论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 英文缩略语 | 第15-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-28页 |
| 1 研究背景 | 第17页 |
| 2 研究现状 | 第17-25页 |
| 2.1 低血糖时脑代谢 | 第17-18页 |
| 2.2 低血糖时脑电图 | 第18页 |
| 2.3 低血糖脑损伤部位 | 第18-19页 |
| 2.4 低血糖性脑损伤的机制 | 第19-20页 |
| 2.5 糖缺乏与细胞死亡 | 第20-24页 |
| 2.6 蛋白组学与神经系统疾病研究 | 第24-25页 |
| 3 本项目研究路线 | 第25-26页 |
| 4 小结 | 第26-28页 |
| 第二章 基于iTRAQ技术的低血糖大鼠脑组织差异蛋白筛选 | 第28-67页 |
| 1 引言 | 第28-29页 |
| 2 实验材料 | 第29-35页 |
| 2.1 试剂 | 第29-31页 |
| 2.2 主要仪器 | 第31-32页 |
| 2.3 所用溶液及缓冲液配置 | 第32-35页 |
| 3 实验方法 | 第35-46页 |
| 3.1 低血糖动物模型的建立及分组 | 第35-37页 |
| 3.2 低血糖大鼠脑损伤检测 | 第37-40页 |
| 3.3 蛋白样品处理及iTRAQ样品标记 | 第40-43页 |
| 3.4 高pH反相色谱分离 | 第43-44页 |
| 3.5 LC-MS/MS纳升液相分离 | 第44-45页 |
| 3.6 质谱检测 | 第45-46页 |
| 3.7 质谱数据库搜索 | 第46页 |
| 4 实验结果 | 第46-64页 |
| 4.1 大鼠血糖、动脉血氧及脑电图监测 | 第46-48页 |
| 4.2 低血糖大鼠脑损伤评价 | 第48-50页 |
| 4.3 低血糖大鼠脑组织差异蛋白筛选结果 | 第50-64页 |
| 5 讨论 | 第64-66页 |
| 6 小结 | 第66-67页 |
| 第三章 低血糖大鼠脑组织差异蛋白AQP4、DJ-1、NDRG1、INPP4a、Clusterin的表达量验证 | 第67-101页 |
| 1 引言 | 第67-69页 |
| 2 材料 | 第69-74页 |
| 2.1 实验动物 | 第69页 |
| 2.2 主要试剂 | 第69-71页 |
| 2.3 仪器设备 | 第71页 |
| 2.4 主要溶液配制 | 第71-74页 |
| 3 实验方法 | 第74-85页 |
| 3.1 动物造模 | 第74页 |
| 3.2 细胞培养 | 第74-76页 |
| 3.3 AQP4、NDRG1、DJ-1、INPP4a和clusterin的mRNA表达检测 | 第76-79页 |
| 3.4 AQP4、NDRG1、DJ-1、INPP4a和Clusterin的蛋白表达量检测 | 第79-83页 |
| 3.5 免疫荧光染色 | 第83-85页 |
| 3.6 统计分析 | 第85页 |
| 4 实验结果 | 第85-95页 |
| 4.1 AQP4、NDRG1、DJ-1、INPP4a和Clusterin在低血糖大鼠脑组织的mRNA表达水平 | 第85-86页 |
| 4.2 AQP4、NDRG1、DJ-1、INPP4a和Clusterin在低血糖大鼠的蛋白表达水平 | 第86-88页 |
| 4.3 AQP4在低血糖大鼠脑组织的分布 | 第88-91页 |
| 4.4 原代大鼠星形胶质细胞鉴定 | 第91-92页 |
| 4.5 AQP4在缺糖培养星形胶质细胞上的表达及分布 | 第92-93页 |
| 4.6 DJ-1 在低血糖大鼠脑组织的分布 | 第93-94页 |
| 4.7 DJ-1 在低糖培养CTX-TNA2上的表达 | 第94-95页 |
| 5 讨论 | 第95-99页 |
| 6 小结 | 第99-101页 |
| 第四章 DJ-1 蛋白的生物学功能及相关机制探讨 | 第101-123页 |
| 1 引言 | 第101-102页 |
| 2 实验材料 | 第102-104页 |
| 2.1 主要试剂 | 第102-103页 |
| 2.2 主要仪器 | 第103-104页 |
| 2.3 溶液及缓冲液配制 | 第104页 |
| 3 实验方法 | 第104-108页 |
| 3.1 细胞培养及处理 | 第104页 |
| 3.2 si-RNA转染 | 第104-105页 |
| 3.3 细胞存活率检测 | 第105-106页 |
| 3.4 LDH释放检测 | 第106-107页 |
| 3.5 Calcein-AM / PI（Propidium Iodide）染色 | 第107-108页 |
| 3.6 Western Blot | 第108页 |
| 3.7 统计分析 | 第108页 |
| 4 实验结果 | 第108-119页 |
| 4.1 si-RNA转染效果检测 | 第108-109页 |
| 4.2 DJ-1 对低糖下CTX-TNA2起保护作用 | 第109-110页 |
| 4.3 低糖激活自噬 | 第110-113页 |
| 4.4 抑制自噬加重缺糖性星形胶质细胞损伤 | 第113-115页 |
| 4.5 沉默DJ-1 抑制低糖激活自噬 | 第115-116页 |
| 4.6 DJ-1 影响缺糖时AMPK的磷酸化 | 第116-117页 |
| 4.7 沉默DJ-1 增强缺糖时mTOR的活性 | 第117-118页 |
| 4.8 DJ-1 不通过Akt途径发挥保护作用 | 第118-119页 |
| 5 讨论 | 第119-122页 |
| 6 小结 | 第122-123页 |
| 第五章 全文总结和展望 | 第123-126页 |
| 1 全文总结 | 第123-124页 |
| 2 本课题创新点 | 第124页 |
| 3 今后工作展望 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-147页 |
| 攻读博士学位期间已发表或待发表论文及其他科研成果 | 第147-148页 |
| 致谢 | 第148-149页 |
