论文目录 | |
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-23页 |
| 中英文缩略词表 | 第23-25页 |
| 引言 | 第25-29页 |
| 第一部分 二氧化硅诱导循环纤维细胞转分化的体外研究 | 第29-64页 |
| 1 实验材料与方法 | 第31-45页 |
| 1.1 实验材料 | 第31-34页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第31页 |
| 1.1.2 主要实验试剂 | 第31-32页 |
| 1.1.3 主要试剂的配制 | 第32-34页 |
| 1.2 主要实验仪器 | 第34-35页 |
| 1.3 实验方法 | 第35-43页 |
| 1.3.1 大鼠外周血单个核细胞的提取与分离 | 第35页 |
| 1.3.2 免疫荧光双染法观察循环纤维细胞 | 第35-36页 |
| 1.3.3 流式细胞术检测循环纤维细胞比例 | 第36页 |
| 1.3.4 酶联免疫吸附试验 (ELISA) | 第36-37页 |
| 1.3.5 免疫组织化学染色检测α-SMA蛋白表达 | 第37-38页 |
| 1.3.6 SiO_2粉尘的电镜观察 | 第38页 |
| 1.3.7 大鼠肺泡AMs的提取与纯化 | 第38页 |
| 1.3.8 CCK8法检测SiO_2粉尘对AM和CF活性的影响 | 第38页 |
| 1.3.9 Transwell共培养模型的建立和SiO_2粉尘染毒 | 第38-39页 |
| 1.3.10 q RT-PCR法检测Collagen I、Collagen III、α-SMA mRNA表达 | 第39-42页 |
| 1.3.11 统计方法 | 第42-43页 |
| 1.4 本部分实验技术线路图 | 第43-45页 |
| 2 结果 | 第45-59页 |
| 2.1 原代培养CF的获取及鉴定 | 第45-47页 |
| 2.1.1 不同培养时段CF形态学观察 | 第45-46页 |
| 2.1.2 不同培养时段免疫荧光双染法观察CF | 第46页 |
| 2.1.3 不同培养时段CF的比例 | 第46-47页 |
| 2.2 CF转分化特性的观察 | 第47-49页 |
| 2.2.1 不同培养时段CF的Collagen I、Collagen III和α-SMA mRNA表达 | 第47-48页 |
| 2.2.2 不同培养时段CF的TGF-β1 蛋白分泌水平 | 第48-49页 |
| 2.2.3 纯化后培养至 20 d CF α-SMA蛋白表达 | 第49页 |
| 2.3 SiO_2粉尘暴露对CF转分化的观察 | 第49-59页 |
| 2.3.1 扫描电镜观察SiO_2粉尘 | 第49-50页 |
| 2.3.2 SiO_2粉尘暴露对CF和AM细胞活性的影响 | 第50-52页 |
| 2.3.3 SiO_2粉尘暴露对CF比例变化的影响 | 第52-53页 |
| 2.3.4 SiO_2粉尘暴露对CF Collagen I、Collagen III和α-SMA mRNA表达影响 | 第53-56页 |
| 2.3.5 SiO_2粉尘暴露对CF Collagen I、Collagen III和α-SMA蛋白表达的影响 | 第56-57页 |
| 2.3.6 SiO_2粉尘暴露对CF Collagen I、Collagen III及TGF-β1 蛋白分泌的影响..332.3.7 SiO_2粉尘暴露对CF（20 d）α-SMA蛋白表达的影响 | 第57-59页 |
| 3 讨论 | 第59-63页 |
| 4 小结 | 第63-64页 |
| 第二部分 实验性矽肺大鼠循环纤维细胞分布规律和趋化行为的动态观察 | 第64-106页 |
| 1 实验材料与方法 | 第66-80页 |
| 1.1 实验材料 | 第66-70页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第66页 |
| 1.1.2 主要实验试剂 | 第66-68页 |
| 1.1.3 主要试剂的配制 | 第68-70页 |
| 1.2 主要实验仪器 | 第70页 |
| 1.3 实验方法 | 第70-79页 |
| 1.3.1 大鼠矽肺动物模型建立 | 第70-71页 |
| 1.3.2 取材 | 第71页 |
| 1.3.3 HE染色 | 第71-72页 |
| 1.3.4 Masson染色 | 第72页 |
| 1.3.5 流式细胞术 | 第72-73页 |
| 1.3.6 免疫荧光染色 | 第73-74页 |
| 1.3.7 免疫组织化学染色 | 第74-75页 |
| 1.3.8 Western blot检测肺组织中p-PI3K、p-Ser473-Akt和p-mTOR的蛋白表达 | 第75-77页 |
| 1.3.9 肺泡灌洗液 Th1 和 Th2 细胞检测 | 第77-78页 |
| 1.3.10 统计方法 | 第78-79页 |
| 1.4 本部分实验技术线路图 | 第79-80页 |
| 2 结果 | 第80-97页 |
| 2.1 大鼠肺组织形态学观察 | 第80-81页 |
| 2.2 大鼠肺纤维化程度的观察 | 第81-82页 |
| 2.3 大鼠外周血中CF比例 | 第82-83页 |
| 2.4 大鼠肺组织中CF比例 | 第83-84页 |
| 2.5 大鼠肺组织中CF的分布及占Collagen I分泌细胞的比例 | 第84-85页 |
| 2.6 CF来源的肌成纤维细胞比例 | 第85-86页 |
| 2.7 肺泡II型上皮细胞来源的肌成纤维细胞比例 | 第86-87页 |
| 2.8 三种不同来源的肌成纤维细胞权重变化趋势 | 第87-88页 |
| 2.9 SiO_2粉尘暴露对CF体内迁移的影响 | 第88-89页 |
| 2.10 大鼠肺组织中CXCR4和CXCL12的蛋白表达 | 第89-90页 |
| 2.11 大鼠肺组织中p-PI3K、p-Ser473-Akt、p-mTOR的蛋白表达 | 第90-92页 |
| 2.12 大鼠肺泡灌洗液中Th1和Th2细胞比例的变化 | 第92-94页 |
| 2.13 大鼠肺组织中INF-γ、IL-4、TGF-β1 和IL-1β的表达 | 第94-96页 |
| 2.14 CF与Th1/Th2及相关细胞因子的关联性分析 | 第96-97页 |
| 3 讨论 | 第97-105页 |
| 4 小结 | 第105-106页 |
| 结论 | 第106-107页 |
| 本研究的局限性 | 第107页 |
| 下一步的研究计划 | 第107页 |
| 论文创新点 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-116页 |
| 综述 循环纤维细胞与纤维化疾病研究进展 | 第116-135页 |
| 1. CF研究现状 | 第116-120页 |
| 2. CF的功能 | 第120-123页 |
| 3. CF在纤维化相关疾病中的作用 | 第123-126页 |
| 4. CF的研究展望 | 第126-127页 |
| 参考文献 | 第127-135页 |
| 个人简历 | 第135-137页 |
| 致谢 | 第137页 |
