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左卡尼汀对过氧化氢损伤人HL7702肝细胞的保护作用研究

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左卡尼汀对过氧化氢损伤人HL7702肝细胞的保护作用研究
论文目录
 
摘要第1-4页
Abstract第4-10页
引言第10-15页
第一章 LC对H_2O_2损伤HL7702肝细胞的保护作用研究第15-29页
1 材料与方法第16-21页
  1.1 实验材料第16-17页
    1.1.1 主要试剂及材料第16-17页
    1.1.2 主要仪器第17页
  1.2 实验方法第17-21页
    1.2.1 细胞培养及分组处理第17-18页
    1.2.2 MTT法检测细胞活性第18页
    1.2.3 LDH释放检测第18页
    1.2.4 细胞内ROS含量检测第18页
    1.2.5 SOD、CAT活性及MDA含量测定第18-20页
    1.2.6 Western blot第20-21页
    1.2.7 统计学分析第21页
2 结果第21-25页
  2.1 H_2O_2损伤HL7702细胞模型的建立第21页
  2.2 LC对H_2O_2诱导的HL7702细胞损伤具有保护作用第21-22页
  2.3 LC抑制H_2O_2损伤HL7702细胞LDH的释放第22-23页
  2.4 LC抑制H_2O_2诱导的HL7702细胞ROS的产生第23页
  2.5 LC提高H_2O_2损伤HL7702细胞SOD、CAT活性及蛋白表达第23-25页
  2.6 LC抑制H_2O_2损伤HL7702细胞MDA含量增加第25页
3 讨论第25-28页
4 小结第28-29页
第二章 Nrf_2/HO-1 通路在LC抑制H_2O_2诱导的HL7702细胞损伤中的作用第29-45页
1 材料与方法第30-33页
  1.1 实验材料第30-31页
    1.1.1 主要试剂第30页
    1.1.2 主要仪器第30-31页
  1.2 实验方法第31-33页
    1.2.1 细胞培养及分组处理第31页
    1.2.2 Western blot第31页
    1.2.3 免疫荧光染色第31页
    1.2.4 凝胶迁移实验(Electrophoretic Mobility Shift Assay, EMSA)第31-33页
    1.2.5 Nrf_2siRNA瞬时转染第33页
    1.2.6 CCK-8 检测细胞活性第33页
    1.2.7 统计学分析第33页
2 结果第33-42页
  2.1 H_2O_2损伤HL7702细胞Nrf_2的经时变化第33-34页
  2.2 LC增加H_2O_2损伤HL7702细胞Nrf_2活性第34-35页
  2.3 免疫荧光染色检测LC对H_2O_2损伤HL7702细胞Nrf_2核转移的影响第35-36页
  2.4 LC增加H_2O_2损伤HL7702细胞Nrf_2-DNA结合活性第36-37页
  2.5 LC增强H_2O_2损伤HL7702细胞HO-1 表达第37-38页
  2.6 沉默Nrf_2基因减弱了LC诱导H_2O_2损伤HL7702细胞HO-1 表达第38-41页
  2.7 沉默Nrf_2基因对LC增强H_2O_2损伤HL7702细胞活性的影响第41-42页
3 讨论第42-44页
4 小结第44-45页
第三章 MAPK、PI3K/Akt通路在LC抑制H_2O_2诱导的HL7702细胞损伤中的作用第45-58页
1 材料与方法第46-47页
  1.1 实验材料第46页
    1.1.1 主要试剂第46页
    1.1.2 主要仪器第46页
  1.2 实验方法第46-47页
    1.2.1 细胞培养及分组处理第46页
    1.2.2 Western blot第46-47页
    1.2.3 CCK-8 检测细胞活性第47页
    1.2.4 统计学分析第47页
2 结果第47-55页
  2.1 MAPK在LC保护H_2O_2损伤HL7702细胞中的作用第47-50页
    2.1.1 H_2O_2损伤对HL7702细胞MAPK通路的影响第47-48页
    2.1.2 MAPK在H_2O_2损伤HL7702细胞中的作用第48-49页
    2.1.3 LC对H_2O_2损伤HL7702细胞MAPK通路的影响第49-50页
  2.2 PI3K/Akt通路在LC保护H_2O_2损伤HL7702细胞中的作用第50-55页
    2.2.1 H_2O_2损伤对HL7702细胞PI3K/Akt通路的影响第50-51页
    2.2.2 LC对H_2O_2损伤HL7702细胞Akt活性的影响第51-53页
    2.2.3 Akt在LC保护H_2O_2损伤HL7702细胞中的作用第53-54页
    2.2.4 Akt的激活与LC增强H_2O_2损伤HL7702细胞Nrf_2活性及HO-1 表达有关第54-55页
3 讨论第55-57页
4 小结第57-58页
第四章 LC对H_2O_2损伤HL7702细胞脂肪酸代谢及能量代谢相关基因表达的影响第58-77页
1 材料与方法第59-62页
  1.1 实验材料第59-60页
    1.1.1 主要试剂第59-60页
    1.1.2 主要仪器第60页
  1.2 实验方法第60-62页
    1.2.1 细胞培养及分组处理第60页
    1.2.2 Western blot第60页
    1.2.3 RT-PCR第60-62页
    1.2.4 MTT法检测细胞活性第62页
    1.2.5 SOD、CAT活性检测第62页
    1.2.6 LDH释放率检测第62页
    1.2.7 统计学分析第62页
2 结果第62-73页
  2.1 PPAR-α在LC抑制H_2O_2损伤HL7702细胞中的作用第62-68页
    2.1.1 H_2O_2损伤HL7702细胞PPAR-α表达的经时变化第62-63页
    2.1.2 PPAR-α在H_2O_2诱导HL7702细胞损伤中的作用第63-64页
    2.1.3 LC对H_2O_2损伤HL7702细胞PPAR-α及其靶基因表达的影响第64-65页
    2.1.4 PPAR-α的激活参与了LC对H_2O_2损伤HL7702细胞的保护作用第65-66页
    2.1.5 PPAR-α在LC增强H_2O_2损伤HL7702细胞SOD和CAT表达中的作用第66-68页
  2.2 AMPK在LC抑制H_2O_2损伤HL7702细胞中的作用第68-70页
    2.2.1 H_2O_2损伤HL7702细胞AMPK活性的变化第68页
    2.2.2 LC对H_2O_2损伤HL7702细胞AMPK通路的影响第68-70页
    2.2.3 AMPK在LC抑制H_2O_2损伤HL7702细胞中的作用第70页
  2.3 GSK-3β在LC抑制H_2O_2损伤HL7702细胞中的作用第70-73页
    2.3.1 H_2O_2损伤HL7702细胞GSK-3β活性的变化第70-71页
    2.3.2 LC对H_2O_2损伤HL7702细胞GSK-3β磷酸化的影响第71页
    2.3.3 PI3K/Akt、AMPK在LC增强H_2O_2损伤HL7702细胞GSK-3β磷酸化表达中的作用第71-73页
3 讨论第73-76页
4 小结第76-77页
参考文献第77-90页
结论第90-91页
综述一 抗氧化营养素与肝损伤的研究进展第91-105页
综述一 参考文献第99-105页
综述二 肝损伤与氧化应激信号通路的研究进展第105-125页
综述二 参考文献第116-125页
攻读学位期间的研究成果第125-126页
附录(中英文缩略词表)第126-127页
致谢第127-128页

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