论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第一部分 相关内容综述 | 第12-52页 |
| 第一章 细菌耐药性和耐药细菌简述 | 第12-17页 |
| 1.1 细菌耐药性 | 第12-13页 |
| 1.2 国内外耐药趋势现状 | 第13-14页 |
| 1.3 耐药细菌简述 | 第14-17页 |
| 1.3.1 大肠埃希菌 | 第14-15页 |
| 1.3.2 铜绿假单胞菌 | 第15页 |
| 1.3.3 鲍曼不动杆菌 | 第15-16页 |
| 1.3.4 金黄色葡萄球菌 | 第16-17页 |
| 第二章 抗菌肽综述 | 第17-37页 |
| 2.1 抗菌肽的来源 | 第18-20页 |
| 2.1.1 来源于细菌的抗菌肽 | 第18页 |
| 2.1.2 来源于植物的抗菌肽 | 第18-19页 |
| 2.1.3 来源于动物的抗菌肽 | 第19-20页 |
| 2.2 抗菌肽的分类 | 第20-22页 |
| 2.2.1 α-螺旋抗菌肽 | 第20页 |
| 2.2.2 β-片层抗菌肽 | 第20页 |
| 2.2.3 其它类型抗菌肽 | 第20-22页 |
| 2.3 抗菌肽的理化性质 | 第22页 |
| 2.3.1 大小 | 第22页 |
| 2.3.2 序列 | 第22页 |
| 2.3.3 电荷 | 第22页 |
| 2.3.4 双亲性 | 第22页 |
| 2.4 抗菌肽的作用机制 | 第22-27页 |
| 2.4.1 胞膜损伤机制 | 第23-25页 |
| 2.4.2 胞内杀伤机制 | 第25-27页 |
| 2.5 影响抗菌肽活性的因素 | 第27-30页 |
| 2.5.1 电荷数 | 第27-28页 |
| 2.5.2 疏水性 | 第28页 |
| 2.5.3 螺旋度 | 第28页 |
| 2.5.4 双亲性 | 第28-29页 |
| 2.5.5 特殊氨基酸残基和末端氨基酸的作用 | 第29页 |
| 2.5.6 氨基酸的构型 | 第29-30页 |
| 2.6 抗菌肽的改造 | 第30-33页 |
| 2.6.1 末端修饰 | 第30页 |
| 2.6.2 非天然氨基酸的引入 | 第30-31页 |
| 2.6.3 模拟肽 | 第31-32页 |
| 2.6.4 多聚抗菌肽 | 第32页 |
| 2.6.5 氨基酸重排 | 第32-33页 |
| 2.7 抗菌肽的研发 | 第33-37页 |
| 第三章 蛙类抗菌肽 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-52页 |
| 第二部分 研究内容 | 第52-108页 |
| 第四章 课题的总体设计 | 第52-53页 |
| 第五章 抗菌肽CPF-C1对常见临床耐药细菌抗菌活性及机制研究 | 第53-77页 |
| 5.1 引言 | 第53-54页 |
| 5.2 实验材料与方法 | 第54-61页 |
| 5.2.1 试剂及仪器 | 第54-55页 |
| 5.2.2 多肽的固相合成及分离纯化 | 第55-56页 |
| 5.2.3 菌种 | 第56-57页 |
| 5.2.4 最小抑菌浓度(MIC)检测 | 第57页 |
| 5.2.5 抑菌圈实验 | 第57页 |
| 5.2.6 最小杀菌浓度(MBC)检测 | 第57页 |
| 5.2.7 杀菌动力学实验 | 第57-58页 |
| 5.2.8 大肠埃希菌细胞外膜渗透性实验 | 第58页 |
| 5.2.9 大肠埃希菌细胞内膜渗透性实验 | 第58页 |
| 5.2.10 激光共聚焦显微镜观察碘化丙啶(PI)的摄取 | 第58-59页 |
| 5.2.11 扫描电镜(SEM)观察细菌细胞膜变化 | 第59页 |
| 5.2.12 钙黄绿素泄漏实验 | 第59页 |
| 5.2.13 透射电镜(TEM)观察LUVs形态变化 | 第59-60页 |
