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不同来源果胶多糖的结构解析及抗肿瘤活性研究

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不同来源果胶多糖的结构解析及抗肿瘤活性研究
论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-16页
第一章 前言第16-46页
1 果胶类物质第16-30页
  1.1 果胶的组成和结构第16-19页
    1.1.1 光滑区(HG)结构第17-18页
    1.1.2 木糖区(XGA)结构第18页
    1.1.3 须状区(RG-Ⅰ)结构第18-19页
    1.1.4 须状区(RG-Ⅱ)结构第19页
  1.2 传统中药材来源的果胶结构及生物活性第19-23页
    1.2.1 柴胡果胶第19-20页
    1.2.2 当归果胶第20-21页
    1.2.3 人参果胶第21-23页
    1.2.4 甘草果胶第23页
  1.3 水生植物来源果胶的结构及生物活性第23-26页
    1.3.1 淡水植物浮萍多糖Lemnan第24页
    1.3.2 海洋来源大叶藻胶Zosterin第24-26页
  1.4 果胶的抗肿瘤活性第26-29页
  1.5 果胶的消化、吸收以及安全性评价第29-30页
2 质谱法研究果胶类物质结构第30-37页
  2.1 质谱在糖结构解析中的应用第30页
  2.2 串联质谱鉴定糖苷键类型第30-35页
    2.2.1 1→2连接寡糖的串联质谱环内断裂规律第31-32页
    2.2.2 1→3连接寡糖的串联质谱环内断裂规律第32-33页
    2.2.3 1→4连接寡糖的串联质谱环内断裂规律第33页
    2.2.4 1→6连接寡糖的串联质谱环内断裂规律第33-35页
    2.2.5 呋喃型糖环的串联质谱环内断裂规律第35页
  2.3 质谱在果胶结构解析中的应用第35-37页
    2.3.1 HG区域的质谱序列分析第35页
    2.3.2 XG区域的质谱序列分析第35-36页
    2.3.3 RG-Ⅱ区域的质谱序列分析第36页
    2.3.4 RG-Ⅰ区域的质谱序列分析第36-37页
3 课题研究意义及主要内容第37-39页
参考文献第39-46页
第二章 分步降解联合串联质谱解析果胶精细结构的方法学的建立第46-79页
1 引言第46页
2 材料与仪器第46-47页
  2.1 实验原料第46页
  2.2 主要实验试剂和材料第46-47页
  2.3 主要实验仪器第47页
3 实验方法第47-53页
  3.1 柑橘果胶的纯化及理化性质研究第47-51页
    3.1.1 柑橘果胶的纯化第47-48页
    3.1.2 总糖含量的测定第48页
    3.1.3 蛋白含量测定第48-49页
    3.1.4 硫酸根含量测定第49页
    3.1.5 糖醛酸含量测定第49-50页
    3.1.6 分子量测定第50页
    3.1.7 单糖组成分析第50-51页
    3.1.8 傅里叶变换红外光谱(FTIR)分析第51页
  3.2 柑橘果胶寡糖的制备第51-52页
    3.2.1 正交试验确定酸降解条件第51页
    3.2.2 果胶酶降解条件摸索第51-52页
    3.2.3 柑橘果胶的分步降解第52页
    3.2.4 不同系列寡糖的分离纯化第52页
  3.3 寡糖的还原第52页
  3.4 寡糖的ESI-CID-MS~n分析第52-53页
4 实验结果第53-76页
  4.1 柑橘果胶的纯化及理化性质研究第53-56页
    4.1.1 柑橘果胶的纯化第53页
    4.1.2 CP的分子量测定及纯度分析第53-54页
    4.1.3 CP的理化性质分析第54-55页
    4.1.4 CP的单糖组成分析第55页
    4.1.5 CP的红外光谱分析第55-56页
  4.2 寡糖的制备第56-60页
    4.2.1 寡糖的分步降解第57-59页
    4.2.2 寡糖的分离纯化第59页
    4.2.3 CP-S、CP-E的~1H-NMR分析第59-60页
  4.3 寡糖的ESI-CID-MS~n分析第60-74页
    4.3.1 RG-I区域主链结构的ESI-CID-MS~n分析第64-68页
    4.3.2 RG-I区域主链与侧链连接域的ESI-CID-MS~n分析第68-70页
    4.3.3 RG-I区域半乳糖侧链的ESI-CID-MS~n分析第70-72页
    4.3.4 HG区域寡糖的ESI-CID-MS~n分析第72-74页
  4.4 呋喃型阿拉伯寡糖的降解第74-76页
5 本章小结第76-77页
参考文献第77-79页
第三章 三种大叶藻来源果胶的提取分离纯化、结构解析第79-132页
1 引言第79-80页
2 材料与仪器第80-81页
  2.1 实验原料第80页
  2.2 主要实验试剂和材料第80页
  2.3 主要实验仪器第80-81页
3 实验方法第81-87页
  3.1 多糖提取第81页
  3.2 粗多糖的单糖组成测定第81-82页
