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层状组装多层膜用于促进内皮化的研究——从内皮细胞竞争性到内皮功能

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层状组装多层膜用于促进内皮化的研究——从内皮细胞竞争性到内皮功能
论文目录
 
致谢第1-7页
摘要第7-9页
ABSTRACT第9-17页
第一章 绪论第17-38页
  1.1 心血管疾病的介入治疗与再狭窄概述第17-21页
    1.1.1 心血管疾病与介入治疗第17-19页
    1.1.2 再狭窄发生的病理第19-20页
    1.1.3 药物洗脱支架及其面临的问题第20-21页
  1.2 植入材料表面原位内皮化第21-28页
    1.2.1 血管的组织结构与内皮细胞的重要性第21-22页
    1.2.2 构建促进内皮细胞生长的表面的研究第22-25页
    1.2.3 提升内皮细胞相对于平滑肌细胞的竞争性第25-26页
    1.2.4 维持内皮层的内皮功能第26-28页
  1.3 细胞外基质的物理因素—硬度第28-31页
    1.3.1 硬度对于内皮细胞生长的影响第29页
    1.3.2 硬度对于内皮功能的影响第29-31页
  1.4 层状组装多层膜及其在生物医疗领域的应用第31-35页
    1.4.1 层状组装的概述第31-32页
    1.4.2 层状组装多层膜负载生物活性分子的研究第32-33页
    1.4.3 层状组装多层膜硬度调控细胞行为的研究第33-35页
  1.5 课题提出与设计思路第35-38页
    1.5.1 课题提出第35-36页
    1.5.2 具体设计思路第36-38页
第二章 功能基因多层膜提升内皮细胞相对于平滑肌细胞的竞争性第38-56页
  2.1 引言第38-39页
  2.2 实验部分第39-43页
    2.2.1 原料与试剂第39页
    2.2.2 (PrS/DNA)多层膜的构建第39-40页
    2.2.3 (PrS/DNA)多层膜的表征第40页
    2.2.4 细胞的培养第40-41页
    2.2.5 EC和SMC的转染实验第41页
    2.2.6 EC和SMC的增殖实验第41页
    2.2.7 EC和SMC的共培养实验第41-42页
    2.2.8 功能基因多层膜心血管支架的构建第42页
    2.2.9 功能基因多层膜修饰后支架的动物体内实验第42-43页
  2.3 结果与讨论第43-55页
    2.3.1 多层膜的构建与表征第43-45页
      2.3.1.1 QCM-D跟踪多层膜的组装第43页
      2.3.1.2 (PrS/HGF-pDNA)_n多层膜的厚度第43页
      2.3.1.3 (PrS/HGF-pDNA)_n多层膜的稳定性第43-44页
      2.3.1.4 (PrS/HGF-pDNA)_n多层膜的表面形貌第44-45页
    2.3.2 (PrS/HGF-pDNA)_(12)多层膜对EC和SMC的转染第45-46页
    2.3.3 EC和SMC的增殖第46-48页
    2.3.4 (PrS/HGF-pDNA)_(12)多层膜对EC和SMC竞争性的影响第48-51页
    2.3.5 (PrS/HGF-pDNA)_(12)多层膜修饰心血管支架及其体内的评价第51-55页
      2.3.5.1 (PrS/HGF-pDNA)_(12)多层膜修饰后支架的表面形貌第51-52页
      2.3.5.2 (PrS/HGF-pDNA)_(12)多层膜支架表面内皮化的评价第52-53页
      2.3.5.3 (PrS/HGF-pDNA)_(12)多层膜支架抗再狭窄效果的评价第53-55页
  2.4 本章小结第55-56页
第三章 软硬材料复合策略实现内皮细胞的选择性粘附第56-73页
  3.1 引言第56-57页
  3.2 实验部分第57-59页
    3.2.1 原料与试剂第57页
    3.2.2 下层基底的准备第57-58页
    3.2.3 (PrS/DNA)_n多层膜的制备第58页
    3.2.4 (PrS/DNA)_n多层膜的表征第58页