| 5.2.14 与细菌基因组DNA结合凝胶阻滞实验 | 第60页 |
| 5.2.15 溶血活性实验 | 第60页 |
| 5.2.16 细胞毒性实验 | 第60-61页 |
| 5.3 结果 | 第61-71页 |
| 5.3.1 抗菌肽的体外抗菌活性测定(MIC) | 第61页 |
| 5.3.2 CPF-C1的体外抗菌活性测定(抑菌圈、MIC和MBC) | 第61-63页 |
| 5.3.3 CPF-C1的杀菌动力学曲线 | 第63-65页 |
| 5.3.4 细胞外膜渗透性实验 | 第65-66页 |
| 5.3.5 细胞内膜渗透性实验 | 第66-67页 |
| 5.3.6 PI吸收实验 | 第67-68页 |
| 5.3.7 SEM观察细菌的形态学改变 | 第68页 |
| 5.3.8 脂质体内钙黄绿素的释放试验 | 第68-69页 |
| 5.3.9 TEM观察LUVs的形态学改变 | 第69-70页 |
| 5.3.10 与细菌基因组DNA的相互作用 | 第70-71页 |
| 5.3.11 溶血与细胞毒性试验 | 第71页 |
| 5.4 讨论 | 第71-74页 |
| 参考文献 | 第74-77页 |
| 第六章 CPF-C1类似物对耐药细菌抗菌活性、构效关系及机制研究 | 第77-107页 |
| 6.1 引言 | 第77-78页 |
| 6.2 实验材料与方法 | 第78-82页 |
| 6.2.1 试剂及仪器 | 第78页 |
| 6.2.2 多肽的固相合成及分离纯化 | 第78-79页 |
| 6.2.3 菌种 | 第79页 |
| 6.2.4 圆二色谱 | 第79页 |
| 6.2.5 最小抑菌浓度(MIC)检测 | 第79页 |
| 6.2.6 胰酶稳定性实验 | 第79-80页 |
| 6.2.7 血清稳定性实验 | 第80页 |
| 6.2.8 溶血活性实验 | 第80页 |
| 6.2.9 抑制生物膜形成实验 | 第80-81页 |
| 6.2.10 生物膜破坏实验 | 第81页 |
| 6.2.11 大肠埃希菌细胞外膜、内膜渗透性实验 | 第81页 |
| 6.2.12 激光共聚焦显微镜观察碘化丙啶(PI)的摄取 | 第81页 |
| 6.2.13 扫描电镜(SEM)观察细菌细胞膜变化 | 第81-82页 |
| 3.2.14 与细菌基因组DNA结合凝胶阻滞实验 | 第82页 |
| 6.3 结果 | 第82-100页 |
| 6.3.1 CPF-C1类似物的序列及理化特性 | 第82-86页 |
| 6.3.2 CPF-C1类似物的抗菌活性 | 第86页 |
| 6.3.3 CPF-C1及其类似物的胰酶稳定性 | 第86-89页 |
| 6.3.4 CPF-C1及其类似物的血清稳定性 | 第89-91页 |
| 6.3.5 CPF-C1类似物的溶血活性 | 第91-92页 |
| 6.3.6 CPF-C1及其类似物对生物膜形成的抑制作用 | 第92-93页 |
| 6.3.7 CPF-C1及其类似物对已形成生物膜的破坏作用 | 第93页 |
| 6.3.8 CPF-C1及其类似物对大肠埃希菌细胞外膜、内膜渗透性实验 | 第93-97页 |
| 6.3.9 细菌PI染色观察CPF-C1类似物对细胞膜的作用 | 第97-98页 |
| 6.3.10 SEM观察CPF-C1类似物作用后细菌细胞膜形态变化 | 第98页 |
| 6.3.11 CPF-C1类似物的DNA结合实验 | 第98-100页 |
| 6.4 讨论 | 第100-105页 |
| 参考文献 | 第105-107页 |
| 第七章 展望 | 第107-108页 |
| 在学期间的研究成果 | 第108-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 附录 | 第111-139页 |
