论文目录 | |
中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-16页 |
中英文缩略词对照表 | 第16-19页 |
第1 章文献综述 | 第19-31页 |
1.1 诱导多能干细胞的定义与意义 | 第19-21页 |
1.1.1 诱导多能干细胞的定义 | 第19-20页 |
1.1.2 诱导多能干细胞的意义 | 第20-21页 |
1.2 诱导多能干细胞的进展 | 第21-28页 |
1.2.1 诱导多能干细胞的方法进展 | 第21-23页 |
1.2.2 诱导多能干细胞过程中机制的研究进展 | 第23-28页 |
1.3 丙戊酸 | 第28页 |
1.4 硫酸铜 | 第28页 |
1.5 小结及本研究选题依据 | 第28-31页 |
第2章 实验研究 1:丙戊酸促进小鼠成纤维细胞重编程 | 第31-47页 |
2.1 前言 | 第31-32页 |
2.2 实验材料 | 第32-34页 |
2.2.1 主要仪器 | 第32-33页 |
2.2.2 主要材料 | 第33-34页 |
2.3 实验方法 | 第34-40页 |
2.3.1 OSKM质粒的扩增 | 第34-35页 |
2.3.2 OSKM质粒的小量提取 | 第35页 |
2.3.3 绿色荧光蛋白质粒(p Green质粒)扩增与小量提取 | 第35页 |
2.3.4 293T细胞的培养、传代、冻存与复苏 | 第35-36页 |
2.3.5 慢病毒包装 | 第36页 |
2.3.6 MBW-2 细胞的复苏、培养、传代与冻存 | 第36-37页 |
2.3.7 滋养层细胞制备 | 第37-38页 |
2.3.8 重编程 | 第38-39页 |
2.3.9 碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, AP)染色 | 第39页 |
2.3.10 衰老相关 β-gal染色 | 第39-40页 |
2.3.11 统计学分析 | 第40页 |
2.4 实验结果 | 第40-43页 |
2.4.1 小鼠胚胎原代成纤维细胞的培养 | 第40-41页 |
2.4.2 AP染色 | 第41-42页 |
2.4.3 衰老相关 β-gal染色 | 第42-43页 |
2.5 讨论 | 第43-46页 |
2.6 小结 | 第46-47页 |
第3章 实验研究 2:丙戊酸对小鼠成纤维细胞衰老的影响 | 第47-63页 |
3.1 前言 | 第47页 |
3.2 实验材料 | 第47页 |
3.2.1 主要仪器 | 第47页 |
3.2.2 主要材料 | 第47页 |
3.3 实验方法 | 第47-51页 |
3.4 实验结果 | 第51-59页 |
3.4.1 不同浓度Cu SO4处理 24 h后细胞的存活率不同 | 第51-53页 |
3.4.2 MBW-2 细胞的形态 | 第53-54页 |
3.4.3 MDFs的形态 | 第54-55页 |
3.4.4 MBW-2 细胞衰老相关 β-gal染色 | 第55-56页 |
3.4.5 MDFs衰老相关 β-gal染色 | 第56-57页 |
3.4.6 BDFs衰老相关 β-gal染色 | 第57页 |
3.4.7 SRB法检测MBW-2 细胞和MDFs的增殖 | 第57-59页 |
3.5 讨论 | 第59-61页 |
3.6 小结 | 第61-63页 |
第4章 实验研究 3:丙戊酸抑制衰老的机制探究 | 第63-83页 |
4.1 前言 | 第63页 |
4.2 实验材料 | 第63-65页 |
4.2.1 主要仪器 | 第63-64页 |
4.2.2 主要材料 | 第64-65页 |
4.3 实验方法 | 第65-73页 |
4.3.1 细胞周期 | 第65-66页 |
4.3.2 全RNA提取 | 第66-67页 |
4.3.3 c DNA合成 | 第67页 |
4.3.4 PCR | 第67-68页 |
4.3.5 q PCR | 第68页 |
4.3.6 Western blot | 第68-73页 |
4.3.7 统计学分析 | 第73页 |
4.4 实验结果 | 第73-77页 |
4.4.1 VPA解除Cu SO4导致的细胞周期阻滞 | 第73-75页 |
4.4.2 VPA抑制Cu SO4导致的衰老相关基因上调 | 第75-77页 |
4.4.3 Western blot | 第77页 |
4.5 讨论 | 第77-81页 |
4.6 小结 | 第81-83页 |
第5章 结论 | 第83-85页 |
课题创新性总结 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-101页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第101-103页 |
致谢 | 第103页 |