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ZEB2在食管癌侵袭转移中的作用及其机制研究

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ZEB2在食管癌侵袭转移中的作用及其机制研究
论文目录
 
中文摘要第1-8页
Abstract第8-17页
缩略语/符号说明第17-20页
前言第20-22页
研究现状、成果第20-21页
研究目的、方法第21-22页
一、ZEB2、E-cadherin在食管癌组织和细胞株中的表达及意义第22-46页
  1.1 对象和方法第23-30页
    1.1.1 细胞株第23页
    1.1.2 食管癌组织石蜡标本及相应临床资料收集第23页
    1.1.3 随访资料第23页
    1.1.4 主要仪器设备第23-24页
    1.1.5 主要试剂第24-25页
    1.1.6 实验方法和步骤第25-30页
  1.2 结果第30-39页
    1.2.1 食管鳞癌组织中ZEB2和E-cadherin蛋白的表达第30-32页
    1.2.2 食管鳞癌组织中ZEB2和E-cadherin蛋白表达与患者临床病理特征的关系第32-33页
    1.2.3 食管鳞癌组织中ZEB2和E-cadherin蛋白的相关性第33页
    1.2.4 肿瘤周围食管组织中ZEB2和E-cadherin蛋白的相关性第33-34页
    1.2.5 ZEB2和E-cadherin表达水平与ESCC生存率的关系第34页
    1.2.6 Cox模型分析影响ESCC患者预后的因素第34-36页
    1.2.7 四组食管癌细胞RNA提取结果第36页
    1.2.8 Real-time PCR检测ZEB2 mNRA的表达第36-37页
    1.2.9 Real-time PCR检测Ecadherin mNRA的表达第37-38页
    1.2.10 Real-time PCR检测CRB3 mNRA的表达第38-39页
    1.2.11 Western blot检测ZEB2、Ecadherin、CRB3的表达第39页
  1.3 讨论第39-45页
    1.3.1 食管癌中EMT是肿瘤的侵袭和转移关键特征第39-40页
    1.3.2 ZEB2蛋白在食管癌组织中的表达第40-41页
    1.3.3 E-cadherin在食管癌组织中表达第41-43页
    1.3.4 ZEB2与E-cadherin在食管癌组织中相关性分析第43-44页
    1.3.5 ZEB2、E-cadherin和CRB3mRNA在人食管癌细胞株表达第44页
    1.3.6 ZEB2、E-cadherin和CRB3蛋白在人食管癌细胞株表达第44-45页
  1.4 小结第45-46页
二、ZEB2基因干扰对TGF-β1 诱导食管癌细胞的EMT及CRB3的影响第46-68页
  2.1 对象和方法第46-53页
    2.1.1 细胞系第46页
    2.1.2 试剂第46-47页
    2.1.3 主要仪器设备第47页
    2.1.4 主要试剂的配制第47-50页
    2.1.5 筛选ZEB2干扰效率高的siRNA片段第50-51页
    2.1.6 荧光定量PCR检测各组细胞ZEB表达第51页
    2.1.7 WB检测各组细胞中的蛋白表达水平第51-52页
    2.1.8 Transwell检测各组细胞的侵袭能力第52-53页
    2.1.9 划痕实验检测各组细胞的迁移能力第53页
    2.1.10 数据统计分析第53页
  2.2 结果第53-61页
    2.2.1 筛选细胞转染siRNA终浓度第53-54页
    2.2.2 荧光定量PCR检测各组细胞ZEB2mRNA表达水平第54-56页
    2.2.3 荧光定量PCR检测各组细胞CRB3mRNA、E-Cadherin mRNA及Vimentin m RNA表达水平第56-58页
    2.2.4 WB检测各组细胞中ZEB2、CRB3、E-Cadherin和Vimentin的蛋白表达水平第58-60页
    2.2.5 Transwell检测各组细胞的侵袭能力第60页
    2.2.6 划痕实验检测各组细胞的迁移能力第60-61页
  2.3 讨论第61-67页
    2.3.1 siRNA ZEB2构建第61-62页
    2.3.2 TGF-β1 对EMT的影响第62-63页
    2.3.3 干扰ZEB2对EMT相关蛋白的影响第63-65页
    2.3.4 干扰ZEB2对食管癌细胞侵袭迁移的影响第65-66页
    2.3.5 干扰ZEB2极性蛋白CRB3的影响第66-67页
  2.4 小结第67-68页
三、ZEB2过表达对TGF-β1 诱导食管癌细胞的EMT及CRB3的影响第68-82页
  3.1 对象和方法第68-73页
    3.1.1 细胞系第68-69页
    3.1.2 质粒第69页
    3.1.3 主要试剂及设备第69-70页
    3.1.4 实验方法及步骤第70-73页
  3.2 结果第73-79页
    3.2.1 pcDNA3.1(+)/ ZEB2质粒的构建第73-74页
    3.2.2 荧光定量PCR检测各组细胞ZEB2 m RNA表达水平第74页
    3.2.3 荧光定量PCR检测各组细胞CRB3mRNA及E-Cadherin mRNA表达水平第74-75页
    3.2.4 WB检测各组细胞中E-cadherin和Vimentin的蛋白表达水平第75-76页
    3.2.5 Transwell检测各组细胞的侵袭能力第76-77页
    3.2.6 划痕实验检测各组细胞的迁移能力第77-78页
    3.2.7 ZEB2过表达检测各组细胞的肺转移瘤能力第78-79页
  3.3 讨论第79-81页
    3.3.1 ZEB2过表达质粒构建第79-80页
    3.3.2 ZEB2过表达对EMT相关蛋白和CRB3表达影响第80页
    3.3.3 ZEB2过表达促进食管鳞癌细胞体内转移影响第80-81页
  3.4 小结第81-82页
全文结论第82-84页
论文创新点第84-85页
参考文献第85-93页
发表论文和参加科研情况说明第93-94页
附录第94-97页
综述 ZEB家族在肿瘤发生发展中调控研究进展第97-124页
综述参考文献第112-124页
致谢第124-125页
个人简历第125页

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