论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| abstract | 第5-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-29页 |
| 1.1 心血管疾病的治疗现状 | 第13-14页 |
| 1.2 人工血管材料的分类 | 第14页 |
| 1.3 表面修饰提高血液相容性 | 第14-16页 |
| 1.4 表面靶向多肽功能化提高内皮化 | 第16-18页 |
| 1.4.1 RGD肽功能化人工血管材料 | 第16-17页 |
| 1.4.2 REDV肽功能化人工血管架材料 | 第17页 |
| 1.4.3 CAG肽功能化人工血管材料 | 第17-18页 |
| 1.5 基因治疗加速内皮化及血管化 | 第18-26页 |
| 1.5.1 加速内皮化及血管化的基因 | 第18-19页 |
| 1.5.2 基因载体的设计 | 第19-26页 |
| 1.5.2.1 基因载体的分类 | 第20-21页 |
| 1.5.2.2 靶向性肽功能化非病毒载体用于基因传递 | 第21-22页 |
| 1.5.2.3 内涵体/溶酶体逃逸功能化非病毒载体用于基因传递 | 第22-23页 |
| 1.5.2.4 核定位多肽功能化非病毒载体用于基因传递 | 第23-26页 |
| 1.6 本论文研究意义、研究方案及创新点 | 第26-29页 |
| 1.6.1 本论文选题的科学意义 | 第26页 |
| 1.6.2 本论文研究方案及技术路线 | 第26-28页 |
| 1.6.3 论文创新点 | 第28-29页 |
| 第二章 REDV肽修饰促进抗菌人工血管材料表面内皮细胞的特异性粘附与增殖 | 第29-57页 |
| 2.1 引言 | 第29-31页 |
| 2.2 实验部分 | 第31-37页 |
| 2.2.1 实验原料与仪器 | 第31-33页 |
| 2.2.1.1 实验原料和试剂 | 第31-32页 |
| 2.2.1.2 主要实验仪器 | 第32-33页 |
| 2.2.2 PCU人工血管支架材料的表面改性和功能化 | 第33-34页 |
| 2.2.2.1 ATRP法制备PCU-g-poly（HPMA-co-EgMA）表面 | 第33-34页 |
| 2.2.2.2 通过点击化学反应固定REDV肽 | 第34页 |
| 2.2.3 物理-化学性能测试与表征 | 第34-35页 |
| 2.2.3.1 表面化学成分的测定 | 第34页 |
| 2.2.3.2 REDV肽含量的测定 | 第34-35页 |
| 2.2.3.3 水接触角（WCA）的测量 | 第35页 |
| 2.2.3.4 吸水率（WU）测试 | 第35页 |
| 2.2.4 血小板粘附试验 | 第35-36页 |
| 2.2.5 细胞培养 | 第36页 |
| 2.2.6 HUVECs和HASMCs的共培养 | 第36-37页 |
| 2.2.7 表面抗菌试验 | 第37页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第37-56页 |
| 2.3.1 PCU膜的表面改性 | 第38-40页 |
| 2.3.2 改性修饰后PCU膜表面的亲水性测定 | 第40-42页 |
| 2.3.3 体外血液相容性实验 | 第42-44页 |
| 2.3.4 HUVECs和HASMCs在多肽功能化表面的生长 | 第44-50页 |
| 2.3.5 HUVECs和HASMCs共培养 | 第50-52页 |
| 2.3.6 改性后PCU膜的抗菌性能 | 第52-56页 |
| 2.4 结论 | 第56-57页 |
| 第三章 REDV肽功能化载基因纳米粒促进HUVECs的转染和迁移 | 第57-87页 |
| 3.1 前言 | 第57-60页 |
| 3.2 实验部分 | 第60-67页 |
| 3.2.1 实验原料与仪器 | 第60-62页 |
| 3.2.1.1 实验原料和试剂 | 第60-62页 |
| 3.2.1.2 主要实验仪器 | 第62页 |
| 3.2.2 REDV肽功能化纳米粒及纳米粒/pZNF580复合物的制备 | 第62-63页 |
| 3.2.2.1 REDV活性多肽及REVD无活性多肽修饰的纳米粒 | 第62-63页 |
| 3.2.2.2 纳米粒/pZNF580复合物的制备 | 第63页 |
| 3.2.3 纳米粒及纳米粒/pZNF580复合物的物理-化学性质 | 第63-64页 |
| 3.2.3.1 共聚物的表征 | 第63页 |
| 3.2.3.2 多肽含量的测定 | 第63页 |
| 3.2.3.3 纳米粒和载pZNF580复合物的流体力学直径和zeta电位 | 第63-64页 |
| 3.2.3.4 琼脂糖凝胶阻滞实验 | 第64页 |
| 3.2.4 纳米粒/pZNF580复合物对HUVECs的体外转染 | 第64页 |
| 3.2.5 蛋白提取和Western blot分析 | 第64-65页 |
| 3.2.6 实时定量PCR | 第65-66页 |
| 3.2.7 细胞摄取 | 第66页 |
| 3.2.8 纳米粒/pZNF580复合物的体外细胞毒性 | 第66页 |
| 3.2.9 细胞迁移检测 | 第66-67页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第67-86页 |
| 3.3.1 REDV-PEG-PEI-PLMD共聚物的表征 | 第68-70页 |
| 3.3.2 纳米粒和纳米粒/pZNF580复合物的特性 | 第70-72页 |
| 3.3.3 琼脂糖凝胶阻滞实验 | 第72-73页 |
| 3.3.4 HUVECs的体外转染 | 第73-76页 |
| 3.3.5 转染后HUVECs中ZNF580蛋白的Western blot检测 | 第76-78页 |
