教育论文网

家蚕表达的霍乱病毒B亚基融合蛋白防治1型糖尿病和阿尔茨海默症研究

硕士博士毕业论文站内搜索    
分类1:教育论文网→医学卫生论文→内科学论文内分泌腺疾病及代谢病论文胰岛疾病论文糖尿病论文
分类2:教育论文网→医学卫生论文→神经病学与精神病学论文精神病学论文脑器质性精神障碍论文
家蚕表达的霍乱病毒B亚基融合蛋白防治1型糖尿病和阿尔茨海默症研究
论文目录
 
致谢第1-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-11页
缩写表第11-17页
第一部分 口服家蚕表达的胰岛素和谷氨酸脱羧酶65双抗原防治1型糖尿病研究第17-67页
1 引言第17-21页
  1.1 1型糖尿病第17-18页
  1.2 口服耐受第18-19页
  1.3 联合免疫疗法第19页
  1.4 本研究的目的与意义第19-21页
2 实验材料与方法第21-40页
  2.1 实验材料第21-25页
    2.1.1 实验动物第21页
    2.1.2 细胞系第21页
    2.1.3 质粒和细菌第21页
    2.1.4 抗体第21页
    2.1.5 实验耗材与设备第21-22页
    2.1.6 实验试剂第22页
    2.1.7 相关试剂配置第22-25页
  2.2 CTB-Ins-GAD和CTB-GAD-Ins杆状病毒的构建实验方法第25-33页
    2.2.1 CTB-Ins-GAD和CTB-GAD-Ins融合基因的构建第25-28页
    2.2.2 PCR产物凝胶回收第28页
    2.2.3 PCR产物连接PMD19-T载体第28页
    2.2.4 E.coli TG1感受态细胞的制备第28-29页
    2.2.5 连接产物转化大肠杆菌(TG1或DH10)第29页
    2.2.6 阳性克隆的扩大培养及质粒抽提第29页
    2.2.7 阳性质粒的酶切鉴定第29-30页
    2.2.8 重组杆状病毒质粒(Bacmid)构建第30-31页
    2.2.9 杆状病毒的获得与鉴定第31-33页
      2.2.9.1 家蚕卵巢细胞培养第31-32页
      2.2.9.2 杆状病毒(CTB-Ins-GAD/CTB-GAD-Ins)的获得第32页
      2.2.9.3 杆状病毒(CTB-Ins-GAD/CTB-GAD-Ins)的扩大培养第32-33页
      2.2.9.4 杆状病毒(CTB-Ins-GAD/CTB-GAD-Ins)感染能力测定第33页
      2.2.9.5 杆状病毒(CTB-Ins-GAD/CTB-GAD-Ins)基因组提取第33页
      2.2.9.6 杆状病毒(CTB-Ins-GAD/CTB-GAD-Ins)PCR鉴定第33页
  2.3 融合蛋白的表达实验方法第33-36页
    2.3.1 融合蛋白在家蚕卵巢细胞中的表达第33-34页
    2.3.2 融合蛋白在蚕蛹中的表达第34页
    2.3.3 Western blot实验方法第34-35页
    2.3.4 ELlSA法测定表达量第35-36页
    2.3.5 GM1-ELISA测定融合蛋白的GM1结合力第36页
  2.4 口服融合蛋白防治T1D实验方法第36-40页
    2.4.1 抗体及抗体亚型滴度检测第36-37页
    2.4.2 胰腺组织切片第37页
    2.4.3 口服CTB-Ins-GAD和CTB-GAD-Ins防治T1D效果检测第37页
    2.4.4 Th1/Th2细胞ELISPOT分析第37-38页
    2.4.5 IL-4/IFN-γ细胞因子浓度检测第38页
