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结核分枝杆菌亚单位疫苗LT69的研究和抗持留菌药物的筛选

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结核分枝杆菌亚单位疫苗LT69的研究和抗持留菌药物的筛选
论文目录
 
第一部分 结核分枝杆菌亚单位疫苗LT61的构建及其保护效应和免疫记忆特性的研究第3-7页
摘要第3-5页
Abstract第5-7页
第二部分 抗持留菌药物筛选与评价第7-10页
摘要第7-9页
Abstract第9-10页
英文缩略词表第10-15页
第一部分 结核分枝杆菌亚单位疫苗LT69的构建及其保护效应和免疫记忆特性的研究第15-80页
第一章 前言第15-24页
  1.1 结核病的疾病负担第15-16页
  1.2 结核病疫苗的研究现状第16-20页
  1.3 结核病疫苗免疫记忆保护机制的研究进展第20-22页
  1.4 本研究课题设计第22-24页
第二章 结核分枝杆菌亚单位疫苗LT69的构建和保护效果评价第24-63页
  2.1 引言第24-25页
  2.2 试验材料与方法第25-40页
    2.2.1 菌株第25页
    2.2.2 质粒第25页
    2.2.3 实验动物第25页
    2.2.4 主要试验试剂第25-26页
      2.2.4.1 酶类第25页
      2.2.4.2 试剂盒类第25-26页
      2.2.4.3 培养基及化学试剂第26页
      2.2.4.4 其他(PCR引物、抗体、抗生素和蛋白抗原等)第26页
    2.2.5 主要仪器设备第26-27页
    2.2.6 试验方法第27-40页
      2.2.6.1 pET30a(+)-ESAT6-Ag85B-Mtb8.4-MPT64(190-198)-HspX(pET30a-EAMMH)重组载体的构建第27-30页
      2.2.6.2 融合蛋白LT69的表达第30-32页
      2.2.6.3 融合蛋白LT69的纯化第32-36页
      2.2.6.4 结核亚单位疫苗LT69-DDA-PolyI:C (LT69)的制备第36-37页
      2.2.6.5 结核亚单位疫苗LT69的免疫原性及保护效果检测第37-39页
      2.2.6.6 结核亚单位疫苗LT69加强BCG效应的研究第39-40页
  2.3 结果第40-59页
    2.3.1 重组载体pET30a-EAMMH的构建及鉴定第40-45页
      2.3.1.1 构建重组基因载体pET30a(+)-MPT64_(190-198)-Mtb8.4-HspX (MMH)第40-42页
      2.3.1.2 PCR扩增ESAT6-Ag85B(EA)融合基因片段第42-43页
      2.3.1.3 构建重组基因载体pET30a-EAMMH(图2.6)第43-45页
    2.3.2 LT69融合蛋白的表达第45-47页
    2.3.3 LT69融合蛋白的纯化第47-53页
    2.3.4 LT69疫苗的免疫原性及保护效果第53-56页
    2.3.5 LT69疫苗加强BCG的效应第56-59页
  2.4 讨论第59-62页
    2.4.1 结核分枝杆菌亚单位疫苗抗原的筛选第59-61页
    2.4.2 结核分枝杆菌亚单位蛋白疫苗LT69的特性第61-62页
  2.5 结论第62-63页
第三章 结核病亚单位疫苗的免疫记忆特性研究第63-73页
  3.1 引言第63页
  3.2 材料与方法第63-66页
    3.2.1 实验动物第63页
    3.2.2 主要试剂第63-64页
    3.2.3 主要仪器设备第64页
    3.2.4 主要方法第64-66页
      3.2.4.1 疫苗LT69的配制第64页
      3.2.4.2 雷帕霉素的配制第64页
      3.2.4.3 不同剂量LT69疫苗免疫小鼠策略第64-65页
      3.2.4.4 结核亚单位疫苗LT69和雷帕霉素的联合免疫策略第65-66页
      3.2.4.5 疫苗激活的免疫记忆性T细胞的检测方法第66页
  3.3 结果第66-69页
    3.3.1 低剂量LT69疫苗比高剂量诱导产生更持久的免疫记忆第66-67页
    3.3.2 低剂量LT69疫苗的长期保护效果强于高剂量疫苗第67页
