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线粒体钙单向转运体对神经母细胞瘤细胞自噬和线粒体自噬的作用
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线粒体钙单向转运体对神经母细胞瘤细胞自噬和线粒体自噬的作用
论文目录
摘要
第1-5页
Abstract
第5-10页
引言
第10-13页
实验材料
第13-16页
1.1 实验细胞
第13页
1.2 材料与试剂
第13-14页
1.3 实验仪器
第14页
1.4 主要实验试剂的配制
第14-16页
实验方法
第16-25页
2.1 神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)的培养
第16-18页
2.1.1 细胞复苏
第16页
2.1.2 细胞培养
第16页
2.1.3 细胞传代
第16-17页
2.1.4 细胞冻存
第17页
2.1.5 细胞计数
第17-18页
2.1.6 SH-SY5Y细胞培养过程中的注意事项
第18页
2.2 氧糖剥夺再灌注(OGD/RP)损伤模型的建立
第18页
2.3 实验分组
第18-19页
2.4 细胞活性检测(CCK-8 试剂盒法)
第19页
2.4.1 实验原理
第19页
2.4.2 实验步骤
第19页
2.5 线粒体膜电位(MMP)检测(JC-1 试剂盒法)
第19-20页
2.5.1 实验原理
第19-20页
2.5.2 实验步骤
第20页
2.6 透射电镜(TEM)检测细胞超显微结构
第20-21页
2.7 线粒体自噬相关蛋白P62、TOM20、BECLIN-1 的表达水平的检测
第21-24页
2.7.1 蛋白质提取
第21-22页
2.7.2 蛋白质浓度测定
第22页
2.7.3 蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)
第22-24页
2.8 统计学处理
第24-25页
实验结果
第25-32页
3.1 光镜下SH-SY5Y细胞形态学观察
第25-26页
3.2 细胞活性检测
第26-27页
3.3 电镜下各组细胞线粒体超微结构改变
第27-28页
3.4 线粒体膜电位(MMP)的检测
第28-29页
3.5 线粒体自噬相关蛋白的表达
第29-32页
讨论
第32-38页
结论
第38-39页
参考文献
第39-42页
综述
第42-69页
综述参考文献
第61-69页
攻读学位期间的研究成果
第69-70页
附录
第70-83页
致谢
第83-84页
本篇论文共
84
页,
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