    2.4.6 CD4+CD25+Foxp3+T细胞分析第38页
    2.4.7 脾脏淋巴细胞体外增值能力分析第38-39页
    2.4.8 脾脏淋巴细胞体外迁移能力分析第39页
    2.4.9 过继转移实验方法第39-40页
3 实验结果与分析第40-64页
  3.1 获得CTB-GAD、CTB-Ins、GAD、Ins片段第40页
  3.2 构建CTB-GAD-Ins/CTB-Ins-GAD融合基因第40-41页
  3.3 构建Bacmid(CTB-GAD-Ins/CTB-Ins-GAD)载体第41-45页
    3.3.1 pBac(CTB-GAD-Ins/CTB-Ins-GAD)载体构建和鉴定第41-42页
    3.3.2 重组Bacmid质粒的构建与鉴定第42-43页
    3.3.3 重组杆状病毒的获得及鉴定第43-44页
    3.3.4 BmV-CTB-GAD-Ins和BmV-CTB-Ins-GAD病毒滴度检测第44-45页
  3.4 融合蛋白的表达及鉴定第45-48页
    3.4.1 融合蛋白在家蚕细胞和蚕蛹高效表达第45-46页
    3.4.2 Western Blot分析融合蛋白表达第46-47页
    3.4.3 GM1结合ELISA检测蛋白活性第47-48页
  3.5 口服CTB-GAD-Ins/CTB-Ins-GAD减轻胰岛炎第48-50页
  3.6 口服CTB-GAD-Ins/CTB-Ins-GAD降低糖尿病发病率第50-51页
  3.7 口服CTB-GAD-Ins/CTB-Ins-GAD诱导胰岛素和GAD特异性的Th2型免疫反应第51-53页
  3.8 口服CTB-GAD-Ins/CTB-Ins-GAD诱导Th1向Th2型转化第53-56页
  3.9 口服CTB-GAD-Ins/CTB-Ins-GAD增加调节性T细胞分化第56-58页
  3.10 口服CTB-GAD-Ins/CTB-Ins-GAD抑制脾脏T细胞增殖第58-60页
  3.11 口服CTB-GAD-Ins/CTB-Ins-GAD抑制脾脏T细胞迁移第60-62页
  3.12 口服CTB-GAD-Ins/CTB-Ins-GAD诱导NOD小鼠产生调节性T细胞第62-64页
4 讨论第64-67页
第二部分 口服家蚕表达的霍乱病毒B亚基与双拷贝Aβ42融合蛋白防治阿尔茨海默症研究第67-99页
1 引言第67-71页
  1.1 阿尔茨海默症第67页
  1.2 阿尔茨海默症的治疗第67-69页
    1.2.1 传统疗法第67-68页
    1.2.2 免疫疗法第68-69页
  1.3 本研究的目的意义第69-71页
2 实验材料与方法第71-76页
  2.1 实验材料第71-72页
    2.1.1 实验动物第71页
    2.1.2 细胞系第71页
    2.1.3 质粒和细菌第71页
    2.1.4 抗体第71页
    2.1.5 实验耗材与设备第71页
    2.1.6 实验试剂第71-72页
    2.1.7 相关试剂配置第72页
  2.2 重组病毒的构建和鉴定实验方法第72页
    2.2.1 融合基因的构建第72页
  2.3 融合蛋白的表达与鉴定第72页
  2.4 血清特异性抗体及抗体亚型的滴度检测第72页
  2.5 AD小鼠行为学检测实验方法第72-74页
    2.5.1 水迷宫检测第72-73页
    2.5.2 旷场实验第73页
    2.5.3 Y-迷宫实验第73-74页
  2.6 小鼠脑中Aβ含量的检测第74页
  2.7 小鼠大脑老年斑块的形态学检测第74-75页
  2.8 小鼠脑中细胞因子浓度的检测第75-76页
