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Pax6基因转录本对HLE-B3细胞生物学功能调控的实验研究

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Pax6基因转录本对HLE-B3细胞生物学功能调控的实验研究
论文目录
 
中文摘要第1-6页
Abstract第6-11页
缩略语/符号说明第11-12页
前言第12-15页
研究现状、成果第12-13页
研究目的、方法第13-15页
一、后发障动物模型复制及Pax6基因转录本测定第15-36页
  1.1 对象和方法第15-22页
    1.1.1 材料第15-17页
    1.1.2 方法第17-22页
  1.2 结果第22-31页
    1.2.1 大鼠后发障模型第22-24页
    1.2.2 含大鼠Pax6转录本的质粒的构建及序列分析第24-28页
    1.2.3 术后大鼠后囊膜组织中Pax6两种转录本的表达测定第28-31页
  1.3 讨论第31-35页
    1.3.1 大鼠后发障模型的制备第31-32页
    1.3.2 后发障模型研究现状第32-33页
    1.3.3 后发障形成中Pax6基因的影响第33-34页
    1.3.4 术后大鼠后囊膜组织中Pax6两种转录本的表达分析第34-35页
  1.4 小结第35-36页
二、敲减PAX6基因对细胞活力和增殖的影响第36-54页
  2.1 对象和方法第36-41页
    2.1.1 实验材料第36-37页
    2.1.2 实验方法第37-41页
  2.2 结果第41-49页
    2.2.1 PAX6的两个转录本在细胞内的丰度第42-43页
    2.2.2 Real-time PCR表达丰度能满足检测实验要求第43-44页
    2.2.3 慢病毒的感染效率第44-45页
    2.2.4 慢病毒载体能够有效地敲减PAX6的表达第45-48页
    2.2.5 MTT法分析敲减PAX6后细胞活力下降第48-49页
  2.3 讨论第49-52页
  2.4 小结第52-54页
三、Pax6基因敲减后回复表达的研究第54-72页
  3.1 对象和方法第54-59页
    3.1.1 实验材料第54-55页
    3.1.2 实验方法第55-58页
    3.1.3 免疫印迹(Western blot)及显色第58-59页
    3.1.4 MTT法检测细胞活力及增殖情况第59页
    3.1.5 PI-FACS检测细胞周期第59页
    3.1.6 AnnexinⅤ单染法检测细胞凋亡第59页
  3.2 实验结果第59-67页
    3.2.1 构建Pax6的回复表达载体第59-62页
    3.2.2 制备回复表达Pax6的病毒颗粒第62页
    3.2.3 qRT-PCR确定Pax6敲减及回复表达效率第62-63页
    3.2.4 Pax6回复表达对细胞活力及增值能力的影响第63页
    3.2.5 Pax6回复表达对细胞周期的影响第63-66页
    3.2.6 Pax6回复表达对于凋亡的影响第66-67页
  3.3 讨论第67-71页
  3.4 小结第71-72页
四、全基因表达谱芯片对PAX6基因功能的分析第72-99页
  4.1 对象和方法第72-77页
    4.1.1 实验材料第72页
    4.1.2 实验方法第72-77页
  4.2 实验结果第77-96页
    4.2.1 细胞的感染和RNA抽提第77-78页
    4.2.2 实验的质控第78-80页
    4.2.3 杂交微阵列芯片扫描结果第80-81页
    4.2.4 芯片数据初步分析结果第81-85页
    4.2.5 Pathway和GO分析第85-96页
  4.3 讨论第96-97页
  4.4 小结第97-99页
结论第99-100页
论文创新点第100-101页
参考文献第101-106页
发表论文和参加科研情况说明第106-107页
综述 PAX6基因在眼发育中的作用第107-114页
综述参考文献第111-114页
致谢第114页

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