    3.2.5 细胞的培养第58-59页
    3.2.6 EC和SMC的粘附实验第59页
    3.2.7 EC和SMC的共培养实验第59页
  3.3 结果与讨论第59-72页
    3.3.1 (PrS/DNA)_n多层膜的构建与表征第59-61页
    3.3.2 EC和SMC的粘附第61-64页
    3.3.3 EC/SMC的选择性粘附第64-65页
    3.3.4 (PAH/PSS)_n多层膜表面的EC选择性粘附第65-66页
    3.3.5 PET与SS代替玻璃基底实现EC的选择性粘附第66-67页
    3.3.6 调控细胞粘附的因素第67-70页
    3.3.7 不同硬度下层基底构建(PrS/DNA)_n多层膜实现EC的选择性粘附第70-72页
  3.4 本章小结第72-73页
第四章 生长因子协同基底硬度对内皮细胞的生长和内皮功能的影响第73-90页
  4.1 引言第73页
  4.2 实验部分第73-77页
    4.2.1 原料与试剂第73-74页
    4.2.2 多层膜的组装和交联第74页
    4.2.3 细胞的培养第74页
    4.2.4 EC的粘附实验第74-75页
    4.2.5 EC的迁移实验第75页
    4.2.6 EC的增殖实验第75页
    4.2.7 免疫蛋白印迹分析第75-76页
    4.2.8 内皮层的表征第76-77页
      4.2.8.1 内皮层形貌的表征第76页
      4.2.8.2 内皮层致密性的表征第76页
      4.2.8.3 eNOS基因表达的检测第76-77页
  4.3 结果与讨论第77-89页
    4.3.1 EC的粘附第77-81页
    4.3.2 EC的迁移第81-83页
    4.3.3 EC的增殖第83-84页
    4.3.4 EC的HGF受体表达第84-85页
    4.3.5 内皮层的评价第85-89页
      4.3.5.1 内皮层的形貌第85-86页
      4.3.5.2 内皮层的致密性第86-87页
      4.2.5.3 eNOS的基因表达第87-89页
  4.4 本章小结第89-90页
第五章 柔性多层膜负载VEGF提升内皮细胞的竞争性与内皮功能第90-113页
  5.1 引言第90-91页
  5.2 实验部分第91-96页
    5.2.1 原料与试剂第91页
    5.2.2 多层膜的组装与交联第91-92页
    5.2.3 VEGF的负载第92页
    5.2.4 细胞的培养第92页
    5.2.5 EC与SMC的粘附实验第92-93页
    5.2.6 EC/SMC的共培养实验第93页
    5.2.7 EC与SMC的增殖实验第93页
    5.2.8 内皮层的表征第93-96页
      5.2.8.1 内皮层的形貌及致密性的表征第94页
      5.2.8.2 一氧化氮(NO)的检测第94页
      5.2.8.3 内皮功能相关的基因检测第94-96页
  5.3 结果与讨论第96-112页
    5.3.1 VEGF的负载第96-97页
    5.3.2 EC的粘附第97-99页
    5.3.3 SMC的粘附第99-101页
    5.3.4 EC与SMC的VEGF受体对粘附的影响第101-103页
    5.3.5 EC/SMC的选择性粘附第103-104页
    5.3.6 EC与SMC的增殖第104-106页
    5.3.7 内皮层的形貌及其致密性第106-109页
    5.3.8 内皮层NO的分泌第109页
    5.3.9 内皮功能相关基因的表达第109-112页
  5.4 本章小结第112-113页
第六章 全文主要结论、创新和展望第113-115页
参考文献第115-134页
附录Ⅰ 人类脐静脉内皮细胞的提取和培养第134-135页
附录Ⅱ 人类脐动脉平滑肌细胞的提取和培养第135-136页
附录Ⅲ 细胞免疫荧光染色第136-137页
附录Ⅳ 免疫蛋白印迹(Western Blotting)第137-140页
附录Ⅴ qRT-PCR实验步骤第140-151页
作者简介第151-154页

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