论文目录 | |
摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-10页 |
引言 | 第10-15页 |
第一章 LC对H_2O_2损伤HL7702肝细胞的保护作用研究 | 第15-29页 |
1 材料与方法 | 第16-21页 |
1.1 实验材料 | 第16-17页 |
1.1.1 主要试剂及材料 | 第16-17页 |
1.1.2 主要仪器 | 第17页 |
1.2 实验方法 | 第17-21页 |
1.2.1 细胞培养及分组处理 | 第17-18页 |
1.2.2 MTT法检测细胞活性 | 第18页 |
1.2.3 LDH释放检测 | 第18页 |
1.2.4 细胞内ROS含量检测 | 第18页 |
1.2.5 SOD、CAT活性及MDA含量测定 | 第18-20页 |
1.2.6 Western blot | 第20-21页 |
1.2.7 统计学分析 | 第21页 |
2 结果 | 第21-25页 |
2.1 H_2O_2损伤HL7702细胞模型的建立 | 第21页 |
2.2 LC对H_2O_2诱导的HL7702细胞损伤具有保护作用 | 第21-22页 |
2.3 LC抑制H_2O_2损伤HL7702细胞LDH的释放 | 第22-23页 |
2.4 LC抑制H_2O_2诱导的HL7702细胞ROS的产生 | 第23页 |
2.5 LC提高H_2O_2损伤HL7702细胞SOD、CAT活性及蛋白表达 | 第23-25页 |
2.6 LC抑制H_2O_2损伤HL7702细胞MDA含量增加 | 第25页 |
3 讨论 | 第25-28页 |
4 小结 | 第28-29页 |
第二章 Nrf_2/HO-1 通路在LC抑制H_2O_2诱导的HL7702细胞损伤中的作用 | 第29-45页 |
1 材料与方法 | 第30-33页 |
1.1 实验材料 | 第30-31页 |
1.1.1 主要试剂 | 第30页 |
1.1.2 主要仪器 | 第30-31页 |
1.2 实验方法 | 第31-33页 |
1.2.1 细胞培养及分组处理 | 第31页 |
1.2.2 Western blot | 第31页 |
1.2.3 免疫荧光染色 | 第31页 |
1.2.4 凝胶迁移实验(Electrophoretic Mobility Shift Assay, EMSA) | 第31-33页 |
1.2.5 Nrf_2siRNA瞬时转染 | 第33页 |
1.2.6 CCK-8 检测细胞活性 | 第33页 |
1.2.7 统计学分析 | 第33页 |
2 结果 | 第33-42页 |
2.1 H_2O_2损伤HL7702细胞Nrf_2的经时变化 | 第33-34页 |
2.2 LC增加H_2O_2损伤HL7702细胞Nrf_2活性 | 第34-35页 |
2.3 免疫荧光染色检测LC对H_2O_2损伤HL7702细胞Nrf_2核转移的影响 | 第35-36页 |
2.4 LC增加H_2O_2损伤HL7702细胞Nrf_2-DNA结合活性 | 第36-37页 |
2.5 LC增强H_2O_2损伤HL7702细胞HO-1 表达 | 第37-38页 |
2.6 沉默Nrf_2基因减弱了LC诱导H_2O_2损伤HL7702细胞HO-1 表达 | 第38-41页 |
2.7 沉默Nrf_2基因对LC增强H_2O_2损伤HL7702细胞活性的影响 | 第41-42页 |
3 讨论 | 第42-44页 |
4 小结 | 第44-45页 |
第三章 MAPK、PI3K/Akt通路在LC抑制H_2O_2诱导的HL7702细胞损伤中的作用 | 第45-58页 |
1 材料与方法 | 第46-47页 |
1.1 实验材料 | 第46页 |
1.1.1 主要试剂 | 第46页 |
1.1.2 主要仪器 | 第46页 |
1.2 实验方法 | 第46-47页 |
1.2.1 细胞培养及分组处理 | 第46页 |
1.2.2 Western blot | 第46-47页 |
1.2.3 CCK-8 检测细胞活性 | 第47页 |
1.2.4 统计学分析 | 第47页 |
2 结果 | 第47-55页 |
