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结直肠癌中LRG1基因的表达及其调控血管生成的作用和机制研究

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结直肠癌中LRG1基因的表达及其调控血管生成的作用和机制研究
论文目录
 
中文摘要第1-10页
Abstract第10-13页
前言第13-21页
第一章 LRG1与结直肠癌临床病理、生存预后及MVD的相关性分析第21-37页
1 病例与材料第21-22页
  1.1 临床病例收集第21-22页
  1.2 主要仪器第22页
  1.3 主要试剂第22页
2 实验方法第22-26页
  2.1 制作组织微阵列第22-24页
  2.2 免疫组织化学染色第24-25页
  2.3 统计学分析第25-26页
3 实验结果第26-34页
  3.1 病例资料第26页
  3.2 结直肠癌组织中LRG1表达定位及与临床病理参数的相关性分析第26-29页
  3.3 LRGl表达水平是Ⅲ期结直肠癌生存的独立预后因素第29-32页
  3.4 LRG1与CD34-MVD的相关性分析第32-34页
4 讨论第34-37页
第二章 LRG1影响结直肠癌血管生成的体外研究第37-59页
1 实验材料第37-39页
  1.1 主要仪器第37页
  1.2 主要试剂第37-38页
  1.3 细胞来源第38页
  1.4 质粒构建第38-39页
2 实验方法第39-44页
  2.1 细胞培养第39-40页
  2.2 LRG1敲降、过表达结直肠癌细胞系的建立第40页
  2.3 Western Blot验证第40-42页
  2.4 实时定量荧光PCR (Real-time PCR)第42-43页
  2.5 MMT(四甲基偶氮唑比色法)检测第43页
  2.6 Wound Healing划痕实验第43页
  2.7 侵袭和迁移实验第43-44页
  2.8 HUVECs成管实验第44页
  2.9 统计方法第44页
3 实验结果第44-55页
  3.1 Western Blot检测结直肠癌细胞系LRG1蛋白表达情况第44-45页
  3.2 LRG1过表达和敲降稳转细胞系的建立和检测第45-50页
  3.3 探索LRG1对结直肠癌细胞体外功能的影响第50-52页
  3.4 LRG1对结直肠癌细胞上清液诱导的HUVECs体外增殖能力的影响第52-55页
4 讨论第55-59页
第三章 LRG1影响结直肠癌血管生成的体内研究第59-67页
1 实验材料第59页
  1.1 主要仪器第59页
  1.2 主要试剂第59页
  1.3 细胞来源及培养第59页
2 实验方法第59-60页
  2.1 裸鼠准备第59页
  2.2 裸鼠皮下成瘤模型的建立第59-60页
  2.3 标本处理第60页
3 实验结果第60-64页
  3.1 LRG1基因敲降对裸鼠结直肠癌皮下成瘤的影响第60-61页
  3.2 LRG1对裸鼠皮下成瘤CD34、VEGFA表达的影响第61-64页
4 讨论第64-67页
第四章 LRG1促进结直肠癌血管生成机制的初步研究第67-79页
1 实验材料第67-68页
  1.1 主要仪器第67页
  1.2 主要试剂第67页
  1.3 细胞来源及培养第67-68页
2 实验方法第68-69页
  2.1 ELISA第68页
  2.2 细胞质、核蛋白分离提取实验第68-69页
  2.3 Western Blot第69页
  2.4 统计学第69页
3 实验结果第69-74页
  3.1 LRG1影响结直肠癌细胞表达和分泌VEGFA第69-71页
  3.2 LRG1通过PI3K/AKT和MEK/ERK通路调节VEGFA表达第71-73页
  3.3 抑制AKT和ERK通路可以逆转LRG1促血管生成作用第73-74页
4 讨论第74-79页
参考文献第79-91页
文献综述第91-99页
参考文献第95-99页
攻读学位期间发表文章情况第99-101页
致谢第101-102页

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