论文目录 | |
中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第1章 文献综述 | 第13-23页 |
1.1 乳腺癌 | 第13-16页 |
1.1.1 乳腺癌发病 | 第13页 |
1.1.2 乳腺癌分型 | 第13-14页 |
1.1.3 乳腺癌的治疗现状 | 第14页 |
1.1.4 乳腺癌与miRNA | 第14-16页 |
1.2 Micro RNA(miRNA) | 第16-21页 |
1.2.1 miRNA简介 | 第16页 |
1.2.2 miRNA的命名原则 | 第16-17页 |
1.2.3 miRNA的作用机制 | 第17页 |
1.2.4 miRNA靶基因预测方法 | 第17-18页 |
1.2.5 miRNA功能筛选与分析 | 第18-19页 |
1.2.6 miRNA与肿瘤的关系 | 第19-21页 |
1.2.7 miR-199与肿瘤关系 | 第21页 |
1.3 PAK4与肿瘤的关系 | 第21-23页 |
第2章 实验材料与方法 | 第23-41页 |
2.1 实验材料 | 第23-32页 |
2.1.1 实验仪器 | 第23-24页 |
2.1.2 实验试剂 | 第24-26页 |
2.1.3 试剂配制 | 第26-32页 |
2.2 实验方法 | 第32-41页 |
2.2.1 细胞培养(Cell culture) | 第32-33页 |
2.2.2 脂质体转染(Transfection) | 第33页 |
2.2.3 细胞RNA提取(RNA isolation) | 第33-34页 |
2.2.4 实时荧光定量PCR检测(qRT-PCR) | 第34-35页 |
2.2.5 蛋白免疫印迹法(Western Blot) | 第35-36页 |
2.2.6 基因沉默质粒和真核基因表达载体的构建(Plasmid construction) | 第36-37页 |
2.2.7 细胞增殖实验(MTT assay) | 第37页 |
2.2.8 细胞划痕实验(Wound healing) | 第37页 |
2.2.9 Transwell小室侵袭及迁移实验(Matrigel invasion and Migration) | 第37-38页 |
2.2.10 流式细胞术检测细胞周期(Cell cycle assay) | 第38页 |
2.2.11 荧光素酶活性检测(Luciferase reportor assay) | 第38-40页 |
2.2.12 统计学分析(Statistical Analysis) | 第40-41页 |
第3章 实验结果 | 第41-61页 |
3.1 乳腺癌细胞系中miR-199a/b-3p的表达水平 | 第41页 |
3.2 乳腺癌细胞株MDA-MB-231转染miR-199a/b-3p mimics后miR-199a/b-3p的表达 | 第41-42页 |
3.3 上调MDA-MB-231细胞中miR-199a/b-3p的表达对细胞生长增殖能力的影响 | 第42-44页 |
3.4 上调MDA-MB-231细胞中miR-199a/b-3p的表达对细胞周期蛋白的影响 | 第44-45页 |
3.5 上调MDA-MB-231细胞中miR-199a/b-3p的表达对细胞迁移能力的影响 | 第45-47页 |
3.6 上调MDA-MB-231细胞中miR-199a/b-3p的表达对细胞侵袭能力的影响 | 第47-48页 |
3.7 PAK4是miR-199a/b-3p的直接靶基因 | 第48-50页 |
3.8 在MDA-MB-231细胞中转染miR-199a/b-3p mimics对PAK4的m RNA水平和蛋白质表达影响 | 第50-51页 |
3.9 PAK4基因表达沉默后对乳腺癌细胞生长增殖的影响 | 第51-54页 |
3.10 PAK4基因表达沉默后对乳腺癌细胞迁移侵袭能力的影响 | 第54-57页 |
3.11 PAK4过表达可以恢复miR-199a/b-3p对乳腺癌细胞的抑制功能 | 第57-61页 |
第4章 讨论 | 第61-65页 |
第5章 结论 | 第65-67页 |
创新点 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-77页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第77-79页 |
致谢 | 第79页 |