论文目录 | |
摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-22页 |
前言 | 第22-30页 |
参考文献 | 第25-30页 |
第一章 TXNIP与Her-1/Her-2信号通路相互作用与乳腺癌总生存期的关的关系 | 第30-60页 |
一. 实验材料 | 第30-31页 |
1.1 细胞株 | 第30页 |
1.2 质粒 | 第30-31页 |
1.3 乳腺癌组织芯片及临床标本 | 第31页 |
二. 实验试剂与设备 | 第31-34页 |
2.1 药品与试剂 | 第31-33页 |
2.2 材料与设备 | 第33-34页 |
三. 实验方法 | 第34-45页 |
3.1 免疫组织化学 | 第34页 |
3.2 质粒的转化、扩增及提取 | 第34-35页 |
3.3 瞬时转染 | 第35页 |
3.4 总蛋白质的提取与浓度测定 | 第35-36页 |
3.5 蛋白质免疫印迹 | 第36-38页 |
3.6 PI染色检测细胞周期 | 第38-39页 |
3.7 AnnexinV/PI染色检测细胞凋亡 | 第39页 |
3.8 平板克隆形成实验 | 第39-40页 |
3.9 细胞计数 | 第40页 |
3.10 实时荧光定量PCR | 第40-43页 |
3.11 双荧光素酶试验 | 第43页 |
3.12 免疫荧光染色 | 第43-44页 |
3.13 统计学分析 | 第44-45页 |
四. 实验结果 | 第45-54页 |
4.1 TXNIP和p27与乳腺癌患者OS密切相关 | 第45-49页 |
4.2. TXNIP对Her-1/Her-2阳性乳腺癌细胞周期和细胞凋亡的影响 | 第49-52页 |
4.3 Her-1/Her-2抑制剂对TXNIP的调控作用 | 第52-54页 |
五. 讨论 | 第54-57页 |
参考文献 | 第57-60页 |
第二章 拉帕替尼介导miR-1470下调c-Jun参与p27的表达调控机制 | 第60-93页 |
一. 实验材料 | 第60-61页 |
1.1 细胞株 | 第60页 |
1.2 质粒 | 第60-61页 |
二. 实验试剂与设备 | 第61-64页 |
2.1 药品与试剂 | 第61-63页 |
2.2 材料与设备 | 第63-64页 |
三. 实验方法 | 第64-73页 |
3.1 miRNA-array | 第64页 |
3.2 生物信息学分析 | 第64页 |
3.3 实时荧光定量PCR | 第64-67页 |
3.4 免疫荧光染色 | 第67页 |
3.5 质粒的转化、扩增及提取 | 第67-68页 |
3.6 瞬时转染 | 第68-69页 |
3.7 总蛋白质的提取与浓度测定 | 第69页 |
3.8 蛋白质免疫印迹 | 第69-71页 |
3.9 PI染色检测细胞周期 | 第71-72页 |
3.10 AnnexinV/PI染色检测细胞凋亡 | 第72页 |
3.11 双荧光素酶试验 | 第72-73页 |
3.12 统计学分析 | 第73页 |
四. 实验结果 | 第73-85页 |
4.1 拉帕替尼对p27的调控作用 | 第73-74页 |
4.2 拉帕替尼对Her-2信号通路的影响 | 第74-75页 |
4.3 拉帕替尼对乳腺癌细胞中miRNA表达谱改变的影响 | 第75-82页 |
4.4 miR-1470对c-Jun的靶向调控关系 | 第82-85页 |
五. 讨论 | 第85-89页 |
参考文献 | 第89-93页 |
结论与展望 | 第93-94页 |
综述一 | 第94-105页 |
参考文献 | 第100-105页 |
综述二 | 第105-117页 |
参考文献 | 第112-117页 |
攻读博士期间发表的论文 | 第117-119页 |
致谢 | 第119-121页 |