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肿瘤细胞来源的exosome在肝癌免疫治疗中的功能研究

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肿瘤细胞来源的exosome在肝癌免疫治疗中的功能研究
论文目录
 
中文摘要第1-6页
Abstract第6-12页
缩略语/符号说明第12-14页
前言第14-18页
研究现状、成果第14-16页
研究目的、方法第16-18页
一、肝癌小鼠原位模型的建立与优化第18-43页
  1.1 对象和方法第18-25页
    1.1.1 细胞系第18页
    1.1.2 实验小鼠第18-19页
    1.1.3 主要实验仪器第19页
    1.1.4 主要实验试剂第19-20页
    1.1.5 分析软件第20页
    1.1.6 细胞的培养、传代、计数第20-21页
    1.1.7 小鼠皮下瘤模型的建立第21-22页
    1.1.8 肝内细胞注射和脾内细胞注射建立肝癌原位模型第22页
    1.1.9 肝内组织移植建立肝癌原位模型第22-23页
    1.1.10 小鼠血清、外周血细胞和组织取材第23-24页
    1.1.11 HE、IHC组织染色第24页
    1.1.12 ELISA因子检测第24页
    1.1.13 小动物核磁第24-25页
  1.2 结果第25-39页
    1.2.1 Hepa1-6皮下瘤模型的建立第25-27页
    1.2.2 肿瘤细胞尾静脉注射建立原位肝癌模型第27-29页
    1.2.3 脾内注射肿瘤细胞建立肝癌原位模型第29-31页
    1.2.4 肝内注射肿瘤细胞建立肝癌原位模型第31-33页
    1.2.5 肝内组织移植建立肝癌原位模型第33-37页
    1.2.6 肝癌小鼠原位模型免疫微环境的检测第37-39页
  1.3 讨论第39-42页
    1.3.1 建立移植型肝癌小鼠模型的方法学第39-41页
    1.3.2 移植型肝癌小鼠原位模型的免疫微环境第41-42页
  1.4 小结第42-43页
二、TEX在肝癌免疫治疗中的功能研究第43-89页
  2.1 对象和方法第44-59页
    2.1.1 细胞系第44页
    2.1.2 实验试剂配制第44-46页
    2.1.3 主要实验仪器耗材第46-47页
    2.1.4 主要实验试剂第47-49页
    2.1.5 exosome的提取第49-50页
    2.1.6 exosme的电镜鉴定第50页
    2.1.7 PKH67标记exosome第50-51页
    2.1.8 早期核内体、晚期核内体、溶酶体和细胞核的标记第51页
    2.1.9 DC细胞表面因子检测第51页
    2.1.10 脾细胞和淋巴结细胞的提取第51-52页
    2.1.11 exosome刺激DC2.4第52页
    2.1.12 CFSE染色第52页
    2.1.13 LDH实验第52-54页
    2.1.14 提取细胞蛋白第54页
    2.1.15 bradford法测蛋白浓度第54页
    2.1.16 western blot第54-55页
    2.1.17 小鼠肿瘤组织内部免疫细胞的分离第55-56页
    2.1.18 核蛋白FOXP3的染色第56页
    2.1.19 人外周血T细胞的分离和DC的诱导第56-57页
    2.1.20 DC的示踪第57页
    2.1.21 细胞裂解物抗原的制备第57页
    2.1.22 HE染色与免疫组化染色第57-59页
  2.2 结果第59-83页
    2.2.1 Hepa1-6来源exosome的表征第59-60页
    2.2.2 TEX的体外摄取第60-64页
    2.2.3 TEX的体外活化与功能研究第64-67页
    2.2.4 TEX与细胞裂解物的比较第67-68页
    2.2.5 TEX在小鼠皮下瘤模型抗肝癌免疫功能的测试第68-73页
    2.2.6 TEX在小鼠原位瘤模型抗肝癌免疫功能的测试第73-77页
    2.2.7 TEX体内作用机制的初步研究第77-79页
    2.2.8 TEX对人肝癌细胞免疫杀伤能力的研究第79-80页
    2.2.9 TEX对其他肿瘤交叉保护能力的研究第80-83页
  2.3 讨论第83-88页
    2.3.1 TEX是肝癌有效抗原载体第83-84页
    2.3.2 TEX有效活化DC进而促进T细胞增殖分化第84-85页
    2.3.3 TEX作为抗原抑制肿瘤生长,改善免疫环境第85-86页
    2.3.4 TEX的交叉保护第86页
    2.3.5 细胞系的选择第86-88页
  2.4 小结第88-89页
全文结论第89-90页
论文创新点第90-91页
参考文献第91-102页
发表论文和参加科研情况说明第102-103页
附录第103-104页
综述 Exosome与肿瘤免疫及树突状细胞系DC2.4的应用第104-124页
综述参考文献第114-124页
致谢第124-125页
个人简历第125页

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