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生物钟基因CLOCK促进神经胶质瘤的细胞增殖和迁移

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生物钟基因CLOCK促进神经胶质瘤的细胞增殖和迁移
论文目录
 
摘要第1-8页
Abstract第8-10页
前言第10-17页
实验材料第17-24页
  1. 主要化学试剂及实验材料第17-18页
  2. 主要仪器第18-19页
  3. 工具酶、相对分子质量标准及试剂盒第19-20页
  4. 抗体第20页
  5. 质粒构建载体第20页
  6. DNA引物和合成的小RNA第20-22页
  7. 菌株第22页
  8. 细胞株第22-23页
  9. 细胞培养基第23页
  10. 人正常脑组织和神经胶质瘤样本第23页
  11. 软件及网络资源第23-24页
实验方法第24-37页
  1. 组织及细胞总蛋白的提取第24页
  2. 蛋白质浓度测定第24-25页
  2.1 实验原理第24页
  2.2 试剂第24页
  2.3 实验步骤第24-25页
  3. Western blotting蛋白印记实验第25-26页
  3.1 Western-blotting杂交用液第25页
  3.2 Western-Blotting蛋白印迹杂交第25-26页
  4. 细胞总RNA的提取第26-27页
  5. 实时荧光定量PCR第27-28页
  5.1 原理第27页
  5.2 模板的制备第27-28页
  5.3 实时定量PCR第28页
  6. 克隆构建第28-32页
  6.1 PCR反应第28-29页
  6.2 PCR反应程序第29页
  6.3 限制性内切酶酶切反应第29-30页
  6.4 酶切产物回收第30页
  6.5 连接第30页
  6.6 转化第30-31页
  6.7 接菌第31页
  6.8 质粒抽提第31页
  6.9 酶切鉴定第31页
  6.10 测序及结果分析第31-32页
  7. 细胞培养及转染第32-33页
  7.1 细胞培养及传代第32页
  7.2 转染第32-33页
  8. MTT第33页
  8.1 原理第33页
  8.2 MTT溶液的配制第33页
  8.3 操作步骤第33页
  9. 克隆形成实验第33-34页
  10. TRANSWELL细胞迁移实验第34-35页
  10.1 实验原理第34页
  10.2 实验步骤第34-35页
  11. 细胞划痕实验第35页
  11.1 实验原理第35页
  11.2 实验步骤第35页
  12. 荧光素酶报告基因实验第35-36页
  12.1 原理第35页
  12.2 细胞样品的准备第35-36页
  12.3 荧光素酶基因活性检测第36页
  13. 数据处理和分析第36-37页
结果第37-52页
  1. 胶质瘤组织和胶质瘤细胞系中CLOCK蛋白表达检测第37-39页
  2. CLOCK对神经胶质瘤细胞的生长的影响第39-42页
  3. CLOCK对神经胶质瘤细胞的迁移的影响第42-43页
  4. miR-124在胶质瘤细胞中对CLOCK的靶向作用检测第43-47页
  5. MiR-124和CLOCK胶质瘤细胞中NF-κB的活性的影响第47-52页
讨论第52-57页
  1. CLOCK蛋白在胶质瘤中高表达提示CLOCK可能在胶质瘤发生发展中发挥功能第52页
  2. 生物钟基因CLOCK在胶质瘤中发挥促进肿瘤细胞生长和迁移作用第52-53页
  3. 胶质瘤中miR-124的低表达是CLOCK高表达的原因第53-54页
  4. CLOCK对NF-κB活性的影响第54-56页
  5. miR-124-CLOCK-NF-κB在神经胶质瘤中的关系第56-57页
小结第57页
不足与展望第57-58页
参考文献第58-66页
论文综述第66-96页
参考文献第85-96页
附录第96-97页
个人简历第97页
论文和会议摘要第97-98页
致谢第98-100页

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