| 3.3.6 体外实时定量PCR检测 | 第78-79页 |
| 3.3.7 复合物的细胞摄取 | 第79-80页 |
| 3.3.8 体外细胞毒性实验 | 第80-82页 |
| 3.3.9 HUVECs细胞迁移实验 | 第82-86页 |
| 3.4 结论 | 第86-87页 |
| 第四章 CAG肽功能化载基因纳米粒促进内皮细胞的转染和血管化 | 第87-112页 |
| 4.1 引言 | 第87-89页 |
| 4.2 实验步骤 | 第89-94页 |
| 4.2.1 实验原料与仪器 | 第89-90页 |
| 4.2.1.1 实验原料和试剂 | 第89-90页 |
| 4.2.1.2 主要实验仪器 | 第90页 |
| 4.2.2 CAG肽功能化纳米粒及纳米粒/pZNF580复合物的制备 | 第90-91页 |
| 4.2.2.1 CAG肽功能化纳米粒的制备 | 第90-91页 |
| 4.2.2.2 纳米粒/pZNF580复合物的制备 | 第91页 |
| 4.2.3 纳米粒和纳米粒/pZNF580复合物的物理-化学性质表征 | 第91-92页 |
| 4.2.3.1 PEI-PLGA-PEI共聚物的表征 | 第91页 |
| 4.2.3.2 共聚物中CAG肽含量的测定 | 第91页 |
| 4.2.3.3 纳米粒和纳米粒/pZNF580复合物的流体力学直径与电位 | 第91-92页 |
| 4.2.3.4 琼脂糖凝胶电泳测试 | 第92页 |
| 4.2.4 纳米粒血液相容性测试 | 第92页 |
| 4.2.5 纳米粒/pZNF580复合物的细胞相容性测试 | 第92页 |
| 4.2.6 体外纳米粒/pZNF580复合物的转染 | 第92-93页 |
| 4.2.7 实时定量PCR测试 | 第93页 |
| 4.2.8 Cy5标记的纳米粒/pZNF580复合物的细胞摄取 | 第93页 |
| 4.2.9 体外血管形成实验 | 第93页 |
| 4.2.10 体内血管形成实验 | 第93-94页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第94-110页 |
| 4.3.1 CAG-PEG-PEI-PLGA共聚物的合成和表征 | 第95-98页 |
| 4.3.2 纳米粒及纳米粒/pZNF580复合物的流体力学直径和电位 | 第98-99页 |
| 4.3.3 琼脂糖凝胶电泳实验 | 第99-100页 |
| 4.3.4 纳米粒的血液相容性实验 | 第100-101页 |
| 4.3.5 纳米粒/pZNF580复合物的细胞相容性实验 | 第101-103页 |
| 4.3.6 体外转染HUVECs | 第103-104页 |
| 4.3.7 实时定量PCR测试 | 第104-105页 |
| 4.3.8 Cy5标记的纳米粒/pZNF580复合物的细胞摄取 | 第105-107页 |
| 4.3.9 体外血管形成实验 | 第107-108页 |
| 4.3.10 体内血管形成实验 | 第108-110页 |
| 4.4 结论 | 第110-112页 |
| 第五章 多重靶向修饰促进内皮细胞的转染 | 第112-130页 |
| 5.1 引言 | 第112-115页 |
| 5.2 实验步骤 | 第115-117页 |
| 5.2.1 实验原料与仪器 | 第115页 |
| 5.2.1.1 实验原料和试剂 | 第115页 |
| 5.2.1.2 主要实验仪器 | 第115页 |
| 5.2.2 靶向多肽功能化纳米粒的制备 | 第115-116页 |
| 5.2.3 TAT-NLS/DNA/TP-NP复合物的制备 | 第116页 |
| 5.2.4 TP-NP和TAT-NLS/DNA/TP-NP复合物的物化性能 | 第116页 |
| 5.2.4.1 共聚物结构的表征 | 第116页 |
| 5.2.4.2 TP-NP中多肽含量的测定 | 第116页 |
| 5.2.4.3 纳米粒及其载基因复合物的流体力学直径与电位 | 第116页 |
| 5.2.4.4 琼脂糖凝胶电泳测试 | 第116页 |
| 5.2.5 TAT-NLS/DNA/TP-NP复合物的细胞相容性测试 | 第116-117页 |
| 5.2.6 体外TAT-NLS/DNA/TP-NP复合物的转染 | 第117页 |
| 5.2.7 Cy5标记的载基因复合物的细胞摄取和细胞内分布 | 第117页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第117-128页 |
| 5.3.1 TP-PEG-PEI-PCLGA-PEI-PEG-TP共聚物的表征 | 第117-118页 |
| 5.3.2 TP-NP，DNA/TP-NP和TAT-NLS/DNA/TP-NP的粒径和电位 | 第118-121页 |
| 5.3.3 琼脂糖凝胶电泳实验 | 第121页 |
| 5.3.4 DNA/TP-NP和TAT-NLS/DNA/TP-NP复合物的细胞相容性实验 | 第121-123页 |
| 5.3.5 DNA/TP-NP和TAT-NLS/DNA/TP-NP复合物的体外转染 | 第123页 |
| 5.3.6 Cy5标记的载基因复合物的细胞摄取 | 第123-124页 |
| 5.3.7 Cy5标记的载基因复合物的细胞内分布 | 第124-128页 |
| 5.4 结论 | 第128-130页 |
| 第六章 结论与展望 | 第130-133页 |
| 6.1 研究总结 | 第130-131页 |
| 6.2 创新点 | 第131-132页 |
| 6.3 展望 | 第132-133页 |
| 参考文献 | 第133-146页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第146-149页 |
| 致谢 | 第149-150页 |
