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FOXC1抑制乳腺癌体内肺转移及CARM1通过位点特异性甲基化HP1γ抑制肿瘤细胞的衰老和SAHF

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FOXC1抑制乳腺癌体内肺转移及CARM1通过位点特异性甲基化HP1γ抑制肿瘤细胞的衰老和SAHF
论文目录
 
中文摘要第1-4页
英文摘要第4-8页
第一部分FOXC1在体内,体外抑制MDA-MB-231HM的转移第8-43页
引言第8-22页
一、乳腺癌恶性转移相关机制研究进展第8-16页
(一)乳腺癌转移机制研究进展第8-12页
(二)转移相关因子的研究现状第12-16页
二、FOX转录因子家族简介第16-20页
(一)FOX家族成员第16-18页
(二)FOX家族蛋白的主要功能第18-19页
(三)FOXC1基因及功能研究进展第19-20页
三、本论文研究的内容和意义第20-22页
(一)立题依据第20-21页
(二)本论文的研究内容和意义第21-22页
实验材料与方法第22-32页
一、实验材料第22页
(一)质粒第22页
(二)蛋白质和抗体第22页
(三)哺乳动物细胞系及裸鼠第22页
(四)试剂第22页
二、实验方法第22-32页
Ⅰ.分子生物学实验方法第22-26页
(一)分子克隆第22页
(二)DNA的琼脂糖电泳第22-23页
(三)质粒大量制备的方法第23-24页
(四)哺乳动物细胞总RNA的提取和反转录第24-26页
  II. 细胞生物学实验方法第26-30页
(一)哺乳动物细胞系的培养第26页
(二)真核生物细胞系的瞬时转染和稳定转染第26-27页
(三)蛋白质的Western Blot分析第27-29页
(四)细胞体外划痕实验第29页
(五)肿瘤细胞迁移和侵袭实验第29-30页
  Ⅲ. 裸鼠相关实验方法第30-31页
(一)肺高转移细胞的筛选和建系第30页
(二)尾静脉(tail vein)接种方法检测癌细胞向肺转移第30-31页
(三)乳腺脂肪垫(the mammary fat pad)原位接种方法检测癌细胞向肺转移第31页
  Ⅳ. 统计分析第31-32页
实验结果与分析第32-39页
一、FOXC1抑制MDA-MB-231HM细胞体外的迁移和侵袭第32-36页
(一)自发性肺高转移特性的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231HM第32页
(二)FOXC1在肺高转移细胞株MDA-MB-231HM中的表达第32-33页
(三)MDA-MB-231HM-FOXC1稳定转染细胞系的建立第33-34页
(四)FOXC1抑制MDA-MB-231HM细胞的迁移第34-35页
(五)FOXC1抑制MDA-MB-231HM细胞的侵袭第35-36页
二、FOXC1抑制MDA-MB-231HM细胞在裸鼠体内的转移第36-39页
( 一 ) 尾静脉 ( tail vein ) 接种方法检测FOXC1抑 制乳腺癌细胞系MDA-MB-231HM向肺转移第36-37页
(二)乳腺脂肪垫(the mammary fat pad)原位接种方法检测FOXC1抑制乳腺癌细胞系MDA-MB-231HM向肺转移第37-39页
讨论第39-43页
一、乳腺癌转移模型的建立及其应用第39-41页
二、FOXC1参与抑制乳腺癌的转移第41-42页
三、FOXC1在恶性乳腺癌中的预后判断作用第42-43页
第二部分CARM1通过位点特异性甲基化HP1γ 抑制肿瘤细胞的衰老和SAHF第43-82页
引言第43-53页
一、细胞衰老与肿瘤关系第43-47页
(一)细胞衰老的介绍第43-44页
(二)衰老与肿瘤的相关性第44-47页
二、衰老相关的异染色质凝集现象第47-50页
三、精氨酸甲基化家族简介第50-51页
四、本论文研究的内容和意义第51-53页
(一)立题依据第51页
(二)本论文的研究内容和意义第51-53页
实验材料与方法第53-65页
一、实验材料第53页
(一)质粒第53页
(二)抗体与蛋白质第53页
(三)哺乳动物细胞系第53页
(四)实验试剂第53页
二、实验方法第53-65页
Ⅰ.分子生物学实验方法第53-54页
Ⅱ 细胞生物学实验方法第54-65页
(一)哺乳动物细胞系的培养第54页
(二)慢病毒体系的建立第54页
(三)流式细胞术第54页
(四)免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation assay, CoIP)实验第54-55页
(五)衰老染色实验第55-56页
(六)BrdU掺入实验第56-57页
(七) 慢病毒表达质粒的构建第57-62页
(八)慢病毒干涉载体的构建第62-64页
(九)慢病毒包装及侵染第64-65页
实验结果与分析第65-78页
一、CARM1参与乳腺癌细胞MDA-MB-231的衰老及衰老相关的异染色质凝集(SAHF)第65-70页
二、CARM1参与抑制阿霉素诱导细胞衰老及SAHF形成的分子机制第70-78页
(一) 干涉CARM1诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞衰老及SAHF第70-73页
(二) CARM1通过与HP1γ 作用来影响MDA-MB-231的衰老及SAHF形成第73-74页
(三) CARM1通过甲基化HP1γ 特异性位点来发挥作用第74-78页
讨论第78-82页
一、衰老及SAHF的关系第78-79页
二、CARM1在衰老和SAHF中的新功能第79-80页
三、CARM1的新底物HP1γ 及对HP1γ 的91位精氨酸的单甲基化修饰第80-81页
四、HP1γ 的91位精氨酸甲基化可能影响93位丝氨酸的磷酸化第81-82页
主要结论和创新点第82-83页
一、主要结论第82页
二、主要创新点第82-83页
参考文献第83-95页
附录第95-96页
致谢第96-97页
在学期间公开发表论文及著作情况第97页

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