论文目录 | |
摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-14页 |
第1章 绪论 | 第14-30页 |
1.1 骨组织工程学概述 | 第14-21页 |
1.1.1 骨组织工程学定义 | 第14页 |
1.1.2 骨组织工程三要素 | 第14-19页 |
1.1.3 骨组织工程学医疗应用现况、存在问题和前景 | 第19-20页 |
1.1.4 总结 | 第20-21页 |
1.2 钛材料 | 第21-25页 |
1.2.1 钛材料概述 | 第21页 |
1.2.2 钛材料表面固定方法 | 第21-22页 |
1.2.3 DOPA序列的发现和黏附机制 | 第22-25页 |
1.2.4 总结 | 第25页 |
1.3 骨形态发生蛋白(BMP-2) | 第25-26页 |
1.3.1 概述 | 第25-26页 |
1.3.2 总结 | 第26页 |
1.4 本论文的立题依据与可行性分析和课题设计方案及预期目标 | 第26-30页 |
1.4.1 立题依据与可行性分析 | 第26-28页 |
1.4.2 本课题设计方案及预期目标 | 第28-30页 |
第2章 黏附性BMP-2 前体的制备和表征 | 第30-52页 |
2.1 材料 | 第30-34页 |
2.1.1 主要仪器 | 第30-31页 |
2.1.2 主要试剂 | 第31-32页 |
2.1.3 试剂配制 | 第32-34页 |
2.2 实验方法 | 第34-43页 |
2.2.1 黏附性BMP-2 前体表达工程菌的构建和筛选 | 第34-40页 |
2.2.2 含有pET15b的大肠杆菌BL21最适培养条件的确定 | 第40页 |
2.2.3 发酵及菌体收集 | 第40-41页 |
2.2.4 蛋白纯化及复性 | 第41页 |
2.2.5 目的蛋白的检测 | 第41-43页 |
2.2.6 基质辅助激光解吸附飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测 | 第43页 |
2.2.7 圆二色光谱(CDS) 检测 | 第43页 |
2.3 实验结果 | 第43-49页 |
2.3.1 BMP2YKYKY的制备 | 第43-48页 |
2.3.2 BMP2YKYKY的表征 | 第48-49页 |
2.4 讨论 | 第49-50页 |
2.5 小结 | 第50-52页 |
第3章 固定化钛材料的制备 | 第52-68页 |
3.1 实验材料 | 第52-54页 |
3.1.1 主要器材和设备 | 第52-53页 |
3.1.2 主要试剂 | 第53页 |
3.1.3 试剂配制 | 第53-54页 |
3.1.4 实验多肽和钛材料 | 第54页 |
3.2 实验方法 | 第54-60页 |
3.2.1 钛片的清洗 | 第54-55页 |
3.2.2 酪氨酸羟化酶法制备黏附性BMP2XKXKX | 第55页 |
3.2.3 黏附性实验 | 第55-56页 |
3.2.4 液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS) | 第56-57页 |
3.2.5 酶联免疫吸附剂测定(ELISA) | 第57页 |
3.2.6 钛片的固定 | 第57页 |
3.2.7 扫描电子显微镜(SEM)观察固定化钛片表面形态 | 第57-58页 |
3.2.8 固定化钛片表面能谱(EDS)检测 | 第58页 |
3.2.9 黏附性BMP-2 固定能力检测 | 第58-60页 |
3.3 实验结果 | 第60-65页 |
3.3.1 酪氨酸羟化酶法制备黏附性BMP2XKXKX | 第60页 |
3.3.2 黏附性实验 | 第60-61页 |
3.3.3 LC-MS/MS结果 | 第61页 |
3.3.4 ELISA结果 | 第61-62页 |
3.3.5 固定化钛片SEM结果 | 第62-63页 |
3.3.6 固定化钛片EDS结果 | 第63页 |
3.3.7 黏附性BMP-2 固定能力检测结果 | 第63-65页 |
3.4 讨论 | 第65-66页 |
3.5 小结 | 第66-68页 |
第4章 固定化钛材料的生物学研究 | 第68-86页 |
4.1 实验材料 | 第68-71页 |
4.1.1 主要器材和设备 | 第68页 |
4.1.2 主要试剂 | 第68-69页 |
4.1.3 试剂配制 | 第69页 |
4.1.4 qPCR引物序列 | 第69-70页 |
4.1.5 实验细胞 | 第70页 |
4.1.6 实验动物 | 第70页 |
4.1.7 实验材料 | 第70-71页 |
4.2 实验方法 | 第71-77页 |
4.2.1 固定化钛片的体外生物学实验 | 第71-76页 |
4.2.2 固定化钛棒的体内生物学实验 | 第76-77页 |
4.3 实验结果 | 第77-83页 |
4.3.1 ALP活性实验结果 | 第77-78页 |
4.3.2 荧光素酶检测结果 | 第78-79页 |
4.3.3 茜素红染色结果 | 第79-80页 |
4.3.4 成骨相关基因的qPCR结果 | 第80-81页 |
4.3.5 固定化钛棒的表面形态观察 | 第81-82页 |
4.3.6 固定化钛棒钙元素积累 | 第82-83页 |
4.4 讨论 | 第83-84页 |
4.5 小结 | 第84-86页 |
第5章 研究总结 | 第86-88页 |
创新点 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-100页 |
作者简介及攻读学位期间所取得的科研成果 | 第100-104页 |
致谢 | 第104页 |