    3.3.3 雷帕霉素增强LT69疫苗诱导的免疫记忆性T细胞的分泌第67-68页
    3.3.4 雷帕霉素免疫增强LT69疫苗的长期保护效果第68-69页
  3.4 讨论第69-72页
    3.4.1 疫苗诱导的免疫记忆第69-70页
    3.4.2 影响记忆性T细胞形成的因素第70-71页
    3.4.3 疫苗LT69所诱导的免疫记忆的调控第71-72页
  3.5 结论和展望第72-73页
参考文献(一)第73-80页
第二部分 抗持留菌药物筛选与评价第80-112页
第一章 前言第80-82页
  1.1 研究背景第80-81页
  1.2 本研究课题设计第81-82页
第二章 抗金黄色葡萄球菌持留菌药物的筛选与评价第82-92页
  2.1 引言第82页
  2.2 试验材料与方法第82-84页
    2.2.1 菌株第82页
    2.2.2 实验动物第82-83页
    2.2.3 FDA-批准的药库和抗生素第83页
    2.2.4 从FDA批准的药库筛选针对金黄色葡萄球菌持留菌的药物第83页
    2.2.5 通过菌落计数比较所筛选药物抗持留菌的活性第83-84页
    2.2.6 在小鼠体内评价tosufloxacin对金黄色葡萄球菌持留菌的杀伤效果第84页
  2.3 实验结果第84-89页
    2.3.1 从FDA批准的药物库中筛选出的抗金黄色葡萄球菌持留菌的药物第84-85页
    2.3.2 通过CFU计数比较所筛选出的6种药物的杀菌效果第85页
    2.3.3 比较Tosufloxacin和其他喹诺酮类药物在体内外抗金黄色葡萄球菌持留菌的效果及化学结构的比较第85-87页
    2.3.4 利福平(rifampin)对tosufloxacin的杀菌作用具有一定的协同作用第87-89页
  2.4 讨论第89-91页
    2.4.1 金黄色葡萄球菌持留菌模型第89-90页
    2.4.2 抗生素tosufloxacin是抗金黄色葡萄球菌持留菌的有效药物第90页
    2.4.3 利福平对tosufloxacin的协同作用第90-91页
  2.5 结论第91-92页
第三章 抗大肠埃希菌持留菌药物的筛选与评价第92-100页
  3.1 引言第92页
  3.2 试验材料与方法第92-94页
    3.2.1 菌株第92页
    3.2.2 FDA批准的药库和抗生素第92-93页
    3.2.3 从FDA批准的药库筛选针对大肠埃希菌持留菌的药物第93页
    3.2.4 通过菌落计数,比较所筛选药物抗持留菌的活性第93页
    3.2.5 所筛选药物最小抑菌浓度(MIC)的检测第93-94页
  3.3 实验结果第94-97页
    3.3.1 从FDA药库筛选出14种具有抗大肠埃希菌持留菌的药物第94-95页
    3.3.2 Tosufloxacin和colistin具有很强的抗大肠埃希菌持留菌的活性第95-97页
  3.4 讨论第97-98页
    3.4.1 大肠埃希菌持留菌是尿路感染(Urinary track infection,UTIs)反复发作的主要原因第97页
    3.4.2 Tosufloxacin和colistin是抗大肠埃希菌持留菌的有效药物第97-98页
  3.5 结论第98-100页
第四章 协同吡嗪酰胺抗结核分枝杆菌持留菌药物的筛选第100-108页
  4.1 引言第100页
  4.2 试验材料与方法第100-101页
    4.2.1 菌株第100页
    4.2.2 FDA批准的药库和抗生素第100-101页
    4.2.3 筛选抗结核分枝杆菌H37Ra持留菌的药物第101页
  4.3 实验结果第101-106页
    4.3.1 在FDA批准的药物库中筛选出130种药物具有抗H37Ra持留菌的作用第101-105页
    4.3.2 在130种初筛的药物中,有6中具有协同PZA抗H37Ra持留菌的作用第105-106页
  4.4 讨论第106-107页
    4.4.1 结核分枝杆菌持留菌是结核病难于治愈的原因之一第106页
    4.4.2 抗结核分枝杆菌持留菌药物的筛选第106-107页
  4.5 结论第107-108页
参考文献(二)第108-112页
在学期间科研成果第112-114页
致谢第114-115页

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