论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-18页 |
| 中英文缩略词表 | 第18-20页 |
| 前言 | 第20-22页 |
| 第1章 LPS刺激NR8383细胞后炎症反应、miR-155 及自噬的变化 | 第22-51页 |
| 1.1 实验材料 | 第22-28页 |
| 1.1.1 材料 | 第22页 |
| 1.1.2 主要试剂、耗材 | 第22-24页 |
| 1.1.3 主要仪器、设备 | 第24-25页 |
| 1.1.4 主要试剂的配制 | 第25-28页 |
| 1.2 实验方法 | 第28-42页 |
| 1.2.1 NR8383细胞实验分组 | 第28页 |
| 1.2.2 细胞培养耗材的准备 | 第28-30页 |
| 1.2.3 NR8383细胞的培养、传代、冻存和复苏 | 第30-31页 |
| 1.2.4 NR8383细胞给予LPS刺激 | 第31-32页 |
| 1.2.5 ELISA检测细胞上清液中TNF-α、IL-1 | 第32-35页 |
| 1.2.6 Western Blot检测LCⅡ/Ⅰ、TAB2、Caspase-1 | 第35-37页 |
| 1.2.7 RT-qPCR检测miR-155 | 第37-42页 |
| 1.2.8 统计学分析 | 第42页 |
| 1.3 结果 | 第42-51页 |
| 1.3.1 LPS刺激后，NR8383细胞在光镜下的变化 | 第42-44页 |
| 1.3.2 LPS刺激后，NR8383细胞内TNF-α、IL-1 变化 | 第44-45页 |
| 1.3.3 LPS刺激后，NR8383细胞内miR-155 变化 | 第45-48页 |
| 1.3.4 LPS刺激后，NR8383细胞内LC3Ⅱ/Ⅰ变化 | 第48-49页 |
| 1.3.5 LPS刺激后，NR8383细胞内TAB2与Caspase-1 变化 | 第49-51页 |
| 第2章 调控miR-155 后，LPS诱导NR8383细胞内炎症反应、自噬及TAB2、Caspase-1 的变化 | 第51-80页 |
| 2.1 实验材料 | 第51-57页 |
| 2.1.1 材料 | 第51页 |
| 2.1.2 主要试剂、耗材 | 第51-52页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第52-53页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第53-57页 |
| 2.2 实验方法 | 第57-70页 |
| 2.2.1 NR8383细胞转染实验分组 | 第57页 |
| 2.2.2 NR8383细胞的接种 | 第57页 |
| 2.2.3 siRNA转染步骤 | 第57-58页 |
| 2.2.4 优化miR-155 mimics转染条件 | 第58-59页 |
| 2.2.5 20nM miR-155 mimics转染NR8383细胞 | 第59-60页 |
| 2.2.6 优化miR-155 inhibitor转染条件 | 第60-61页 |
| 2.2.7 100nM miR-155 inhibitor转染NR8383细胞 | 第61-62页 |
| 2.2.8 ELISA检测细胞上清液中TNF-α、IL-1 | 第62-63页 |
| 2.2.9. Western Blot检测LCⅡ/Ⅰ、TAB2、Caspase-1 | 第63-65页 |
| 2.2.10 RT-qPCR检测miR-155 | 第65-69页 |
| 2.2.11 统计学处理 | 第69-70页 |
| 2.3 结果 | 第70-80页 |
| 2.3.1 优化miR-155 mimics转染浓度 | 第70页 |
| 2.3.2 转入miR-155 mimics24h后，提取NR8383细胞总RNA，琼脂糖凝胶电泳结果 | 第70-71页 |
| 2.3.3 转入miR-155 mimics 24h后NR8383细胞内miR-155 上调236倍 | 第71-72页 |
| 2.3.4 正常组、LPS组、LPS+miR-155 mimics组TNF-α、IL-1 表达 | 第72页 |
| 2.3.5 正常组、LPS组、LPS+miR-155 mimics组LC3Ⅱ/Ⅰ、TAB2、Caspase-1表达 | 第72-75页 |
| 2.3.6 优化miR-155 inhibitor转染浓度 | 第75页 |
| 2.3.7 转入miR-155 inhibitor24h后, 提取NR8383细胞总RNA，琼脂糖凝胶电泳结果 | 第75-76页 |
| 2.3.8 转入miR-155 inhibitor24h后, NR8383细胞内miR-155 无变化 | 第76页 |
| 2.3.9 正常组、LPS组、LPS+miR-155 inhibitor组TNF-α、IL-1 表达 | 第76-77页 |
| 2.3.10 正常组、LPS组、LPS+miR-155 inhibitor组LC3Ⅱ/Ⅰ、TAB2、Caspase-1表达 | 第77-80页 |
| 第3章 导入大鼠体内的miR-155 对炎症反应、自噬的影响 | 第80-99页 |
| 3.1 实验材料 | 第80-86页 |
| 3.1.1 材料 | 第80页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第80-82页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第82-83页 |
| 3.1.4 器材准备及试剂配制 | 第83-86页 |
| 3.2 实验方法 | 第86-94页 |
| 3.2.1 SD大鼠ALI模型建立及实验分组 | 第86-87页 |
| 3.2.2 肺组织湿干重比测定 | 第87页 |
| 3.2.3 肺组织常规HE染色病理检查 | 第87-88页 |
| 3.2.4 透射电镜检测肺病理改变 | 第88页 |
| 3.2.5 检测肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1 的浓度 | 第88-89页 |
| 3.2.6 RT-qPCR检测BALF中肺泡巨噬细胞miR-155 的表达 | 第89-93页 |
| 3.2.7 统计学分析 | 第93-94页 |
| 3.3 结果 | 第94-99页 |
| 3.3.1 正常组、LPS组、LPS+miR-155 组大鼠BALF中肺泡巨噬细胞的miR-155 表达 | 第94-95页 |
| 3.3.2 正常组、LPS组、LPS+miR-155 组大鼠动脉血气分析 | 第95-96页 |
| 3.3.3 正常组、LPS组、LPS+miR-155 组肺外观与W/D | 第96-97页 |
| 3.3.4 正常组、LPS组、LPS+miR-155 组大鼠肺组织HE染色 | 第97页 |
| 3.3.5 正常组、LPS组、LPS+miR-155 组大鼠BALF中TNF-α、IL-1 | 第97-98页 |
| 3.3.6 正常组、LPS组、LPS+miR-155 组大鼠肺泡巨噬细胞电镜照片 | 第98-99页 |
| 第4章 讨论 | 第99-106页 |
| 4.1 LPS诱导NR8383细胞模型及大鼠脓毒症肺损伤模型 | 第99-100页 |
| 4.2 LPS刺激NR8383细胞后TNF-α、IL-1 的表达 | 第100页 |
| 4.3 上调自噬抑制肺巨噬细胞内的炎症反应 | 第100-102页 |
| 4.4 miR-155 通过TAB2蛋白调控自噬 | 第102-104页 |
| 4.5 上调自噬减轻大鼠脓毒症诱导急性肺损伤 | 第104-106页 |
| 第5章 结论与展望 | 第106-107页 |
| 5.1 结论 | 第106页 |
| 5.2 进一步工作的方向 | 第106-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-113页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第113-114页 |
| 综述 | 第114-127页 |
| 参考文献 | 第123-127页 |