3 实验结果与分析第76-97页
  3.1 构建CTB-(Aβ42)_2融合基因第76页
  3.2 构建包含CTB-(Aβ42)_2融合基因的Bacmid载体第76-79页
    3.2.1 pFastBacl载体构建与鉴定第76-77页
    3.2.2 重组Bacmid质粒的构建与鉴定第77页
    3.2.3 重组杆状病毒的获得及鉴定第77-79页
    3.2.4 BmNPV-CTB-(Aβ42)_2病毒滴度检测第79页
  3.3 重组融合蛋白的表达及鉴定第79-82页
    3.3.1 重组融合蛋白在家蚕细胞和蚕蛹高效表达第79-80页
    3.3.2 Western Blot分析融合蛋白表达第80-81页
    3.3.3 GM1结合ELISA检测蛋白活性第81-82页
  3.4 AD小鼠血清抗体滴度检测第82-83页
  3.5 AD小鼠行为学检测第83-90页
    3.5.1 Morris水迷宫实验第83-87页
    3.5.2 旷场实验第87-88页
    3.5.3 Y-迷宫实验第88-90页
  3.6 口服CTB-(Aβ42)_2减少小鼠血清和脑组织Aβ水平检测第90-91页
  3.7 口服CTB-(Aβ42)_2减少AD小鼠大脑皮层和海马区老年斑面积第91-92页
  3.8 小鼠脑组织细胞因子检测第92-93页
  3.9 口服CTB-(Aβ42)_2改善AD小鼠PI3K/AKT信号通路第93-94页
  3.10 口服CTB-(Aβ42)_2降低小鼠Tau蛋白磷酸化水平第94-97页
4 讨论第97-99页
结论与展望第99-100页
参考文献第100-112页
作者简历第112页

本篇论文共112页,点击这进入下载页面
 
更多论文
家蚕表达的霍乱病毒B亚基融合蛋白防
C设计院双路径多通道职位管理的薪酬
2型糖尿病膳食营养干预防治策略的研
山东信发集团员工激励优化方案设计
超声联合微泡介导CXCR-4转染BMSCs靶
员工组织公平感与工作绩效相关性研
重庆市社区糖尿病干预现状及新型模
XY集团新生代员工关系管理策略研究
Z公司绩效管理的改进及其应用研究
抗糖尿病药物中激活Nrf2通路的抗氧
基于AHP的房地产企业人力资源管理绩
母系遗传2型糖尿病相关的线粒体tRN
新华人寿保险股份有限公司聊城中心
糖尿病与肝移植相互影响及机制
基于过程管理的A公司计时人员绩效评
矢车菊素-3-葡萄糖苷改善异种移植的
信息技术行业上市公司股权激励实施
生理电场在糖尿病创面愈合中的作用
J公司研发部门绩效管理体系的优化研
糖尿病小鼠肾小球入球动脉对内皮素
创业板上市公司股权激励机制问题研
SZ港口物流集团有限公司竞争战略研
Rho激酶抑制剂法舒地尔通过调控心肌
H发电厂部门绩效考核方案设计
P2X7受体介导2型糖尿病
W公司驻外机构的技术支持人员的绩效
miR-26a和miR-30c协同调控TGF β1诱
S公司项目团队绩效管理体系研究
STZ致β细胞极端损伤条件下α细胞向
上市公司股权激励的动机与经济后果
J公司知识型员工的招聘及激励方案研
miR-182调控糖尿病性骨质疏松大鼠骨
ATMO3公司项目管理人员绩效考核体系
农村地区成人2型糖尿病发生风险相关
风险投资、风险投资机构特征与企业
垂体柄中断综合征患者临床特征与基
H公司管理人员薪酬体系优化研究
间充质干细胞基因治疗甲状旁腺功能
变革型领导对员工创造力的影响:团队
团队建言氛围的形成机制和效能—团
假性甲状旁腺功能减退症的临床及遗
ERP环境下K公司内部控制研究
自身免疫性甲状腺炎对IVF临床结局的
A半导体企业技术人才流失对策研究
胰腺急重症早期超声介入微创治疗技
A企业班组长培训改进研究
