论文目录 | |
缩略语表 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
前言 | 第15-16页 |
文献回顾 | 第16-31页 |
第一部分: MG5在胃癌高危人群中的预警作用 | 第31-41页 |
1 材料 | 第31-32页 |
1.1 主要试剂及仪器 | 第31页 |
1.2 组织标本 | 第31-32页 |
2 方法 | 第32-34页 |
2.0 MG5单克隆抗体的大量制备及纯化 | 第32-33页 |
2.1 免疫组织化学(IHC) | 第33-34页 |
2.2 IHC染色评分方法及统计学分析 | 第34页 |
3 结果 | 第34-38页 |
3.1 研究对象的基本资料: | 第34-35页 |
3.2 MG5表达与基线病变的关系: | 第35-36页 |
3.3 MG5表达与胃黏膜病变转归的关系: | 第36-37页 |
3.4 MG5表达与胃癌发展的关系: | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38-41页 |
第二部分: MG5在多种人类常见肿瘤组织中的高通量免疫组化研究 | 第41-50页 |
1 材料 | 第41-42页 |
1.1 组织芯片免疫组化实验材料 | 第41页 |
1.2 肿瘤组织芯片 | 第41-42页 |
2 方法 | 第42-43页 |
2.1 组织芯片免疫组化(TMA-IHC) | 第42-43页 |
2.2 IHC染色评分方法及统计学分析 | 第43页 |
3 结果 | 第43-48页 |
3.1 MG5在八种常见的肿瘤组织中的表达阳性率 | 第43-45页 |
3.2 MG5表达与肿瘤临床病理学参数之间的相关性 | 第45-46页 |
3.3 MG5表达与肿瘤患者预后的相关性分析 | 第46-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
第三部分 MG5的抗原鉴定 | 第50-57页 |
1 材料 | 第50-51页 |
1.1 细胞系 | 第50页 |
1.2 抗体及主要试剂 | 第50页 |
1.3 主要仪器及耗材 | 第50-51页 |
2 方法 | 第51-53页 |
2.1 细胞培养 | 第51页 |
2.2 免疫沉淀 | 第51-52页 |
2.3 Western blot | 第52页 |
2.4 质谱分析 | 第52-53页 |
2.5 细胞免疫荧光 | 第53页 |
2.6 慢病毒感染 | 第53页 |
3 结果MG5的抗原本质是LMAP2A | 第53-55页 |
讨论 | 第55-57页 |
第四部分 MG5/LAMP2A在胃癌细胞增殖中的作用及相关分子机制 | 第57-77页 |
1 材料 | 第57-59页 |
1.1 细胞系 | 第57页 |
1.2 抗体 | 第57-58页 |
1.3 主要试剂 | 第58页 |
1.4 主要仪器及耗材 | 第58-59页 |
2 方法 | 第59-64页 |
2.1 细胞培养 | 第59页 |
2.2 MTT实验 | 第59页 |
2.3 平板克隆形成实验 | 第59页 |
2.4 裸鼠体内成瘤实验 | 第59页 |
2.5 免疫共沉淀(Co-IP) | 第59-60页 |
2.6 Western blot | 第60-61页 |
2.7 质谱分析 | 第61页 |
2.8 慢病毒感染建立稳转细胞系 | 第61页 |
2.9 细胞免疫荧光 | 第61-62页 |
2.10 溶酶体分离纯化和溶酶体摄取实验 | 第62-63页 |
2.11 流式细胞仪检测细胞周期和凋亡 | 第63页 |
2.12 蛋白氧化的检测 | 第63-64页 |
3 结果 | 第64-73页 |
3.1 下调LAMP2A/CMA抑制胃癌细胞系的增殖 | 第64-65页 |
3.2 筛选调节肿瘤细胞增殖的CMA底物蛋白 | 第65-67页 |
3.3 下调LAMP2A引起CMA底物蛋白Rho E的水平上调,进而抑制胃癌细胞增殖 | 第67-70页 |
3.4 下调LAMP2A导致氧化的DJ-1 积聚,促进氧化应激诱导的细胞凋亡 · 654 讨论 | 第70-73页 |
4 讨论 | 第73-77页 |
小结 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-101页 |
附录 | 第101-106页 |
个人简历和研究成果 | 第106-109页 |
致谢 | 第109-110页 |