、肾组织样本收集第96页
    7.2.5 免疫组化检测VCAM-1、E-selectin、P-selectin和ICAM-1表达变化第96-98页
    7.2.6 统计学分析第98页
  7.3 实验结果第98-102页
    7.3.1 钩体感染小鼠后肺、肝、肾组织中VCAM-1水平变化第98-99页
    7.3.2 钩体感染小鼠后肺、肝、肾组织中E-selectin、P-selectin水平变化第99-101页
    7.3.3 钩体感染小鼠后肺、肝、肾组织中ICAM-1水平变化第101-102页
  7.4 小结第102-104页
第八章: 结果与讨论第104-107页
参考文献第107-118页
综述第118-128页
参考文献第125-128页
附录第128-129页
作者简历与攻读学位期间取得的研究成果第129页

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