胆囊隆起性病变的致病危险因素分析
HB公司薪酬体系优化设计研究
绝经后女性血清维生素D水平与腹型肥
管理层持股与公司业绩的关系研究—
FGF21对非酒精性脂肪肝发生的预测作
A银行苏州分行员工满意度研究
非酒精性脂肪肝斑马鱼模型的建立及
G企业ERP实施的问题及解决方案
D公司事业部绩效考核方案优化研究
乙肝HBx蛋白上调CD147介导肝纤维化
团队建言氛围对建言行为的影响研究
非病毒性肝病纤维化及免疫学发病机
HTT公司海外投资风险防范研究
凝血酶切割骨桥蛋白在肝纤维化中的
动产质押的风险控制研究——基于钢
代谢因素在住院肝硬化患者相关临床
企业家社会资本、动态能力和企业绩
经血干细胞治疗肝纤维化及其作用机
面向中小企业培训的云服务平台模式
薪酬管理公平性对员工工作绩效的实
腺病毒介导的MMP-8截短体融合HGF双
麦德龙(中国)现购自运有限公司发展
调节性T细胞在原发性胆汁性肝硬化中
苏州W企业“80后外来生产线员工”消
磁共振多翻转角T1 mapping及动态对
我国民营上市公司高管薪酬差距与过
芳香烃受体-CD36信号路径在高同型半
ERP的实施对投资效率的影响——基于
中国农业银行苏州分行合规风险管理
SND1转基因小鼠改善高脂饮食诱导的
中小型产险公司理赔人员绩效考核体
寻找小分子物质稳定角蛋白结构保护
汇丰银行中国有限公司经营效率的研
炎症体对肝脏天然免疫的调控及机制
M公司知识型员工的激励改善——基于
胚胎肝干细胞胆向分化的分子标志特
国企高管—员工薪酬差距对生产率和
新型CD4~+辅助T细胞及其效应细胞因
A公司实验室的资源管理效率研究
A房地产公司项目团队人力资源管理研
凝血失衡在内脏静脉血栓中的作用及
GF轱辘(苏州)有限公司发展战略研
尿酸在非酒精性脂肪性肝病中的作用
东吴创投项目风险管理问题研究——
非酒精性脂肪性肝病的发病机制及生
某市级电力企业人力资源结构优化研
真皮来源间充质细胞移植促进小鼠肝
DKC公司整合型管理体系方案研究
家族上市公司高管性质与高管薪酬、
经血来源宫内膜干细胞的特征研究及
基于知识地图的异质型人力资本隐性
β-连环蛋白在TNF-α和Fas诱导急性
变革型领导对高新技术企业研发人员
根皮素和根皮素异烟酰基腙防治急性
我国外资企业知识型员工离职倾向研
CD24分子在刀豆蛋白A诱导小鼠急性肝
组织吸引力、组织承诺与离职倾向的
企业的校园雇主品牌建设研究——以
靶向脂质纳泡在肝脏缺血再灌注损伤
汽配生产企业发展模式研究——以瑞
溃疡性结肠炎发病特征及肠黏膜和血
G&G公司技能员工资源管理及发展对策
胶囊内镜、双气囊小肠镜和小肠CT在
戴尔中国公司发展战略研究
SOCS3促溃疡性结肠炎肠道炎症复发的
搜狐家居的发展战略方向研究
脊髓钾氯共同转运体亚型2在肠易激综
E气动公司发展战略研究
粪微生态制品移植与溃疡性结肠炎血
JH集团发展战略研究
镇静对小肠胶囊内镜检查的影响
安庆市绿油油融资担保有限公司发展
宁波柯力公司人力资源管理体系建设
功能性便秘患者肠道和肛门直肠功能
BL餐饮有限公司管理团队冲突研究
Raf激酶抑制蛋白RKIP在炎症性肠炎中
跨国企业核心技术人员满意度分析及
骶神经刺激治疗慢传输型便秘及其机
我国体育上市公司社会责任履行与企
内镜下胃黏膜疣状变化相关因素病例
 
1型糖尿病论文 霍乱毒素B亚基论文 胰岛素论文 谷氨酸脱羧酶65论文 口服耐受论文 阿尔茨海默症论文 β样淀粉蛋白论文 免疫疗法论文
版权申明:目录由用户zhulichinali**提供,www.51papers.com仅收录目录,作者需要删除这篇论文目录请点击这里
| 设为首页||加入收藏||站内搜索引擎||站点地图||在线购卡|
版权所有 教育论文网 Copyright(C) All Rights Reserved