论文目录 | |
中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
缩略语/符号说明 | 第11-12页 |
前言 | 第12-15页 |
研究现状、成果 | 第12-13页 |
研究目的、方法 | 第13-15页 |
一、后发障动物模型复制及Pax6基因转录本测定 | 第15-36页 |
1.1 对象和方法 | 第15-22页 |
1.1.1 材料 | 第15-17页 |
1.1.2 方法 | 第17-22页 |
1.2 结果 | 第22-31页 |
1.2.1 大鼠后发障模型 | 第22-24页 |
1.2.2 含大鼠Pax6转录本的质粒的构建及序列分析 | 第24-28页 |
1.2.3 术后大鼠后囊膜组织中Pax6两种转录本的表达测定 | 第28-31页 |
1.3 讨论 | 第31-35页 |
1.3.1 大鼠后发障模型的制备 | 第31-32页 |
1.3.2 后发障模型研究现状 | 第32-33页 |
1.3.3 后发障形成中Pax6基因的影响 | 第33-34页 |
1.3.4 术后大鼠后囊膜组织中Pax6两种转录本的表达分析 | 第34-35页 |
1.4 小结 | 第35-36页 |
二、敲减PAX6基因对细胞活力和增殖的影响 | 第36-54页 |
2.1 对象和方法 | 第36-41页 |
2.1.1 实验材料 | 第36-37页 |
2.1.2 实验方法 | 第37-41页 |
2.2 结果 | 第41-49页 |
2.2.1 PAX6的两个转录本在细胞内的丰度 | 第42-43页 |
2.2.2 Real-time PCR表达丰度能满足检测实验要求 | 第43-44页 |
2.2.3 慢病毒的感染效率 | 第44-45页 |
2.2.4 慢病毒载体能够有效地敲减PAX6的表达 | 第45-48页 |
2.2.5 MTT法分析敲减PAX6后细胞活力下降 | 第48-49页 |
2.3 讨论 | 第49-52页 |
2.4 小结 | 第52-54页 |
三、Pax6基因敲减后回复表达的研究 | 第54-72页 |
3.1 对象和方法 | 第54-59页 |
3.1.1 实验材料 | 第54-55页 |
3.1.2 实验方法 | 第55-58页 |
3.1.3 免疫印迹(Western blot)及显色 | 第58-59页 |
3.1.4 MTT法检测细胞活力及增殖情况 | 第59页 |
3.1.5 PI-FACS检测细胞周期 | 第59页 |
3.1.6 AnnexinⅤ单染法检测细胞凋亡 | 第59页 |
3.2 实验结果 | 第59-67页 |
3.2.1 构建Pax6的回复表达载体 | 第59-62页 |
3.2.2 制备回复表达Pax6的病毒颗粒 | 第62页 |
3.2.3 qRT-PCR确定Pax6敲减及回复表达效率 | 第62-63页 |
3.2.4 Pax6回复表达对细胞活力及增值能力的影响 | 第63页 |
3.2.5 Pax6回复表达对细胞周期的影响 | 第63-66页 |
3.2.6 Pax6回复表达对于凋亡的影响 | 第66-67页 |
3.3 讨论 | 第67-71页 |
3.4 小结 | 第71-72页 |
四、全基因表达谱芯片对PAX6基因功能的分析 | 第72-99页 |
4.1 对象和方法 | 第72-77页 |
4.1.1 实验材料 | 第72页 |
4.1.2 实验方法 | 第72-77页 |
4.2 实验结果 | 第77-96页 |
4.2.1 细胞的感染和RNA抽提 | 第77-78页 |
4.2.2 实验的质控 | 第78-80页 |
4.2.3 杂交微阵列芯片扫描结果 | 第80-81页 |
4.2.4 芯片数据初步分析结果 | 第81-85页 |
4.2.5 Pathway和GO分析 | 第85-96页 |
4.3 讨论 | 第96-97页 |
4.4 小结 | 第97-99页 |
结论 | 第99-100页 |
论文创新点 | 第100-101页 |
参考文献 | 第101-106页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第106-107页 |
综述 PAX6基因在眼发育中的作用 | 第107-114页 |
综述参考文献 | 第111-114页 |
致谢 | 第114页 |