2.1 MAPK在LC保护H_2O_2损伤HL7702细胞中的作用 | 第47-50页 |
2.1.1 H_2O_2损伤对HL7702细胞MAPK通路的影响 | 第47-48页 |
2.1.2 MAPK在H_2O_2损伤HL7702细胞中的作用 | 第48-49页 |
2.1.3 LC对H_2O_2损伤HL7702细胞MAPK通路的影响 | 第49-50页 |
2.2 PI3K/Akt通路在LC保护H_2O_2损伤HL7702细胞中的作用 | 第50-55页 |
2.2.1 H_2O_2损伤对HL7702细胞PI3K/Akt通路的影响 | 第50-51页 |
2.2.2 LC对H_2O_2损伤HL7702细胞Akt活性的影响 | 第51-53页 |
2.2.3 Akt在LC保护H_2O_2损伤HL7702细胞中的作用 | 第53-54页 |
2.2.4 Akt的激活与LC增强H_2O_2损伤HL7702细胞Nrf_2活性及HO-1 表达有关 | 第54-55页 |
3 讨论 | 第55-57页 |
4 小结 | 第57-58页 |
第四章 LC对H_2O_2损伤HL7702细胞脂肪酸代谢及能量代谢相关基因表达的影响 | 第58-77页 |
1 材料与方法 | 第59-62页 |
1.1 实验材料 | 第59-60页 |
1.1.1 主要试剂 | 第59-60页 |
1.1.2 主要仪器 | 第60页 |
1.2 实验方法 | 第60-62页 |
1.2.1 细胞培养及分组处理 | 第60页 |
1.2.2 Western blot | 第60页 |
1.2.3 RT-PCR | 第60-62页 |
1.2.4 MTT法检测细胞活性 | 第62页 |
1.2.5 SOD、CAT活性检测 | 第62页 |
1.2.6 LDH释放率检测 | 第62页 |
1.2.7 统计学分析 | 第62页 |
2 结果 | 第62-73页 |
2.1 PPAR-α在LC抑制H_2O_2损伤HL7702细胞中的作用 | 第62-68页 |
2.1.1 H_2O_2损伤HL7702细胞PPAR-α表达的经时变化 | 第62-63页 |
2.1.2 PPAR-α在H_2O_2诱导HL7702细胞损伤中的作用 | 第63-64页 |
2.1.3 LC对H_2O_2损伤HL7702细胞PPAR-α及其靶基因表达的影响 | 第64-65页 |
2.1.4 PPAR-α的激活参与了LC对H_2O_2损伤HL7702细胞的保护作用 | 第65-66页 |
2.1.5 PPAR-α在LC增强H_2O_2损伤HL7702细胞SOD和CAT表达中的作用 | 第66-68页 |
2.2 AMPK在LC抑制H_2O_2损伤HL7702细胞中的作用 | 第68-70页 |
2.2.1 H_2O_2损伤HL7702细胞AMPK活性的变化 | 第68页 |
2.2.2 LC对H_2O_2损伤HL7702细胞AMPK通路的影响 | 第68-70页 |
2.2.3 AMPK在LC抑制H_2O_2损伤HL7702细胞中的作用 | 第70页 |
2.3 GSK-3β在LC抑制H_2O_2损伤HL7702细胞中的作用 | 第70-73页 |
2.3.1 H_2O_2损伤HL7702细胞GSK-3β活性的变化 | 第70-71页 |
2.3.2 LC对H_2O_2损伤HL7702细胞GSK-3β磷酸化的影响 | 第71页 |
2.3.3 PI3K/Akt、AMPK在LC增强H_2O_2损伤HL7702细胞GSK-3β磷酸化表达中的作用 | 第71-73页 |
3 讨论 | 第73-76页 |
4 小结 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-90页 |
结论 | 第90-91页 |
综述一 抗氧化营养素与肝损伤的研究进展 | 第91-105页 |
综述一 参考文献 | 第99-105页 |
综述二 肝损伤与氧化应激信号通路的研究进展 | 第105-125页 |
综述二 参考文献 | 第116-125页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第125-126页 |
附录(中英文缩略词表) | 第126-127页 |
致谢 | 第127-128页 |