  3.3 多糖的分离纯化及纯度鉴定第82-83页
    3.3.1 多糖的Q-Sepharose Fast Flow离子交换色谱纯化第82-83页
    3.3.2 醋酸纤维素薄膜电泳第83页
  3.4 纯化后多糖的理化性质研究第83页
  3.5 ZCAP的结构解析第83-87页
    3.5.1 ZCAP的寡糖制备第83-85页
    3.5.2 不同系列寡糖的分离纯化第85页
    3.5.3 寡糖的还原第85页
    3.5.4 寡糖的ESI-CID-MS~n分析第85页
    3.5.5 羧基还原、甲基化反应及GC/MS分析第85-87页
    3.5.6 寡糖混合物的NMR分析第87页
  3.6 ZMAP的甲基化分析第87页
4 实验结果与讨论第87-129页
  4.1 粗多糖的提取第87-88页
  4.2 六种大叶藻粗多糖的单糖组成分析第88-89页
  4.3 三种草酸铵提取粗多糖的分离纯化第89-91页
  4.4 三种大叶藻果胶的理化性质、分子量、单糖组成及红外光谱分析第91-97页
    4.4.1 三种大叶藻果胶的理化性质分析第91-93页
    4.4.2 ZAAP、ZCAP和ZMAP的分子量分析第93-95页
    4.4.3 三种大叶藻果胶的单糖组成分析第95-96页
    4.4.4 三种大叶藻果胶的红外光谱分析第96-97页
  4.5 ZCAP的结构解析第97-120页
    4.5.1 ZCAP寡糖的制备第97-102页
    4.5.2 ZCMP寡糖的ESI-MS分析第102页
    4.5.3 ZCMP寡糖的ESI-CID-MS~2分析第102-109页
      4.5.3.3 AGA区域主链寡糖的ESI-CID-MS~2分析第109-112页
    4.5.4 ZCAP的甲基化分析第112-117页
    4.5.5 ZCAP-SS的核磁共振波谱(NMR)分析第117-120页
  4.6 ZMAP的甲基化分析第120-129页
5 本章小结第129-130页
参考文献第130-132页
第四章 五种中药材来源果胶的提取分离纯化及结构解析第132-169页
1 引言第132页
2 材料与仪器第132-133页
  2.1 实验原料第132页
  2.2 主要实验试剂和材料第132-133页
  2.3 主要实验仪器第133页
3 实验方法第133-136页
  3.1 多糖粗品的提取第133-134页
  3.2 理化性质分析第134页
  2.3 粗多糖的分离纯化第134-135页
  3.4 纯度分析-醋酸纤维素薄膜电泳法第135页
  3.5 当归草酸铵提取多糖DGP的结构解析第135-136页
    3.5.1 当归草酸铵提取多糖DGP的寡糖制备第135-136页
    3.5.2 当归草酸铵提取多糖DGP的羧记还原及甲基化分析第136页
  3.6 人参草酸铵提取多糖RSP的羧基还原及甲基化分析第136页
4 实验结果-与讨论第136-166页
  4.1 粗多糖的提取第136-137页
  4.2 粗多糖的单糖组成分析第137-139页
  4.3 草酸铵提取粗多糖的分离纯化及纯度鉴定第139-142页
    4.3.1 粗多糖的Q Sepharose Fast Flow强效阴离子色谱纯化第139-141页
    4.3.2 纯度鉴定-醋酸纤维素薄膜电泳第141-142页
  4.4 纯化多糖的理化性质、红外光谱及单糖组成分析第142-145页
  4.5 当归草酸铵提取多糖DGP的结构解析第145-161页
    4.5.1 DGP寡糖的制备第145-147页
    4.5.2 DGP寡糖组分的ESI-MS分析第147-152页
    4.5.3 DGP寡糖的ESI-CID-MS~2分析第152-155页
    4.5.4 DGP的甲基化分析第155-161页
  4.6 人参草酸铵提取多糖RSP的甲基化分析第161-166页
5 本章小结第166-168页
参考文献第168-169页
第五章 不同来源果胶多糖的抗肿瘤活性筛选及初步构效关系研究第169-181页
1 引言第169-170页
2 实验材料第170页
  2.1 材料与试剂第170页
  2.2 仪器与设备第170页
3 实验方法第170-172页
  3.1 ZMAP寡糖片段制备第170-171页
  3.2 ZMAP寡糖的单糖组成测定第171页
  3.3 HUVEC细胞增殖抑制实验第171页
  3.4 HUVEC细胞迁移抑制实验第171页
  3.5 Raw264.7细胞吞噬中性红实验第171-172页
4 实验结果第172-177页
  4.1 HUVEC细胞增殖抑制实验第172-173页
  4.2 HUVEC细胞迁移抑制实验第173-175页
  4.3 Raw264.7细胞吞噬中性红实验第175-177页
5 讨论及本章小结第177-179页
参考文献第179-181页
结论第181-183页
创新点第183-184页
今后工作展望第184-185页
个人简历第185页
学术成果第185-189页
致谢第189页

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