论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 前言 | 第13-30页 |
| 第一章 稳定的人胚胎干细胞定向心肌分化方法的确定 | 第30-46页 |
| 1 材料和方法 | 第31-42页 |
| 1.1 主要仪器 | 第31-32页 |
| 1.2 主要试剂 | 第32-33页 |
| 1.3 实验方法 | 第33-42页 |
| 2 实验结果 | 第42-44页 |
| 2.1 hESC-H9细胞增殖过程中保持干性呈克隆团样生长 | 第42-43页 |
| 2.2 hESC-H9细胞分化为有自动节律性跳动的心肌细胞 | 第43-44页 |
| 3 小结 | 第44-46页 |
| 第二章 尼古丁对人胚胎干细胞定向心肌分化的抑制作用及其相关机制研究 | 第46-65页 |
| 1 材料和方法 | 第46-59页 |
| 1.1 主要仪器 | 第46-47页 |
| 1.2 主要试剂 | 第47-48页 |
| 1.3 实验方法 | 第48-59页 |
| 2 实验结果 | 第59-63页 |
| 2.1 尼古丁作用浓度的确定 | 第59-60页 |
| 2.2 尼古丁延长hESC心肌分化的时间,减少了自动节律性心肌细胞的数量 | 第60-61页 |
| 2.3 尼古丁降低了分化过程中中胚层特异性标志物Brachyury和Mesp1的表达 | 第61-62页 |
| 2.4 尼古丁降低了分化第14天心肌细胞特异性转录因子GATA4和Tbx5的mRNA表达水平 | 第62-63页 |
| 3 小结 | 第63-65页 |
| 第三章 尼古丁和BPA混合物对人胚胎干细胞定向心肌分化的影响及其机制研究 | 第65-92页 |
| 1 材料和方法 | 第65-80页 |
| 1.1 主要仪器 | 第65-66页 |
| 1.2 主要试剂 | 第66-67页 |
| 1.3 实验方法 | 第67-80页 |
| 2 实验结果 | 第80-90页 |
| 2.1 尼古丁和BPA (N+B)混合物以及不同浓度的BPA对hESC细胞增殖和细胞毒性的影响 | 第80-81页 |
| 2.2 N+B混合物作用心肌分化过程中不同时间点蛋白水平变化 | 第81-82页 |
| 2.3 在相同浓度干预分化过程中,N+B合用相对于单独使用尼古丁或者BPA,能更加延长整个hESC定向心肌分化的时间,减少自动节律性心肌细胞的数量 | 第82-84页 |
| 2.4 与尼古丁或BPA单独作用相比,N+B合用能降低分化第14天成熟心肌细胞标志物的mRNA表达水平 | 第84-85页 |
| 2.5 N+B混合物对hESC细胞干性的影响 | 第85-86页 |
| 2.6 N+B混合物对hESC细胞心肌分化过程中miRNAs表达的影响 | 第86-87页 |
| 2.7 高剂量的尼古丁和BPA (10 μM)处理分化过程对Lin28表达量的影响 | 第87-89页 |
| 2.8 高剂量的尼古丁和BPA(10μM)抑制分化的机制 | 第89-90页 |
| 3 小结 | 第90-92页 |
| 讨论 | 第92-96页 |
| 全文总结 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-112页 |
| 攻读博士学位期间的成果 | 第112-113页 |
| 附录 | 第113-115页 |
| 致谢 | 第115-117页 |
