论文目录 | |
中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-15页 |
缩略语 | 第15-17页 |
前言 | 第17-24页 |
研究现状、成果 | 第17-23页 |
研究目的、方法 | 第23-24页 |
一、C.pneumoniae感染对IQGAP1活性的影响 | 第24-53页 |
实验一 C.pneumoniae感染对IQGAP1活性的影响 | 第24-46页 |
1.1 实验材料 | 第24-34页 |
1.1.1 细胞 | 第24页 |
1.1.2 菌株 | 第24页 |
1.1.3 主要试剂 | 第24-26页 |
1.1.4 主要仪器 | 第26-27页 |
1.1.5 主要试剂的配制 | 第27-34页 |
1.2 实验方法 | 第34-42页 |
1.2.1 VEC的培养、复苏、传代与冻存 | 第34页 |
1.2.2 C.pneumoniae的增殖培养 | 第34-35页 |
1.2.3 C.pneumoniae感染VEC | 第35-36页 |
1.2.4 Western blot分析C.pneumoniae感染后VEC IQGAP1内表达水平 | 第36-40页 |
1.2.5 免疫共沉淀分析C.pneumoniae感染后VEC IQGAP1的磷酸化水平 | 第40-42页 |
1.2.6. 统计学处理 | 第42页 |
1.3 结果 | 第42-46页 |
1.3.1. C.pneumoniae感染对VEC IQGAP1蛋白表达水平的影响 | 第42-43页 |
1.3.2. C.pneumoniae感染可诱导VEC IQGAP1酪氨酸磷酸化 | 第43-44页 |
1.3.3. C.pneumoniae感染促进VEC IQGAP1丝氨酸磷酸化 | 第44-46页 |
实验二 Src、PKC在C.pneumoniae感染激活IQGAP1中的作用 | 第46-53页 |
2.1 实验材料 | 第46-47页 |
2.1.1. 细胞 | 第46页 |
2.1.2 菌株 | 第46页 |
2.1.3 主要试剂 | 第46页 |
2.1.4 主要仪器 | 第46页 |
2.1.5 主要试剂的配制 | 第46-47页 |
2.2 实验方法 | 第47-49页 |
2.2.1. C.pneumoniae感染VEC | 第47页 |
2.2.2. CCK-8检测PP2、GF 109203X和chelerythrine对VEC活力的影响 | 第47-48页 |
2.2.3. 免疫共沉淀法检测PP2对C.pneumoniae感染诱导的VEC IQGAP1酪氨酸磷酸化的影响 | 第48-49页 |
2.2.4. 免疫共沉淀法检测GF 109203X和chelerythrine对C.pneumoniae感染诱导VEC IQGAP1丝氨酸磷酸化的影响 | 第49页 |
2.2.5. 统计学处理 | 第49页 |
2.3 结果 | 第49-53页 |
2.3.1. PP2、GF 109203X和chelerythrine对VEC活力的影响 | 第49-50页 |
2.3.2. PP2可抑制C.pneumoniae感染诱导的IQGAP1酪氨酸磷酸化 | 第50-51页 |
2.3.3. GF 109203X和chelerythrine均可抑制C.pneumoniae感染诱导的VEC IQGAP1丝氨酸磷酸化 | 第51-53页 |
二、IQGAP1在C.pneunioniae感染诱导的VEC迁移和血管新生中的作用 | 第53-71页 |
1. 实验材料 | 第53-54页 |
1.1. 细胞 | 第53页 |
1 2. 菌株 | 第53页 |
1.3. 主要试剂 | 第53-54页 |
1.4. 主要仪器 | 第54页 |
1.5. 主要试剂的配制 | 第54页 |
2. 实验方法 | 第54-61页 |
2.1. C.pneumoniae感染VEC | 第54页 |
2.2. RNA干扰 | 第54-55页 |
2.3 免疫荧光法观察PP2、GF 109203X以及chelerythrine对C.pneumoniae感染率的影响 | 第55-56页 |
2.4. 实验分组 | 第56页 |
2.5. Wound healing实验 | 第56-57页 |
2.6. Transwell实验 | 第57-58页 |
2.7. 微管腔形成实验 | 第58-59页 |
2.8. 肌动蛋白聚合实验 | 第59-60页 |
2.9. 免疫荧光双标染色 | 第60页 |
2.10. 统计学处理 | 第60-61页 |
3. 结果 | 第61-71页 |
3.1. RNA干扰效能达到实验标准 | 第61页 |
3.2. 免疫荧光法确定PP2、GF 109203X以及chelerythrine对C.pneumoniae感染率的影响 | 第61-63页 |
3.3. Wound healing实验观察IQGAP1在C.pneumoniae感染诱导的VEC迁移中的作用 | 第63-65页 |
3.4. Transwell实验观察IQGAP1在C.pneumoniae感染诱导的VEC迁移中的作用 | 第65-67页 |
3.5. 微管腔形成实验观察IQGAP1在C.pneumoniae感染诱导的VEC血管新生中的作用 | 第67-69页 |
3.6. 激光扫描共聚焦显微镜观察C.pneumoniae感染对VEC肌动蛋白聚合的影响 | 第69-70页 |
3.7. 免疫荧光双标染色法观察C.pneumoniae感染VEC后IQGAP1和肌丝的共定位 | 第70-71页 |
三、IQGAP1通过N-WASP调控C.pneumoniae感染诱导的VEC迁移和血管新生 | 第71-76页 |
1. 实验材料 | 第71-72页 |
1.1. 细胞 | 第71页 |
1.2. 菌株 | 第71页 |
1.3. 主要试剂 | 第71页 |
1.4. 主要仪器 | 第71页 |
1.5. 主要试剂的配制 | 第71-72页 |
2. 实验方法 | 第72-73页 |
2.1. C.pneumoniae感染VEC | 第72页 |
2.2. 实验分组 | 第72页 |
2.3. 免疫共沉淀观察IQGAP1与N-WASP之间的相互作用 | 第72页 |
2.4. 共聚焦显微镜观察IQGAP1对C.pneumoniae感染诱导VEC肌动蛋白和N-WASP共定位的影响 | 第72页 |
2.5. Western blot检测IQGAP1对C.pneumoniae感染诱导的N-WASP磷酸化水平的影响 | 第72-73页 |
2.6. 统计学处理 | 第73页 |
3. 结果 | 第73-76页 |
3.1. IQGAP1与N-WASP之间的相互作用 | 第73页 |
3.2. IQGAP1对C.pneumoniae感染诱导VEC肌丝和N-WASP共定位的影响 | 第73-74页 |
3.3. IQGAP1对C.pneumoniae感染诱导的VEC N-WASP磷酸化的影响 | 第74-76页 |
讨论 | 第76-86页 |
小结 | 第86-87页 |
结论 | 第87-88页 |
论文创新点 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-100页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第100-102页 |
附录 | 第102-104页 |
综述 IQGAP1在动脉粥样硬化发生发展中的作用研究进展 | 第104-124页 |
综述参考文献 | 第114-124页 |
致谢 | 第124页 |