论文目录 | |
| 缩略语表 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| 英文摘要 | 第10-14页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 文献回顾 | 第15-51页 |
| 实验一 Src参与铅破坏BBB/BCB紧密连接的机制 | 第51-82页 |
| 1 材料 | 第51-60页 |
| 1.1 细胞系 | 第51页 |
| 1.2 试剂 | 第51-54页 |
| 1.3 主要仪器 | 第54-55页 |
| 1.4 主要试剂配置 | 第55-60页 |
| 2 方法 | 第60-69页 |
| 2.1 RBE4/ Z310细胞的培养 | 第60-61页 |
| 2.2 Western blot检测蛋白的表达水平 | 第61-63页 |
| 2.3 qRT-PCR检测GRP78的mRNA水平 | 第63-65页 |
| 2.4 siRNA转染 | 第65-66页 |
| 2.5 免疫细胞化学 | 第66-67页 |
| 2.6 免疫电镜 | 第67-68页 |
| 2.7 细胞膜表面蛋白的检测 | 第68-69页 |
| 2.8 统计学分析 | 第69页 |
| 3 结果 | 第69-79页 |
| 3.1 铅暴露对Src蛋白磷酸化的影响 | 第69-71页 |
| 3.2 Src磷酸化参与铅致TJPs水平的下调 | 第71-72页 |
| 3.3 铅暴露对GRP78表达的影响 | 第72-73页 |
| 3.4 GRP78参与铅激活Src磷酸化 | 第73-74页 |
| 3.5 Src磷酸化未调节GRP78的表达水平 | 第74-75页 |
| 3.6 铅暴露通过上调GRP78降低occludin | 第75-76页 |
| 3.7 铅引起GRP78分布的改变 | 第76页 |
| 3.8 铅引起GRP78亚细胞定位的改变 | 第76-77页 |
| 3.9 铅引起膜表面GRP78的表达 | 第77-78页 |
| 3.10 细胞膜表面GRP78可能与Src的激活无关 | 第78-79页 |
| 4 讨论 | 第79-82页 |
| 实验二 Cx43在BBB/BCB铅转运中的作用及Src对其表达的调控研究 | 第82-106页 |
| 1 材料 | 第82-85页 |
| 1.1 细胞系 | 第82页 |
| 1.2 试剂 | 第82-83页 |
| 1.3 主要仪器 | 第83-84页 |
| 1.4 主要试剂配置 | 第84-85页 |
| 2 方法 | 第85-92页 |
| 2.1 RBE4/Z310细胞的培养 | 第85页 |
| 2.2 AAS法检测细胞铅含量 | 第85页 |
| 2.3 免疫细胞化学鉴定Cx43的表达与分布 | 第85-86页 |
| 2.4 Western blot检测蛋白的表达水平 | 第86页 |
| 2.5 Cx43半孔道功能检测实验 | 第86-87页 |
| 2.6 细菌转化与质粒提取 | 第87页 |
| 2.7 DNA转染 | 第87页 |
| 2.8 qRT-PCR检测Cx43的mRNA水平 | 第87-89页 |
| 2.9 四环素调控Cx43可诱导表达细胞系的构建 | 第89-92页 |
| 2.10 统计学分析 | 第92页 |
| 3 结果 | 第92-103页 |
| 3.1 铅蓄积的时间-剂量效应 | 第92-93页 |
| 3.2 Cx43表达与分布 | 第93-94页 |
| 3.3 铅暴露引起Cx43表达的改变 | 第94-96页 |
| 3.4 Cx43半孔道的激活与细胞铅吸收呈正相关 | 第96-97页 |
| 3.5 Cx43半孔道可能具有铅转运的功能 | 第97-99页 |
| 3.6 iZCx43与铅吸收 | 第99-101页 |
| 3.7 Src磷酸化正向调控Cx43 | 第101-102页 |
| 3.8 Src磷酸化与铅吸收的关系 | 第102-103页 |
| 4 讨论 | 第103-106页 |
| 小结 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-129页 |
| 个人简历和研究成果 | 第129-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
